| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·福氏志贺氏菌感染细胞的过程 | 第9-11页 |
| ·福氏志贺氏菌的TTSS | 第11-14页 |
| ·TTSS的组成 | 第11-12页 |
| ·TTSS的功能 | 第12-14页 |
| ·非TTSS毒力相关因子 | 第14-15页 |
| ·蛋白质的相互作用 | 第15页 |
| ·前期研究和发现 | 第15-16页 |
| ·基因敲除(gene knockout)技术 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 基因apy敲除突变体的构建过程和结果分析 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要溶液配制 | 第18-19页 |
| ·引物 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-25页 |
| ·基因apy同源重组片段的制备 | 第20-22页 |
| ·电击转化基因apy同源重组片段,发生同源重组 | 第22-24页 |
| ·鉴定M90T/Δapy::kan菌株 | 第24页 |
| ·M90T Aapy鉴定 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·基因apy上、下游同源臂和含两端FRT位点的基因kan片段的制备 | 第25-26页 |
| ·基因apy同源重组片段模板的制备 | 第26页 |
| ·基因apy同源重组片段的大量制备 | 第26-27页 |
| ·鉴定M90T/Napy::kan菌株 | 第27-28页 |
| ·鉴定M90T Δapy菌株 | 第28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 3 基因dnaK敲除突变体的构建过程和结果分析 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要溶液配制 | 第29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·基因dnaK同源重组片段的制备 | 第30-31页 |
| ·电击转化基因dnaK同源重组片段,发生同源重组 | 第31-32页 |
| ·鉴定M90T ΔdnaK：：kan菌株 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·基因dnaK上、下游同源臂和含两端FRT位点的kan基因片段的制备 | 第32-33页 |
| ·基因dnaK同源重组片段模板的制备 | 第33-34页 |
| ·基因dnaK同源重组片段的大量制备 | 第34页 |
| ·鉴定M90T ΔdnaK：：kan菌株 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 4 基因clpB、ydgA、icsA敲除突变体的构建过程和结果分析 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要溶液配制 | 第36页 |
| ·引物 | 第36-38页 |
| ·方法 | 第38页 |
| ·基因clpB、ydgA、icsA同源重组片段的制备 | 第38页 |
| ·电击转化基因clpB、ydgA、icsA同源重组片段,发生同源重组 | 第38页 |
| ·鉴定M9oT ΔclpB：：kan、M90T ΔydfA：：kan、M90T ΔicsA：：kan菌株 | 第38页 |
| ·M90T ΔclpB、M90T ΔydgA、M90T ΔicsA菌株的制备 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·鉴定M90T ΔclpB：：kan、M90T ΔydgA：：kan、M90T AicsA：：kan菌株 | 第38-39页 |
| ·鉴定M0T AclpB、M90T ΔydgA、M90T AicsA菌株 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41页 |
| 6 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录 | 第49-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
