中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
符号说明 | 第12-14页 |
文献综述 | 第14-29页 |
1 S.aureus毒力因子 | 第14-20页 |
·荚膜多糖 | 第14页 |
·黏附素 | 第14-16页 |
·凝集因子 | 第15页 |
·FnBPs | 第15-16页 |
·Cna | 第16页 |
·毒素 | 第16-19页 |
·溶血素 | 第16页 |
·肠毒素 | 第16-17页 |
·毒素休克综合症毒素1 | 第17-18页 |
·溶解素 | 第18页 |
·杀白细胞素 | 第18-19页 |
·胞外粘性物质(ESS) | 第19页 |
·酶和其它的细菌成分 | 第19-20页 |
·凝固酶 | 第20页 |
·耐热核酸酶 | 第20页 |
2 S.aureus铁摄取途径及其机制 | 第20-29页 |
·受体结合含铁蛋白的运输机制 | 第21-22页 |
·铁载体的运输 | 第22-27页 |
·S.aureus的铁载体 | 第24-25页 |
·S.aureus铁载体的ABC运输系统(ABC transporter) | 第25-27页 |
·铁载体运输系统的调控 | 第27-29页 |
研究一、金黄色葡萄球菌铁载体受体蛋白SirA的表达及抗SirA蛋白多抗的制备 | 第29-38页 |
摘要 | 第29页 |
Abstract | 第29页 |
1 材料 | 第29-31页 |
·菌种与载体 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·寡核苷酸引物 | 第30-31页 |
·主要溶液的配制 | 第31页 |
·试验动物 | 第31页 |
2 方法 | 第31-35页 |
·sirA基因的克隆与鉴定 | 第31-33页 |
·PCR模板DNA的制备 | 第31-32页 |
·sirA基因的PCR扩增 | 第32页 |
·sirA基因片段PCR产物的回收与纯化 | 第32-33页 |
·重组质粒pCold~(TM) TF-sirA的构建及鉴定 | 第33页 |
·序列测定 | 第33页 |
·sirA基因在pCold~(TM)TF载体中的原核表达 | 第33-34页 |
·SirA重组蛋白的纯化及浓度测定 | 第34页 |
·SirA重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第34-35页 |
·小鼠的免疫 | 第34页 |
·SirA蛋白多抗效价检测 | 第34-35页 |
·分离血清 | 第35页 |
3 试验结果 | 第35-37页 |
·PCR产物电泳结果 | 第35页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
·重组质粒表达产物分析 | 第36页 |
·sirA多克隆抗体效价的检测 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
研究二、SirA在金黄色葡萄球菌致病过程中作用的初探 | 第38-49页 |
摘要 | 第38页 |
Abstract | 第38-39页 |
1 材料 | 第39-40页 |
·菌种 | 第39页 |
·实验动物 | 第39页 |
·其他材料 | 第39页 |
·主要试剂的配制 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-44页 |
·铁限制性培养条件对金黄色葡萄球菌sirA基因表达量的检测 | 第40-41页 |
·细菌培养条件 | 第40页 |
·样品制备 | 第40页 |
·铁限制培养条件下金黄色葡萄球菌SirA蛋白表达的检测 | 第40-41页 |
·SirA蛋白免疫后进行小鼠鼻腔定植 | 第41-42页 |
·免疫原的制备 | 第41页 |
·动物免疫 | 第41页 |
·鼻腔粘附实验 | 第41-42页 |
·鼻腔组织细菌计数 | 第42页 |
·用抗体处理后的金黄色葡萄球菌进行鼻腔定植 | 第42-43页 |
·菌液的制备 | 第42页 |
·细菌的鼻腔粘附 | 第42-43页 |
·抗体生长抑制实验 | 第43-44页 |
·种子液制备 | 第43页 |
·不同效价抗体对缺铁培养条件下细菌生长的作用 | 第43页 |
·不同效价抗体对富铁培养条件下细菌生长的作用 | 第43-44页 |
·数据处理和分析 | 第44页 |
3 试验结果 | 第44-47页 |
·铁限制性培养条件对金黄色葡萄球菌sirA基因的表达情况 | 第44-45页 |
·SirA蛋白免疫后对小鼠进行鼻腔定植的影响 | 第45-46页 |
·抗体处理后的金黄色葡萄球菌进行鼻腔定植情况 | 第46-47页 |
·SirA多抗对金黄色葡萄球菌的生长抑制实验 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |