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金黄色葡萄球菌Fe摄取调节蛋白SirA的原核表达及其功能的初步研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-12页
符号说明第12-14页
文献综述第14-29页
 1 S.aureus毒力因子第14-20页
   ·荚膜多糖第14页
   ·黏附素第14-16页
     ·凝集因子第15页
     ·FnBPs第15-16页
     ·Cna第16页
   ·毒素第16-19页
     ·溶血素第16页
     ·肠毒素第16-17页
     ·毒素休克综合症毒素1第17-18页
     ·溶解素第18页
     ·杀白细胞素第18-19页
     ·胞外粘性物质(ESS)第19页
   ·酶和其它的细菌成分第19-20页
     ·凝固酶第20页
     ·耐热核酸酶第20页
 2 S.aureus铁摄取途径及其机制第20-29页
   ·受体结合含铁蛋白的运输机制第21-22页
   ·铁载体的运输第22-27页
     ·S.aureus的铁载体第24-25页
     ·S.aureus铁载体的ABC运输系统(ABC transporter)第25-27页
   ·铁载体运输系统的调控第27-29页
研究一、金黄色葡萄球菌铁载体受体蛋白SirA的表达及抗SirA蛋白多抗的制备第29-38页
 摘要第29页
 Abstract第29页
 1 材料第29-31页
   ·菌种与载体第29-30页
   ·主要试剂第30页
   ·主要仪器设备第30页
   ·寡核苷酸引物第30-31页
   ·主要溶液的配制第31页
   ·试验动物第31页
 2 方法第31-35页
   ·sirA基因的克隆与鉴定第31-33页
     ·PCR模板DNA的制备第31-32页
     ·sirA基因的PCR扩增第32页
     ·sirA基因片段PCR产物的回收与纯化第32-33页
     ·重组质粒pCold~(TM) TF-sirA的构建及鉴定第33页
     ·序列测定第33页
   ·sirA基因在pCold~(TM)TF载体中的原核表达第33-34页
   ·SirA重组蛋白的纯化及浓度测定第34页
   ·SirA重组蛋白多克隆抗体的制备第34-35页
     ·小鼠的免疫第34页
     ·SirA蛋白多抗效价检测第34-35页
     ·分离血清第35页
 3 试验结果第35-37页
   ·PCR产物电泳结果第35页
   ·重组质粒的酶切鉴定结果第35-36页
   ·重组质粒表达产物分析第36页
   ·sirA多克隆抗体效价的检测第36-37页
 4 讨论第37-38页
研究二、SirA在金黄色葡萄球菌致病过程中作用的初探第38-49页
 摘要第38页
 Abstract第38-39页
 1 材料第39-40页
   ·菌种第39页
   ·实验动物第39页
   ·其他材料第39页
   ·主要试剂的配制第39-40页
 2 方法第40-44页
   ·铁限制性培养条件对金黄色葡萄球菌sirA基因表达量的检测第40-41页
     ·细菌培养条件第40页
     ·样品制备第40页
     ·铁限制培养条件下金黄色葡萄球菌SirA蛋白表达的检测第40-41页
   ·SirA蛋白免疫后进行小鼠鼻腔定植第41-42页
     ·免疫原的制备第41页
     ·动物免疫第41页
     ·鼻腔粘附实验第41-42页
     ·鼻腔组织细菌计数第42页
   ·用抗体处理后的金黄色葡萄球菌进行鼻腔定植第42-43页
     ·菌液的制备第42页
     ·细菌的鼻腔粘附第42-43页
   ·抗体生长抑制实验第43-44页
     ·种子液制备第43页
     ·不同效价抗体对缺铁培养条件下细菌生长的作用第43页
     ·不同效价抗体对富铁培养条件下细菌生长的作用第43-44页
   ·数据处理和分析第44页
 3 试验结果第44-47页
   ·铁限制性培养条件对金黄色葡萄球菌sirA基因的表达情况第44-45页
   ·SirA蛋白免疫后对小鼠进行鼻腔定植的影响第45-46页
   ·抗体处理后的金黄色葡萄球菌进行鼻腔定植情况第46-47页
   ·SirA多抗对金黄色葡萄球菌的生长抑制实验第47页
 4 讨论第47-49页
参考文献第49-58页
致谢第58-59页

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