甜瓜α-甘露糖苷酶基因cDNA片段的克隆、RNAi载体构建及转化
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 英文缩写及中英文对照表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-23页 |
| ·α-甘露糖苷酶概况 | 第10-13页 |
| ·α-甘露糖苷酶及其基因的研究现状 | 第13-17页 |
| ·动物α-甘露糖苷酶及其基因的研究现状 | 第13-15页 |
| ·植物α-甘露糖苷酶及其基因的研究现状 | 第15-17页 |
| ·转基因甜瓜的研究概况 | 第17-23页 |
| ·甜瓜转基因方法 | 第17-21页 |
| ·转基因耐贮藏甜瓜研究进展 | 第21-23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌种与质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·引物设计和合成 | 第24-25页 |
| ·α-Man cDNA片段的克隆 | 第25-28页 |
| ·α-Man RNAi中间载体的构建 | 第28-32页 |
| ·α-Man RNAi表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·花粉管通道法转化河套蜜瓜 | 第34-35页 |
| ·T_0转化植株的检测 | 第35-36页 |
| ·T_1代转基因耐贮藏甜瓜株系的筛选 | 第36-37页 |
| ·T_2代转基因耐贮藏甜瓜植株检测 | 第37-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-54页 |
| ·cDNA克隆 | 第38-43页 |
| ·RNA的分析 | 第38页 |
| ·RT-PCR产物分析 | 第38-39页 |
| ·克隆载体重组质粒的筛选 | 第39页 |
| ·菌落PCR检测 | 第39-40页 |
| ·α-Man cDNA片段序列分析 | 第40-43页 |
| ·RNAi中间载体构建 | 第43-46页 |
| ·目的片段PCR产物分析 | 第43页 |
| ·正向片段重组质粒的筛选 | 第43-44页 |
| ·菌落PCR检测 | 第44页 |
| ·酶切鉴定 | 第44页 |
| ·反向片段重组质粒的筛选 | 第44-45页 |
| ·菌落PCR检测 | 第45页 |
| ·酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·RNAi表达载体构建 | 第46-47页 |
| ·表达载体的筛选 | 第46页 |
| ·菌落PCR检测 | 第46-47页 |
| ·酶切鉴定 | 第47页 |
| ·T_0代植株检测 | 第47-49页 |
| ·T_0代转基因耐贮藏甜瓜植株的筛选 | 第49-50页 |
| ·T_1转基因甜瓜植株PCR检测 | 第50-52页 |
| ·T_2代转基因耐贮藏甜瓜株系的获得 | 第52-54页 |
| 4. 讨论 | 第54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
