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草莓抗坏血酸代谢相关酶基因apx和dhar的克隆、序列分析及其表达模式研究

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩写词第13-14页
第一章 文献综述第14-30页
 1 抗坏血酸在植物体内的生理功能第14-17页
   ·抗坏血酸在植物抗氧化系统中的作用第14-15页
   ·抗坏血酸在植物光合作用和光保护中的作用第15-16页
   ·抗坏血酸在植物生长发育中的作用第16-17页
   ·抗坏血酸在植物信号传递中的作用第17页
 2 抗坏血酸在植物体内的合成和代谢途径第17-21页
   ·植物抗坏血酸的生物合成途径第17-20页
     ·碳链倒位途径第18页
     ·邻酮醛糖途径第18页
     ·L-半乳糖途径第18-19页
     ·糖醛酸转变途径第19页
     ·抗坏血酸合成的其它可能途径第19-20页
   ·植物抗坏血酸的代谢途径第20-21页
 3 植物体内抗坏血酸过氧化物酶和脱氢抗坏血酸还原酶研究进展第21-25页
   ·抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC 1.11.1.11)第21-23页
   ·脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR,EC 1.8.5.1)第23-25页
 4 cDNA和DNA末端快速克隆技术研究进展第25-28页
   ·cDNA末端快速扩增技术第25-26页
   ·单侧寡聚核苷酸嵌套PCR第26-28页
 5 本研究的目的、意义和技术路线第28-30页
第二章 草莓抗坏血酸代谢相关酶基因apx和dhar的克隆第30-63页
 1 材料和方法第30-46页
   ·试验材料第30-36页
     ·植物材料第30页
     ·菌株第30-31页
     ·载体第31页
     ·试剂与试剂盒第31页
     ·培养基第31-32页
     ·溶液和缓冲液第32-36页
   ·主要仪器设备第36-37页
   ·试验方法第37-46页
     ·草莓果实DNA的提取第37-38页
     ·草莓果实RNA的提取第38页
     ·草莓apx和dhar基因的克隆策略第38-39页
     ·引物的设计与合成第39-40页
     ·电泳技术第40页
     ·DNA/RNA OD值的测定第40-41页
     ·反转录第41页
     ·PCR扩增第41-43页
     ·PCR产物的胶回收第43-44页
     ·DNA片段和载体DNA的连接第44-45页
     ·大肠杆菌的转化第45页
     ·阳性克隆的筛选和鉴定第45-46页
     ·DNA序列测定和分析第46页
 2 结果与分析第46-60页
   ·草莓apx基因的克隆第46-52页
     ·草莓apx基因中间片段的克隆第46-47页
     ·草莓apx基因中间片段的序列测定与分析第47页
     ·草莓apx基因的3'端全长序列和5'端部分序列的克隆第47-48页
     ·草莓apx基因3'端全长序列和5'端部分序列的测定与分析第48-49页
     ·草莓Faapx-c基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析第49-52页
   ·草莓dhar基因的克隆第52-60页
     ·草莓dhar基因中间片段的克隆第52页
     ·草莓dhar基因中间片段的序列测定与分析第52-53页
     ·SON-PCR扩增草莓dhar基因的侧翼序列第53-54页
     ·草莓dhar基因侧翼序列测定与分析第54-56页
     ·草莓Fadhar基因编码区全长cDNA序列的分离及克隆第56页
     ·草莓Fadhar基因编码区全长序列及其推导的氨基酸序列分析第56-57页
     ·草莓Fadhar基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析第57-60页
 3 讨论第60-61页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因的分离与克隆第60-61页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因的同源性分析第61页
 4 小结第61-63页
第三章 草莓抗坏血酸代谢相关酶基因Faapx-c和Fadhar及其所编码蛋白的生物信息学分析第63-87页
 1 材料和方法第63-64页
   ·计算机和操作系统第63页
   ·生物信息学软件第63页
   ·主要数据库及用途第63-64页
 2 结果与分析第64-83页
   ·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列分析第64-67页
     ·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列碱基组成第64-65页
     ·草莓Faapx-c和Fadhar基因CDS序列密码子偏好性分析第65-67页
   ·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的结构分析第67-73页
     ·一级结构分析第67-69页
     ·二级结构分析与预测第69-71页
     ·三级结构分析与预测第71-73页
   ·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的功能预测第73-83页
     ·保守结构域分析第73-75页
     ·信号肽预测分析第75-76页
     ·卷曲螺旋预测分析第76-77页
     ·跨膜区分析第77-78页
     ·糖基化位点分析第78-80页
     ·磷酸化位点分析第80页
     ·新基因的电子表达谱分析第80-83页
 3 讨论第83-85页
   ·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列分析第83-84页
   ·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的结构分析第84-85页
   ·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的功能预测第85页
 4 小结第85-87页
第四章 草莓抗坏血酸代谢相关酶Faapx-c和Fadhar基因的表达模式分析第87-97页
 1 材料和方法第87-89页
   ·试验材料第87-88页
     ·植物材料第88页
     ·试剂第88页
     ·仪器设备第88页
   ·试验方法第88-89页
     ·技术路线第88页
     ·总RNA的提取第88页
     ·反转录第88-89页
     ·引物的设计与合成第89页
     ·PCR扩增及电泳第89页
     ·数据分析第89页
 2 结果与分析第89-93页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因的组织特异性表达分析第89-91页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因在果实不同发育阶段的表达分析第91-93页
 3 讨论第93-95页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因的组织特异性表达第93-94页
   ·草莓Faapx-c和Fadhar基因在果实不同发育阶段的表达第94-95页
 4 小结第95-97页
第五章 结论与研究展望第97-100页
 1 结论第97-98页
 2 研究展望第98-100页
参考文献第100-110页
致谢第110-111页
攻读博士期间论文发表情况第111-112页

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