中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩写词 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-30页 |
1 抗坏血酸在植物体内的生理功能 | 第14-17页 |
·抗坏血酸在植物抗氧化系统中的作用 | 第14-15页 |
·抗坏血酸在植物光合作用和光保护中的作用 | 第15-16页 |
·抗坏血酸在植物生长发育中的作用 | 第16-17页 |
·抗坏血酸在植物信号传递中的作用 | 第17页 |
2 抗坏血酸在植物体内的合成和代谢途径 | 第17-21页 |
·植物抗坏血酸的生物合成途径 | 第17-20页 |
·碳链倒位途径 | 第18页 |
·邻酮醛糖途径 | 第18页 |
·L-半乳糖途径 | 第18-19页 |
·糖醛酸转变途径 | 第19页 |
·抗坏血酸合成的其它可能途径 | 第19-20页 |
·植物抗坏血酸的代谢途径 | 第20-21页 |
3 植物体内抗坏血酸过氧化物酶和脱氢抗坏血酸还原酶研究进展 | 第21-25页 |
·抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC 1.11.1.11) | 第21-23页 |
·脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR,EC 1.8.5.1) | 第23-25页 |
4 cDNA和DNA末端快速克隆技术研究进展 | 第25-28页 |
·cDNA末端快速扩增技术 | 第25-26页 |
·单侧寡聚核苷酸嵌套PCR | 第26-28页 |
5 本研究的目的、意义和技术路线 | 第28-30页 |
第二章 草莓抗坏血酸代谢相关酶基因apx和dhar的克隆 | 第30-63页 |
1 材料和方法 | 第30-46页 |
·试验材料 | 第30-36页 |
·植物材料 | 第30页 |
·菌株 | 第30-31页 |
·载体 | 第31页 |
·试剂与试剂盒 | 第31页 |
·培养基 | 第31-32页 |
·溶液和缓冲液 | 第32-36页 |
·主要仪器设备 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-46页 |
·草莓果实DNA的提取 | 第37-38页 |
·草莓果实RNA的提取 | 第38页 |
·草莓apx和dhar基因的克隆策略 | 第38-39页 |
·引物的设计与合成 | 第39-40页 |
·电泳技术 | 第40页 |
·DNA/RNA OD值的测定 | 第40-41页 |
·反转录 | 第41页 |
·PCR扩增 | 第41-43页 |
·PCR产物的胶回收 | 第43-44页 |
·DNA片段和载体DNA的连接 | 第44-45页 |
·大肠杆菌的转化 | 第45页 |
·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第45-46页 |
·DNA序列测定和分析 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-60页 |
·草莓apx基因的克隆 | 第46-52页 |
·草莓apx基因中间片段的克隆 | 第46-47页 |
·草莓apx基因中间片段的序列测定与分析 | 第47页 |
·草莓apx基因的3'端全长序列和5'端部分序列的克隆 | 第47-48页 |
·草莓apx基因3'端全长序列和5'端部分序列的测定与分析 | 第48-49页 |
·草莓Faapx-c基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析 | 第49-52页 |
·草莓dhar基因的克隆 | 第52-60页 |
·草莓dhar基因中间片段的克隆 | 第52页 |
·草莓dhar基因中间片段的序列测定与分析 | 第52-53页 |
·SON-PCR扩增草莓dhar基因的侧翼序列 | 第53-54页 |
·草莓dhar基因侧翼序列测定与分析 | 第54-56页 |
·草莓Fadhar基因编码区全长cDNA序列的分离及克隆 | 第56页 |
·草莓Fadhar基因编码区全长序列及其推导的氨基酸序列分析 | 第56-57页 |
·草莓Fadhar基因cDNA序列及其编码氨基酸序列同源性分析 | 第57-60页 |
3 讨论 | 第60-61页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因的分离与克隆 | 第60-61页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因的同源性分析 | 第61页 |
4 小结 | 第61-63页 |
第三章 草莓抗坏血酸代谢相关酶基因Faapx-c和Fadhar及其所编码蛋白的生物信息学分析 | 第63-87页 |
1 材料和方法 | 第63-64页 |
·计算机和操作系统 | 第63页 |
·生物信息学软件 | 第63页 |
·主要数据库及用途 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-83页 |
·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列分析 | 第64-67页 |
·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列碱基组成 | 第64-65页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因CDS序列密码子偏好性分析 | 第65-67页 |
·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的结构分析 | 第67-73页 |
·一级结构分析 | 第67-69页 |
·二级结构分析与预测 | 第69-71页 |
·三级结构分析与预测 | 第71-73页 |
·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的功能预测 | 第73-83页 |
·保守结构域分析 | 第73-75页 |
·信号肽预测分析 | 第75-76页 |
·卷曲螺旋预测分析 | 第76-77页 |
·跨膜区分析 | 第77-78页 |
·糖基化位点分析 | 第78-80页 |
·磷酸化位点分析 | 第80页 |
·新基因的电子表达谱分析 | 第80-83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
·Faapx-c和Fadhar基因CDS序列分析 | 第83-84页 |
·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的结构分析 | 第84-85页 |
·Faapx-c和Fadhar基因编码蛋白的功能预测 | 第85页 |
4 小结 | 第85-87页 |
第四章 草莓抗坏血酸代谢相关酶Faapx-c和Fadhar基因的表达模式分析 | 第87-97页 |
1 材料和方法 | 第87-89页 |
·试验材料 | 第87-88页 |
·植物材料 | 第88页 |
·试剂 | 第88页 |
·仪器设备 | 第88页 |
·试验方法 | 第88-89页 |
·技术路线 | 第88页 |
·总RNA的提取 | 第88页 |
·反转录 | 第88-89页 |
·引物的设计与合成 | 第89页 |
·PCR扩增及电泳 | 第89页 |
·数据分析 | 第89页 |
2 结果与分析 | 第89-93页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因的组织特异性表达分析 | 第89-91页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因在果实不同发育阶段的表达分析 | 第91-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因的组织特异性表达 | 第93-94页 |
·草莓Faapx-c和Fadhar基因在果实不同发育阶段的表达 | 第94-95页 |
4 小结 | 第95-97页 |
第五章 结论与研究展望 | 第97-100页 |
1 结论 | 第97-98页 |
2 研究展望 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
攻读博士期间论文发表情况 | 第111-112页 |