| 符号说明 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 一、绵羊和绒山羊Izumo3cDNA的克隆 | 第10-27页 |
| ·材料和方法 | 第11-15页 |
| ·材料 | 第11-12页 |
| ·实验方法 | 第12-15页 |
| ·结果 | 第15-26页 |
| ·绵羊绒山羊睾丸组织总RNA的提取 | 第15页 |
| ·绒山羊Izumo3 cDNA克隆 | 第15-16页 |
| ·绵羊Izumo3 cDNA克隆 | 第16页 |
| ·绒山羊Izumo3 cDNA重组克隆载体的酶切鉴定,PCR鉴定及测序结果与分析 | 第16-21页 |
| ·绵羊和绒山羊的Izumo3氨基酸序列的对比分析 | 第21-22页 |
| ·绒山羊的Izumo3氨基酸分析 | 第22页 |
| ·抗原表位分析 | 第22-23页 |
| ·Izumo3系统发生树的绘制 | 第23-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 二、HIS-Izumo3重组蛋白的原核表达、分离与纯化 | 第27-38页 |
| ·材料和方法 | 第28-34页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·HIS-Izumo3重组载体的酶切及测序鉴定 | 第34页 |
| ·绒山羊HIS-Izumo3重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·HIS-Izumo3融合蛋白的Western blot的鉴定 | 第35-36页 |
| ·HIS-Izumo3融合蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·纯化后的HIS-Izumo3融合蛋白浓度的测定 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 三、抗绒山羊Izumo3腹水多克隆抗体的制备及纯化 | 第38-45页 |
| ·材料和方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·结果 | 第42-44页 |
| ·小鼠抗羊HIS-Izumo3多克隆抗体的鉴定 | 第42页 |
| ·小鼠抗HIS-Izumo3腹水多克隆抗体的纯化 | 第42-43页 |
| ·用小鼠抗HIS-Izumo3腹水多克隆抗体识别睾丸组织蛋白的鉴定 | 第43页 |
| ·小鼠抗山羊Izumo3多克隆抗体的效价测定 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 四、Izumo3在绒山羊睾丸组织及精子顶体反应前后的定位 | 第45-53页 |
| 前言 | 第45-46页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·绒山羊睾丸组织中Izumo3的定位 | 第49-50页 |
| ·绒山羊精子中Izumo3的定位 | 第50页 |
| ·绒山羊Izumo3顶体反应后在精子上的定位 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 五、文献综述 | 第53-69页 |
| ·Izumo家族的基因序列及对Izumo1进一步研究 | 第55-60页 |
| ·Izumo1氨基酸序列分析 | 第56-57页 |
| ·绒山羊和绵羊Izumo1肽链的二级结构分析 | 第57-59页 |
| ·对13种哺乳动物的Izumo1基因的结构比较 | 第59-60页 |
| ·对Izumo家族各基因的系统发生分析 | 第60-63页 |
| ·Izumo1系统发生树的绘制 | 第60-61页 |
| ·Izumo 2系统发生树的绘制 | 第61-62页 |
| ·Izumo 3系统发生树的绘制 | 第62页 |
| ·Izumo 4系统发生树的绘制 | 第62-63页 |
| ·Izumo家族蛋白的复合体形成 | 第63-65页 |
| ·Izumo家族蛋白的在精子上的定位 | 第65-66页 |
| ·和Izumo1相互作用的蛋白 | 第66-69页 |
| ·ACE蛋白 | 第66-67页 |
| ·TSSK6蛋白 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 读硕士期间参与的科研项目和发表的学术论文 | 第73页 |
| 1. 参加的研究项目 | 第73页 |
| 2. 发表的学术论文 | 第73页 |
