家蚕先天免疫相关基因Bmimd的克隆、表达及序列分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·昆虫免疫类型 | 第12-13页 |
| ·昆虫先天免疫机制 | 第13-19页 |
| ·模式识别受体 | 第13-14页 |
| ·昆虫抗微生物肽 | 第14页 |
| ·细胞免疫 | 第14-15页 |
| ·体液免疫 | 第15-19页 |
| ·imd 基因的研究情况 | 第19-22页 |
| ·imd 基因的发现 | 第19-20页 |
| ·imd 蛋白的性质及功能 | 第20-21页 |
| ·imd 基因调控的抗菌肽 | 第21页 |
| ·imd 基因在局部免疫中的作用 | 第21-22页 |
| ·imd 基因的其它功能 | 第22页 |
| ·家蚕先天免疫研究进展 | 第22-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| ·研究背景及意义 | 第24页 |
| ·研究的主要内容 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第三章 家蚕Bmimd基因的克隆及序列分析 | 第26-42页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·载体及宿主菌 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·方法和步骤 | 第27-33页 |
| ·同源性搜索及EST拼接 | 第27-28页 |
| ·Bmimd 基因的克隆 | 第28-32页 |
| ·Bmimd 基因的序列分析 | 第32-33页 |
| ·Bmimd 基因在各组织的表达 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·家蚕Bmimd基因的同源性检索与EST拼接 | 第33页 |
| ·家蚕Bmimd基因的cDNA克隆 | 第33-35页 |
| ·Bmimd 基因的序列分析 | 第35-38页 |
| ·Bmimd 基因组织芯片表达谱分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 家蚕Bmimd基因的原核表达 | 第42-52页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·试剂配制 | 第42-43页 |
| ·设备 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·含表达质粒菌株的诱导 | 第44-46页 |
| ·蛋白表达形式的鉴定 | 第46-47页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-50页 |
| ·重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·imd/PET-50b/BL21的诱导表达 | 第48页 |
| ·蛋白表达形式的鉴定 | 第48-49页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的表达特点 | 第50页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的表达形式 | 第50-52页 |
| 第五章 Bmimd蛋白的纯化、抗体制备及检测 | 第52-66页 |
| ·材料 | 第52-56页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·试剂配置 | 第52-56页 |
| ·方法 | 第56-60页 |
| ·Bmimd 包涵体的提取 | 第56-57页 |
| ·Bmimd 包涵体的纯化 | 第57页 |
| ·抗体制备及纯化 | 第57-58页 |
| ·Western blotting 检测表达蛋白 | 第58-59页 |
| ·家蚕imd蛋白组织表达谱分析 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·包涵体的提取与纯化 | 第60页 |
| ·抗体的制备及纯化 | 第60-61页 |
| ·Western blotting 检测表达蛋白 | 第61页 |
| ·家蚕imd蛋白组织表达谱分析 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| ·包涵体的纯化 | 第63-64页 |
| ·抗体的制备 | 第64页 |
| ·Bmimd蛋白表达谱分析 | 第64-65页 |
| ·对Bmimd基因的进一步研究思考 | 第65-66页 |
| 第六章 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 参加过的研究课题及发表论文一览表 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
