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马铃薯PPase基因克隆及其遗传转化研究

缩略语表第1-7页
摘要第7-8页
Summary第8-10页
第一章 文献综述第10-27页
   ·马铃薯块茎休眠与发芽第10-22页
     ·马铃薯块茎的形成第10-14页
     ·马铃薯块茎休眠与发芽第14-17页
     ·块茎休眠和发芽的调控因素第17-20页
     ·马铃薯块茎休眠与发芽调控研究第20-22页
   ·无机焦磷酸(PPi)第22-23页
     ·植物体内的磷代谢第22-23页
     ·植物体内的焦磷酸(PPi)第23页
   ·马铃薯无机焦磷酸酶(PPase)及其基因克隆研究第23-24页
     ·无机焦磷酸酶(PPase)的作用第23-24页
     ·无机焦磷酸酶(PPase)基因研究第24页
   ·基因工程技术在调控马铃薯块茎休眠与发芽中的应用第24-26页
   ·本研究的意义第26-27页
第二章 马铃薯无机焦磷酸酶基因cDNA 克隆第27-39页
   ·前言第27页
   ·材料第27-28页
     ·植物材料第27页
     ·菌种第27页
     ·酶和试剂第27页
     ·培养基第27-28页
   ·方法第28-34页
     ·马铃薯叶片总RNA 提取第28页
     ·RT-PCR 扩增马铃薯无机焦磷酸酶(PPase)基因 cDNA第28-30页
     ·克隆载体的质粒DNA 制备第30-31页
     ·质粒DNA 的酶切、回收和连接第31-33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第33页
     ·转化子蓝白斑筛选与鉴定第33-34页
     ·序列分析及比较第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·马铃薯叶片总RNA 提取和质量检测第34-35页
     ·PPase 基因cDNA 的扩增第35页
     ·PPase 基因克隆重组子的筛选第35-36页
     ·PPase 基因重组子pSKAP 的鉴定第36页
     ·PPase 基因序列分析第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 反义PPase 基因植物表达载体的构建第39-47页
   ·前言第39页
   ·材料第39页
   ·方法第39-44页
     ·表达载体的构建第39-40页
     ·重组体的筛选与鉴定第40-44页
   ·结果与分析第44-46页
     ·CaMV 35S 启动子驱动的PPase 基因表达载体构建第44页
     ·CIPP 启动子驱动的PPase 基因表达载体构建第44-45页
     ·rd29A 启动子驱动的PPase 基因表达载体构建第45-46页
   ·讨论第46-47页
第四章 反义PPase 基因转化马铃薯试管薯的研究第47-57页
   ·前言第47页
   ·材料第47页
     ·植物材料第47页
     ·菌株与质粒第47页
     ·酶和试剂第47页
     ·培养基第47页
   ·方法第47-51页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)第47-48页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的冻融法转化第48页
     ·微量碱法提取农杆菌Ti 质粒DNA第48-49页
     ·表达载体导入农杆菌的PCR 法鉴定第49页
     ·马铃薯试管薯的诱导第49-50页
     ·农杆菌介导的马铃薯试管薯的遗传转化第50页
     ·植物基因组总DNA 的提取第50-51页
     ·卡那霉素抗性植株的PCR 检测第51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·表达载体导入农杆菌的PCR 鉴定第51-52页
     ·马铃薯试管薯的诱导第52-53页
     ·马铃薯试管薯的转化第53页
     ·转基因马铃薯在Kan 培养基上生根第53-54页
     ·转基因植株的PCR 鉴定第54-55页
   ·讨论第55-57页
第五章 讨论与结论第57-61页
   ·讨论第57-59页
     ·马铃薯块茎休眠发芽与生产第57-58页
     ·基因工程技术调控马铃薯块茎休眠与发芽第58页
     ·PPase 基因克隆及反义植物表达载体构建第58页
     ·转反义PPase 基因马铃薯的获得第58-59页
   ·结论第59页
     ·PPase 基因cDNA 的克隆第59页
     ·反义PPase 基因植物表达载体的构建第59页
     ·农杆菌介导的马铃薯试管薯遗传转化第59页
   ·展望第59-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-68页
作者简介第68页
在读硕士期间发表论文第68-69页
导师简介第69-70页

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