| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第11-12页 |
| ·国内外研究动态 | 第12-24页 |
| ·乙烯及乙烯受体的研究 | 第12-13页 |
| ·NTHK1 基因的研究进展 | 第13-15页 |
| ·农杆菌介导的转化体系 | 第15-18页 |
| ·基因其他转化方法 | 第18-19页 |
| ·作物耐旱性研究进展 | 第19-21页 |
| ·作物耐盐性研究进展 | 第21-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂和药品 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·大肠杆菌中质粒 DNA 的小量提取 | 第25页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第25页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·目的DNA 片段的电泳回收 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备及宿主细胞的转化 | 第26-28页 |
| ·发根农杆菌介导的大豆根系转化体系 | 第28-29页 |
| ·目的基因的引物设计和 PCR 扩增 | 第29页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第29-31页 |
| ·GUS 基因检测 | 第31页 |
| ·毛状根的潮霉素临界浓度筛选 | 第31页 |
| ·NTHK1 基因耐盐功能鉴定 | 第31-32页 |
| ·NTHK1 基因耐旱功能的鉴定 | 第32页 |
| ·生理指标的测定 | 第32-34页 |
| ·根癌农杆菌介导的大豆子叶节再生体系转化 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-56页 |
| ·利用发根农杆菌介导的大豆转化根系鉴定NTHK1 基因功能 | 第36-53页 |
| ·载体构建 | 第36-39页 |
| ·表达载体的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·发根农杆菌侵染 | 第40-43页 |
| ·转基因毛状根的验证及筛选 | 第43-45页 |
| ·NTHK1 基因耐盐功能鉴定 | 第45-51页 |
| ·NTHK1 基因耐旱功能鉴定 | 第51-53页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化体系 | 第53-56页 |
| ·大豆的转化及再生 | 第53-54页 |
| ·不同品种再生频率的比较 | 第54页 |
| ·再生植株抗除草剂检测 | 第54-55页 |
| ·再生植株的PCR 检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·发根农杆菌转化体系的可能机理及不足 | 第56页 |
| ·根癌农杆菌转化体系的优化 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |