| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 黄花棘豆研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 黄花棘豆生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 黄花棘豆分布与危害 | 第12页 |
| 1.1.3 黄花棘豆毒理研究 | 第12-13页 |
| 1.1.4 黄花棘豆化感作用研究 | 第13页 |
| 1.1.5 本课题组黄花棘豆相关研究 | 第13-14页 |
| 1.2 抗逆相关NAC转录因子研究现状 | 第14-18页 |
| 1.2.1 NAC转录因子 | 第14-15页 |
| 1.2.2 NAC转录因子的结构特点及其分类 | 第15-16页 |
| 1.2.3 NAC转录因子与逆境胁迫 | 第16-18页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第18页 |
| 1.4 研究内容与技术路线 | 第18-21页 |
| 1.4.1 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 黄花棘豆NAC转录因子基因的克隆和序列分析 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料和菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂、酶与载体 | 第21页 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 各种溶液及培养基的配制 | 第22页 |
| 2.2.2 PCR引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.3 实验材料种植与处理 | 第23页 |
| 2.2.4 总RNA的提取(改良TRNzol法) | 第23-24页 |
| 2.2.5 cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| 2.2.6 PCR反应 | 第25页 |
| 2.2.7 目的片段回收 | 第25-26页 |
| 2.2.8 回收产物与克隆载体的连接 | 第26页 |
| 2.2.9 大肠杆菌(JM109)感受态的制备—CaCl_2法 | 第26页 |
| 2.2.10 反应产物转化大肠杆菌(蓝白斑筛选) | 第26-27页 |
| 2.2.11 菌落PCR | 第27页 |
| 2.2.12 质粒提取与酶切验证 | 第27-28页 |
| 2.2.13 OoNAC72基因序列分析 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.3.1 黄花棘豆总RNA样品质量检测 | 第29-30页 |
| 2.3.2 目的基因片段的筛选与克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.3 黄花棘豆OoNAC72基因生物信息学分析 | 第31-36页 |
| 2.3.4 OoNAC72与其他物种NAC蛋白序列同源性比较 | 第36-37页 |
| 2.3.5 黄花棘豆OoNAC72蛋白系统进化树分析 | 第37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 OoNAC72基因生物学特性分析 | 第39-49页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 3.2.1 OoNAC72转录因子亚细胞定位分析 | 第40-43页 |
| 3.2.2 ooNAC72转录因子转录激活活性分析 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-47页 |
| 3.3.1 OoNAC72转录因子亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
| 3.3.2 OoNAC72转录因子转录激活活性分析 | 第45-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 3.4.1 OoNAC72转录因子亚细胞定位讨论 | 第47页 |
| 3.4.2 OoNAC72基因转录激活活性讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 非生物胁迫与激素处理下的表达谱分析 | 第49-55页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第49页 |
| 4.1.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.3 实验仪器与设备 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-50页 |
| 4.2.1 qRT-PCR引物设计 | 第49-50页 |
| 4.2.2 RNA的提取与的cDNA第一链合成 | 第50页 |
| 4.2.3 qRT-PCR | 第50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-53页 |
| 4.3.1 黄花棘豆OoNAC72基因的熔解曲线分析 | 第50-51页 |
| 4.3.2 黄花棘豆OoNAC72基因非生物胁迫处理下的表达模式分析 | 第51-52页 |
| 4.3.3 黄花棘豆OoNAC72基因激素诱导下的表达模式分析 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 OoNAC72基因功能初步分析 | 第55-61页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第55-56页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第55页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第55页 |
| 5.1.3 实验仪器与设备 | 第55-56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 5.2.1 农杆菌侵染转化拟南芥 | 第56页 |
| 5.2.2 转基因拟南芥DNA提取(改良CTAB法) | 第56-57页 |
| 5.3 结果与分析 | 第57-59页 |
| 5.3.1 农杆菌转化 | 第57-58页 |
| 5.3.2 T1代转基因拟南芥阳性植株筛选 | 第58页 |
| 5.3.3 T1代转基因拟南芥阳性植株鉴定 | 第58-59页 |
| 5.3.4 T2代转基因拟南芥植株获取 | 第59页 |
| 5.4 讨论 | 第59-61页 |
| 结论与展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 攻读硕士学位期间获得的科研成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
