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猪肺炎支原体SYBR GREEN荧光定量PCR检测技术研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-20页
   ·猪肺炎支原体分子生物学研究进展第13-15页
     ·猪肺炎支原体的生物学特征第13页
     ·猪肺炎支原体的培养和分离第13-14页
     ·猪肺炎支原体主要抗原蛋白第14-15页
   ·猪肺炎支原体检测技术的研究进展第15-18页
     ·病原分离培养第15-16页
     ·血清学诊断方法第16页
     ·分子生物学诊断方法第16-17页
     ·Mhp的传统定量检测方法第17-18页
   ·Rea1 Time PCR第18-20页
     ·荧光嵌合法第18页
     ·TaqMan探针法第18-19页
     ·Real Time PCR在Mhp检测中的应用第19-20页
第二章 Mhp荧光定量PCR引物的筛选第20-31页
   ·材料与方法第20-23页
     ·菌株第20页
     ·生化试剂及试剂盒第20页
     ·主要仪器设备第20-21页
     ·引物设计第21页
     ·蛋白酶K裂解缓冲液的配制第21页
     ·5M NaCl配制第21-22页
     ·10%CTAB溶液配制第22页
     ·猪肺炎支原体基因组的提取第22页
     ·SYBR GREEN Real Time PCR反应体系第22页
     ·SYBR GREEN Real Time PCR反应循环参数第22-23页
     ·SYBR GREEN Real Time PCR方法的建立第23页
   ·结果第23-29页
     ·扩增曲线的建立第23-25页
     ·标准曲线的建立第25-27页
     ·熔解曲线的建立第27-29页
   ·结论与讨论第29-31页
     ·结论第29页
     ·讨论第29-31页
第三章 Mhp SYBR GREEN荧光定量PCR检测方法的建立第31-47页
   ·材料与方法第31-39页
     ·载体与菌株第31页
     ·生化试剂及试剂盒第31-32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·引物设计第32页
     ·特异性检测第32-35页
     ·含Mhp p110基因的标准质粒的构建第35-38页
     ·SYBR GREEN荧光定量PCR检测方法的建立第38-39页
   ·结果第39-44页
     ·特异性检测第39-40页
     ·含Mhp p110基因的标准质粒的构建第40-42页
     ·SYBR GREEN荧光定量PCR的反应条件第42页
     ·扩增曲线第42-43页
     ·标准曲线第43页
     ·溶解曲线分析第43-44页
     ·PCR灵敏度第44页
     ·重复性检测第44页
   ·结论与讨论第44-47页
     ·结论第44-45页
     ·讨论第45-47页
第四章 全文结论第47-48页
参考文献第48-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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