摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
·猪肺炎支原体分子生物学研究进展 | 第13-15页 |
·猪肺炎支原体的生物学特征 | 第13页 |
·猪肺炎支原体的培养和分离 | 第13-14页 |
·猪肺炎支原体主要抗原蛋白 | 第14-15页 |
·猪肺炎支原体检测技术的研究进展 | 第15-18页 |
·病原分离培养 | 第15-16页 |
·血清学诊断方法 | 第16页 |
·分子生物学诊断方法 | 第16-17页 |
·Mhp的传统定量检测方法 | 第17-18页 |
·Rea1 Time PCR | 第18-20页 |
·荧光嵌合法 | 第18页 |
·TaqMan探针法 | 第18-19页 |
·Real Time PCR在Mhp检测中的应用 | 第19-20页 |
第二章 Mhp荧光定量PCR引物的筛选 | 第20-31页 |
·材料与方法 | 第20-23页 |
·菌株 | 第20页 |
·生化试剂及试剂盒 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·引物设计 | 第21页 |
·蛋白酶K裂解缓冲液的配制 | 第21页 |
·5M NaCl配制 | 第21-22页 |
·10%CTAB溶液配制 | 第22页 |
·猪肺炎支原体基因组的提取 | 第22页 |
·SYBR GREEN Real Time PCR反应体系 | 第22页 |
·SYBR GREEN Real Time PCR反应循环参数 | 第22-23页 |
·SYBR GREEN Real Time PCR方法的建立 | 第23页 |
·结果 | 第23-29页 |
·扩增曲线的建立 | 第23-25页 |
·标准曲线的建立 | 第25-27页 |
·熔解曲线的建立 | 第27-29页 |
·结论与讨论 | 第29-31页 |
·结论 | 第29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章 Mhp SYBR GREEN荧光定量PCR检测方法的建立 | 第31-47页 |
·材料与方法 | 第31-39页 |
·载体与菌株 | 第31页 |
·生化试剂及试剂盒 | 第31-32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·引物设计 | 第32页 |
·特异性检测 | 第32-35页 |
·含Mhp p110基因的标准质粒的构建 | 第35-38页 |
·SYBR GREEN荧光定量PCR检测方法的建立 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·特异性检测 | 第39-40页 |
·含Mhp p110基因的标准质粒的构建 | 第40-42页 |
·SYBR GREEN荧光定量PCR的反应条件 | 第42页 |
·扩增曲线 | 第42-43页 |
·标准曲线 | 第43页 |
·溶解曲线分析 | 第43-44页 |
·PCR灵敏度 | 第44页 |
·重复性检测 | 第44页 |
·结论与讨论 | 第44-47页 |
·结论 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第四章 全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |