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传染性法氏囊病病毒中等毒力病毒株(IBDV-HZV)的生物学特性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 引言第11-22页
   ·IBDV病原特性第11-12页
   ·IBD流行病学第12-13页
     ·自然宿主第12页
     ·传播媒介第12页
     ·潜伏期和症状第12-13页
     ·发病率和死亡率第13页
   ·IBDV血清型第13页
   ·IBDV的抵抗力第13页
   ·IBDV的致病机理第13-14页
   ·IBD的诊断技术第14-15页
     ·IBDV的分离第14页
     ·血清学和免疫学诊断技术第14-15页
     ·分子生物学诊断技术第15页
   ·IBDV的免疫抑制作用第15页
   ·IBDV的基因组结构及其编码蛋白第15-18页
     ·VP1蛋白第16页
     ·VP2蛋白第16-17页
     ·VP3蛋白第17页
     ·VP4蛋白第17-18页
     ·VP5蛋白第18页
   ·IBDV抗原与毒力变异的分子机制第18-19页
   ·IBDV常规疫苗第19-20页
   ·IBDV新型疫苗的展望第20-22页
     ·IBDV基因工程疫苗的研究第20-21页
     ·IBDV DNA疫苗的研究第21-22页
2 材料与方法第22-33页
   ·毒株与细胞第22页
   ·细胞培养所需主要试剂第22页
   ·生物学特性研究所需主要试剂第22页
   ·RNA提取所需主要试剂第22-23页
   ·RT-PCR所需主要试剂第23页
   ·目的基因的克隆所需主要试剂第23页
   ·菌种与质粒载体第23页
   ·主要试剂的配制方法第23-24页
   ·主要仪器第24-25页
   ·病毒理化特性的测定第25-26页
     ·病毒的增殖与培养第25页
     ·ELD_(50)的测定第25页
     ·耐酸碱性试验第25页
     ·热敏感性试验第25页
     ·有机溶剂敏感性试验第25-26页
     ·琼脂扩散试验第26页
     ·病毒的凝集试验第26页
   ·IBDV-HZV株活疫苗的动物性实验第26-28页
     ·疫苗的制备第26页
     ·水平传播性试验第26页
     ·免疫抑制试验第26-27页
     ·返祖试验第27页
     ·反复冻融性试验第27页
     ·效力检验第27页
     ·十倍安全性试验第27-28页
     ·单剂量重复接种安全性试验第28页
     ·病变恢复期试验第28页
     ·疫苗免疫消长试验第28页
   ·IBDV-HZV株VP2基因的克隆及序列分析第28-33页
     ·病毒的增殖第28页
     ·核酸的提取第28-29页
     ·引物的设计第29页
     ·RT反应第29页
     ·PCR反应第29页
     ·电泳鉴定第29-30页
     ·PCR产物回收第30页
     ·酶切及回收第30页
     ·目的片段与酶切质粒的连接第30页
     ·感受态细胞的制备第30-31页
     ·转化第31页
     ·质粒回收第31页
     ·质粒酶切第31页
     ·酶切鉴定第31-32页
     ·序列分析第32-33页
3.结果与分析第33-50页
   ·病毒理化特性的测定结果第33-35页
     ·病毒的增殖结果第33页
     ·IBDV-HZV株ELD_(50)的测定结果第33-34页
     ·理化特性的测定结果第34-35页
     ·琼脂扩散试验结果第35页
     ·病毒的凝集试验结果第35页
   ·IBDV-HZV株活疫苗的动物接种性实验结果第35-41页
     ·水平传播试验结果第35-36页
     ·免疫抑制试验结果第36页
     ·返祖试验结果第36-37页
     ·反复冻融性试验结果第37页
     ·免疫效力试验结果第37-38页
     ·疫苗十倍安全性试验结果第38-39页
     ·疫苗单剂量重复接种安全性试验结果第39-40页
     ·病变恢复期试验结果第40-41页
     ·疫苗免疫消长试验结果第41页
   ·IBDV-HZV株VP2基因的克隆及序列分析结果第41-50页
     ·RT-PCR产物第41-42页
     ·重组质粒酶切结果第42-43页
     ·IBDV-HZV株VP2基因的核苷酸序列测定结果第43-44页
     ·IBDV-HZV株VP2基因的氨基酸序列对比结果第44-47页
     ·IBDV毒株VP2基因的核苷酸和氨基酸同源性比较结果第47-48页
     ·IBDV毒株VP2基因的系统进化分析第48-50页
4 讨论第50-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-61页
作者简历第61-62页
在读期间发表的论文第62-63页
致谢第63-64页
附录第64-76页

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