| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 论文中缩写说明表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| ·玉米细胞质雄性不育研究进展 | 第11-14页 |
| ·玉米细胞质雄性不育的分类 | 第11-12页 |
| ·雄性不育性恢复机理的假说 | 第12-14页 |
| ·Profilin基因的研究进展 | 第14-17页 |
| ·植物profilin基因异型体 | 第14页 |
| ·Profilin的功能 | 第14-15页 |
| ·Profilin在细胞中的定位 | 第15-16页 |
| ·玉米中profilin的研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物启动子研究进展 | 第17-21页 |
| ·植物基因启动子的一般特征 | 第18页 |
| ·植物组织特异性启动子 | 第18-21页 |
| ·启动子的分离方法 | 第21-24页 |
| ·通过构建及筛选基因组文库来克隆启动子 | 第21页 |
| ·通过PCR介导的染色体步移来分离启动子 | 第21-24页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-34页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·ZmPRO3基因全长cDNA的克隆测序分析 | 第25-28页 |
| ·玉米花粉的分离和RNA的抽提及检测 | 第25-26页 |
| ·利用RACE技术分别获得ZmPRO3基因的两端侧翼序列 | 第26-27页 |
| ·RACE产物的检测、纯化及克隆测序 | 第27-28页 |
| ·RACE技术所获cDNA序列的生物信息学分析 | 第28页 |
| ·ZmPRO3基因的ORF及相应gDNA的克隆及分析 | 第28页 |
| ·植物材料中总DNA的抽提 | 第28页 |
| ·ZmPRO3基因的ORF及相应gDNA的克隆 | 第28页 |
| ·相应的生物信息学分析 | 第28页 |
| ·ZmPRO3基因的表达分析 | 第28-30页 |
| ·玉米花粉外各组织器官中RNA的抽提及检测 | 第28-29页 |
| ·Northern杂交 | 第29页 |
| ·转膜 | 第29页 |
| ·预杂交 | 第29-30页 |
| ·探针制备 | 第30页 |
| ·杂交和显影 | 第30页 |
| ·ZmPRO3基因启动子的分离测序 | 第30-34页 |
| ·合成寡核苷酸制作接头 | 第31页 |
| ·ZmPRO3基因启动子的分离及序列测定 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·玉米各组织器官总RNA的浓度测定及质量检测 | 第34页 |
| ·ZmPRO3基因全长cDNA的克隆及序列分析 | 第34-37页 |
| ·3’RACE扩增ZmPRO3基因3’端侧翼序列 | 第34-35页 |
| ·5’RACE扩增ZmPRO3基因的5’侧翼序列 | 第35页 |
| ·所获全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第35-37页 |
| ·ZmPRO3基因的克隆及生物信息学分析 | 第37-43页 |
| ·ZmPRO3基因ORF的克隆 | 第37-38页 |
| ·ORF相应的生物信息学分析 | 第38-40页 |
| ·ORF相应的gDNA的分离及其生物信息学分析 | 第40-43页 |
| ·ZmPRO3基因的表达分析 | 第43页 |
| ·ZmPRO3基因启动子的分离及序列分析 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·本研究所运用的部分技术手段 | 第46-48页 |
| ·RACE技术 | 第46页 |
| ·本研究所用的启动子分离方法 | 第46-48页 |
| ·本研究的实验结果 | 第48-49页 |
| ·ZmPRO3基因的序列分析 | 第48页 |
| ·ZmPRO3基因的表达分析 | 第48-49页 |
| ·ZmPRO3基因的启动子序列分析 | 第49页 |
| ·下一步研究策略 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录1 CASpure Gel Extraction Kit纯化回收DNA | 第60页 |
| 附录2 电转化感受态的制备 | 第60-61页 |
| 附录3 玉米总DNA的大量提取(CTAB法) | 第61页 |
| 附录4 总RNA的提取 | 第61-62页 |
