中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
符号说明 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-19页 |
·植物淀粉合成概述 | 第13页 |
·植物淀粉合成中的关键酶 | 第13-14页 |
·GBSSⅡ的研究进展 | 第14-15页 |
·DBE 的分类 | 第15页 |
·PULL 的研究进展 | 第15-17页 |
·RNA 干扰机制及其应用 | 第17-18页 |
·本研究的主要目的 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-29页 |
·实验材料 | 第19页 |
·供试水稻品种 | 第19页 |
·菌株及双元载体 | 第19页 |
·质粒DNA 的提取、纯化 | 第19页 |
·培养基 | 第19页 |
·水稻愈伤组织的诱导及培养 | 第19-20页 |
·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻共转化 | 第20-22页 |
·根癌农杆菌的培养 | 第20-22页 |
·水稻受体材料的侵染及其与根癌农杆菌的共培养 | 第22页 |
·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第22页 |
·转基因水稻植株中潮霉素抗性的检测 | 第22页 |
·PCR 分析 | 第22-23页 |
·水稻植株叶片总DNA 的提取 | 第22页 |
·PCR 扩增 | 第22-23页 |
·Southern 杂交分析 | 第23-24页 |
·大量总DNA 的提取 | 第23页 |
·地高辛标记的DNA 探针的制备 | 第23-24页 |
·Southern 杂交分析 | 第24页 |
·Northern 杂交分析 | 第24-25页 |
·水稻胚乳总RNA 的提取 | 第24页 |
·水稻叶片总RNA 的提取 | 第24-25页 |
·Northern 杂交分析 | 第25页 |
·RT-PCR 分析 | 第25页 |
·水稻成熟种子中GBSS 蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第25-26页 |
·GBSS 蛋白的提取 | 第25-26页 |
·SDS-PAGE | 第26页 |
·普鲁兰酶活性的测定 | 第26页 |
·粗酶液的提取 | 第26页 |
·活性测定 | 第26页 |
·水稻成熟种子中直链淀粉含量(AC)的测定 | 第26-27页 |
·样品前处理 | 第26-27页 |
·大量测定 | 第27页 |
·单粒测定 | 第27页 |
·胶稠度和糊化温度的测定 | 第27页 |
·淀粉粘滞性谱(RVA)分析 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-56页 |
·水稻种子中过量表达OsGBSSⅡ基因对稻米品质的影响 | 第29-37页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第29-30页 |
·转基因水稻植株的分子鉴定 | 第30-32页 |
·PCR 鉴定 | 第30-31页 |
·Southern 杂交分析 | 第31-32页 |
·转基因水稻中OsGBSSⅡ基因的表达分析 | 第32-33页 |
·Northern 杂交分析 | 第32-33页 |
·RT-PCR 分析 | 第33页 |
·转基因水稻成熟种子中GBSS 蛋白表达量分析 | 第33-35页 |
·转基因水稻成熟种子的品质表现 | 第35-37页 |
·T_1 代转基因水稻成熟种子中的直链淀粉含量 | 第35页 |
·部分T_2 代转基因水稻成熟稻米的理化品质 | 第35-36页 |
·转基因水稻成熟种子淀粉的RVA 谱 | 第36-37页 |
·RNA 干扰OsGBSSⅡ基因表达对稻米品质的影响 | 第37-46页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第37-38页 |
·转基因水稻植株的分子鉴定 | 第38-40页 |
·PCR 鉴定 | 第38-39页 |
·Southern 杂交分析 | 第39-40页 |
·转基因水稻中OsGBSSⅡ基因的表达分析 | 第40-41页 |
·Northern 杂交分析 | 第40页 |
·RT-PCR 分析 | 第40-41页 |
·转基因水稻成熟种子的品质表现 | 第41-46页 |
·T_1 代转基因水稻成熟种子中的直链淀粉含量 | 第41-43页 |
·部分T_2 代转基因水稻成熟稻米的理化品质 | 第43-44页 |
·转基因水稻成熟种子淀粉的RVA 谱 | 第44-46页 |
·RNA 干扰OsPull 基因表达对稻米品质的影响 | 第46-56页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第46页 |
·转基因水稻植株的分子鉴定 | 第46-48页 |
·PCR 鉴定 | 第46页 |
·Southern 杂交分析 | 第46-48页 |
·转基因水稻中OsPull 基因的表达分析 | 第48-50页 |
·Northern 杂交分析 | 第48-49页 |
·RT-PCR 分析 | 第49-50页 |
·普鲁兰酶活性的测定 | 第50-51页 |
·转基因水稻成熟种子的品质表现 | 第51-56页 |
·T_1 代转基因水稻成熟种子中的直链淀粉含量 | 第51-53页 |
·部分T_2 代转基因水稻成熟稻米的理化品质 | 第53-54页 |
·转基因水稻成熟种子淀粉的RVA 谱 | 第54-56页 |
4 小结与讨论 | 第56-60页 |
·研究小结 | 第56页 |
·有关水稻OsGBSSⅡ基因的功能 | 第56-58页 |
·OsGBSSⅡ基因过量表达结构 | 第56-57页 |
·OsGBSSⅡ基因RNA 干扰结构 | 第57-58页 |
·有关水稻OsPull 基因的功能 | 第58-59页 |
·研究展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |