| 目录 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 DsCBF1基因的5’非翻译区克隆以及DsCBF2基因EST序列的克隆 | 第11-27页 |
| 1 材料和方法 | 第11-17页 |
| ·材料 | 第11-12页 |
| ·方法 | 第12-17页 |
| 2 结果与分析 | 第17-24页 |
| ·5’RACE引物的各项参数 | 第17页 |
| ·5’RACE扩增结果 | 第17-19页 |
| ·CBF1全长拼接 | 第19页 |
| ·DsCBF2 EST扩增的结果 | 第19页 |
| ·DsCBF2相似性搜索 | 第19-21页 |
| ·CBF基因核酸序列分析 | 第21页 |
| ·多个物种CBF蛋白核酸序列同源性比对结果 | 第21-24页 |
| ·CBF家族系统发育分析 | 第24页 |
| 3 讨论 | 第24-27页 |
| ·提高5’RACE的成功率 | 第24-25页 |
| ·播娘蒿DsCBF1和DsCBF2 | 第25页 |
| ·蛋白比对分析 | 第25-26页 |
| ·系统发育分析 | 第26-27页 |
| 第二章 播娘蒿DsCBF基因家族的差异表达研究 | 第27-41页 |
| 1 材料和方法 | 第27-31页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·18S rRNA的cDNA片段的克隆 | 第31页 |
| ·引物参数 | 第31-32页 |
| ·荧光定量引物的验证 | 第32-33页 |
| ·荧光定量的结果 | 第33-38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| ·冷胁迫温度和时间的设定 | 第38-39页 |
| ·荧光定量PCR研究播娘蒿CBF基因差异表达 | 第39页 |
| ·荧光定量PCR的系统误差 | 第39页 |
| ·CBF基因在冷胁迫条件下的差异表达 | 第39-41页 |
| 第三章 CBF基因转基因拟南芥研究 | 第41-54页 |
| 1 材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| ·引物参数 | 第47页 |
| ·播娘蒿CBF1基因ORF的克隆 | 第47-48页 |
| ·构建重组表达载体转化农杆菌 | 第48-49页 |
| ·转化野生型拟南芥 | 第49页 |
| ·抗生素筛选 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| ·农杆菌培养 | 第51页 |
| ·花序转染拟南芥的方法及其原理 | 第51-52页 |
| ·花序转染方法的优缺点 | 第52页 |
| ·花序转染的频率 | 第52页 |
| ·转染后的初步鉴定 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 在校期间学习情况 | 第73-74页 |