摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
·病原学 | 第9-10页 |
·流行病学 | 第10-11页 |
·致病性与毒力 | 第11-13页 |
·脂多糖 | 第11页 |
·外膜蛋白 | 第11-12页 |
·转铁蛋白 | 第12页 |
·神经氨酸酶 | 第12-13页 |
·致病机理及病理变化 | 第13-14页 |
·协同感染 | 第14页 |
·诊断方法 | 第14-16页 |
·菌落与细菌形态 | 第14页 |
·生化鉴定结果 | 第14-15页 |
·血清学鉴定 | 第15页 |
·分子生物学鉴定方法 | 第15-16页 |
·副猪嗜血杆菌血清型的鉴定方法 | 第16-18页 |
·副猪嗜血杆菌血清学分型 | 第16-17页 |
·副猪嗜血杆菌的基因分型 | 第17页 |
·肠杆菌科基因间重复(ERIC) | 第17-18页 |
·重复序列PCR(rep-PCR) | 第18页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP) | 第18页 |
·细菌分型方法展望 | 第18-20页 |
第二章 副猪嗜血杆菌的分离鉴定 | 第20-26页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·实验仪器 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·其它缓冲液及试剂 | 第20-21页 |
·病料来源 | 第21页 |
·主要培养基 | 第21页 |
·标准菌株 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-22页 |
·病原菌分离方法 | 第21-22页 |
·涂片镜检 | 第22页 |
·生化鉴定 | 第22页 |
·PCR扩增反应 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-24页 |
·菌落与细菌形态 | 第22-23页 |
·生化鉴定结果 | 第23-24页 |
·PCR鉴定结果 | 第24页 |
·2株副猪嗜血的血清型鉴定 | 第24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
第三章 副猪嗜血杆菌的血清学分型方法的建立和临床应用 | 第26-35页 |
·材料和方法 | 第26-28页 |
·标准菌株 | 第26页 |
·试验动物 | 第26页 |
·培养基的制备 | 第26-27页 |
·抗血清的制备 | 第27页 |
·免疫抗原制备 | 第27页 |
·免疫程序 | 第27页 |
·检测抗原的制备 | 第27-28页 |
·盐析抗原(Salt Antigen) | 第27页 |
·煮沸抗原(Boiled Antigen) | 第27-28页 |
·热稳定抗原(Heat-stable Antigen) | 第28页 |
·分型血清特异性和效价的检验 | 第28页 |
·玻片凝集试验(Slide Agglutination Test,SAT) | 第28页 |
·琼脂扩散试验(Gel Diffusion Test,GDT) | 第28页 |
·临床分离菌株血清型鉴定 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-33页 |
·免疫后抗体产生的规律 | 第28-29页 |
·抗血清的效价 | 第29-30页 |
·抗血清与不同抗原的反应性 | 第30-32页 |
·抗血清的保存期测定 | 第32页 |
·分离株的鉴定 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第四章 副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白PCR诊断方法的建立和临床应用 | 第35-45页 |
·材料与方法 | 第35-38页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·实验菌株及培养条件 | 第35-36页 |
·模板的制备 | 第36-37页 |
·直接煮沸裂解 | 第36页 |
·基因组DNA制备 | 第36页 |
·标准阳性(阴性)样品的制备(猪人工感染试验) | 第36页 |
·病料样品的处理 | 第36-37页 |
·建立tbpB-PCR检测方法。 | 第37-38页 |
·引物设计 | 第37页 |
·PCR反应体系(20μl) | 第37页 |
·PCR反应条件 | 第37页 |
·产物检测 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-43页 |
·标准副猪嗜血杆菌tbpB的检测 | 第38页 |
·灵敏性试验 | 第38-39页 |
·特异性试验 | 第39-40页 |
·人工感染病样的检测 | 第40-41页 |
·临床病料中检测的结果 | 第41-42页 |
·tbpB上保守序列分析 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
附录 | 第50页 |