| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-16页 |
| 1 前言 | 第16-47页 |
| ·苹果果实酸度研究进展 | 第16-19页 |
| ·细胞质型苹果酸脱氢酶研究进展 | 第19-21页 |
| ·DNA 分子标记 | 第21-31页 |
| ·DNA 分子标记原理及分类 | 第21-26页 |
| ·SSR 标记及其在果树遗传育种中的应用 | 第26-31页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第31-39页 |
| ·mRNA 差异显示技术原理及分类 | 第31-37页 |
| ·mRNA 差异显示技术应用 | 第37-39页 |
| ·苹果基因组分子生物学研究进展 | 第39-46页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第46-47页 |
| 2 材料和方法 | 第47-75页 |
| ·实验材料 | 第47-49页 |
| ·实验方法 | 第49-75页 |
| ·果实可滴定酸的测定 | 第49页 |
| ·苹果果实苹果酸含量的测定 | 第49页 |
| ·果实酸/非酸性状的确定 | 第49页 |
| ·模板DNA 的制备 | 第49-50页 |
| ·近等基因池的构建 | 第50页 |
| ·SSR 技术筛选与苹果果实酸/非酸性状连锁的分子标记 | 第50-53页 |
| ·改良热硼酸法提取RNA 方法 | 第53-54页 |
| ·CTAB 法提取RNA | 第54页 |
| ·RNA 含量和纯度检测 | 第54页 |
| ·第一链含有锚定引物的cDNA 的合成 | 第54-55页 |
| ·Mal-cyMDH cDNA 克隆 | 第55-58页 |
| ·PCR 扩增产物的回收 | 第58页 |
| ·PCR 回收产物的克隆 | 第58-60页 |
| ·地高辛(DIG)标记的Northern blotting | 第60-63页 |
| ·地高辛标记的Southern blotting | 第63-66页 |
| ·酸度相关基因cDNA-AFLP 差异筛选 | 第66-70页 |
| ·原核表达苹果果实细胞质型苹果酸脱氢酶融合蛋白及动力学参数测定 | 第70-74页 |
| ·细胞型苹果酸脱氢酶活性分析 | 第74-75页 |
| 3. 结果与分析 | 第75-112页 |
| ·苹果果实酸度遗传的SSR 分析 | 第75-80页 |
| ·果实可滴定酸在后代群体中的分布 | 第75页 |
| ·苹果果实不同发育阶段苹果酸含量的变化 | 第75-77页 |
| ·酸/低酸性状近等基因池SSR 标记的筛选 | 第77-80页 |
| ·热硼酸法提取苹果果实RNA 的改良 | 第80-84页 |
| ·方法的改良 | 第80页 |
| ·RNA 产量和质量分析 | 第80-82页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第82-84页 |
| ·细胞质型苹果酸脱氢酶（cyMDH）基因的克隆及表达分析 | 第84-97页 |
| ·细胞质型苹果酸脱氢酶基因（cyMDH）的克隆 | 第84-85页 |
| ·细胞质型苹果酸脱氢酶基因（cyMDH）的序列分析 | 第85-87页 |
| ·cyMDH 的进化树分析 | 第87-89页 |
| ·cyMDH 基因组序列特征分析 | 第89-91页 |
| ·Mal-cyMDH 的Southern blotting 分析 | 第91-92页 |
| ·高酸、低酸果实发育过程中苹果酸的变化 | 第92页 |
| ·cyMDH 的Northern Blotting 分析 | 第92-94页 |
| ·Mal-cyMDH 原核表达及动力学参数测定 | 第94-96页 |
| ·高酸和低酸苹果果实中cyMDH 的酶活性分析 | 第96-97页 |
| ·高酸、低酸基因型中苹果酸代谢关键酶的半定量PCR 分析 | 第97-99页 |
| ·苹果果实酸度相关基因的差异筛选、克隆及表达分析 | 第99-112页 |
| ·苹果果实cDNA-AFLP 技术体系的建立 | 第99-100页 |
| ·苹果果实酸/低酸性状的cDNA-AFLP 的筛选 | 第100-102页 |
| ·cDNA-AFLP 差异片断克隆 | 第102-108页 |
| ·Mal-DDNA 的Southern blotting 分析 | 第108页 |
| ·Mal-DDNA 的RT-PCR分析 | 第108-109页 |
| ·Mal-DDNA 的Northern blot 分析 | 第109-112页 |
| 4 讨论 | 第112-120页 |
| 5 结论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-138页 |
| 发表论文 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
