| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 英文缩略中文名对照表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-15页 |
| 第一章 去甲乌药碱对慢性压力超负荷模型小鼠心功能和心肌重塑的改善作用 | 第15-29页 |
| 前言 | 第15页 |
| 1 实验材料 | 第15-17页 |
| 1.1 实验动物 | 第15-16页 |
| 1.2 关键实验仪器及器材 | 第16页 |
| 1.3 实验试剂 | 第16-17页 |
| 1.4 引物设计与合成 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.1 小鼠一般情况 | 第17-18页 |
| 2.2 实验动物分组及给药方式 | 第18页 |
| 2.3 心脏慢性压力超负荷模型的建立 | 第18页 |
| 2.4 小鼠心脏超声检测 | 第18-19页 |
| 2.5 心脏取材及保存 | 第19页 |
| 2.6 WGA染色 | 第19页 |
| 2.7 Masson染色 | 第19页 |
| 2.8 心脏组织总RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.9 q RT-PCR实验步骤 | 第20-21页 |
| 2.10 数据统计方法 | 第21页 |
| 3 实验结果 | 第21-26页 |
| 3.1 去甲乌药碱改善TAC诱导的小鼠心脏功能障碍 | 第21-22页 |
| 3.2 去甲乌药碱抑制TAC诱导的小鼠心脏肥大及相关胚胎基因表达 | 第22-24页 |
| 3.3 去甲乌药碱抑制TAC诱导的心肌结构重塑 | 第24-26页 |
| 4 讨论 | 第26-29页 |
| 4.1 心力衰竭与心肌重塑 | 第26页 |
| 4.2 慢性压力超负荷与心肌重塑 | 第26页 |
| 4.3 TAC模型的选择 | 第26-27页 |
| 4.4 本次实验结果讨论 | 第27-28页 |
| 4.4.1 HG改善TAC诱导的小鼠心脏肥大和心功能障碍 | 第27页 |
| 4.4.2 HG抑制TAC诱导的小鼠心脏结构重塑 | 第27-28页 |
| 4.5 对本章实验的进一步思考 | 第28-29页 |
| 第二章 去甲乌药碱在体外对TGF-β1诱导的心脏成纤维细胞激活的作用及机制研究 | 第29-53页 |
| 前言 | 第29页 |
| 1 实验材料 | 第29-34页 |
| 1.1 实验细胞来源 | 第29-30页 |
| 1.2 实验试剂 | 第30-32页 |
| 1.2.1 细胞分离及培养试剂 | 第30页 |
| 1.2.2 q RT-PCR试剂 | 第30页 |
| 1.2.3 引物设计与合成 | 第30-31页 |
| 1.2.4 蛋白提取及蛋白定量试剂 | 第31-32页 |
| 1.2.5 相关抗体 | 第32页 |
| 1.2.6 增殖试剂盒 | 第32页 |
| 1.3 实验仪器 | 第32-33页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第33-34页 |
| 1.4.1 SDS-PAGE12%分离胶配制 | 第33页 |
| 1.4.2 SDS-PAGE3.5%浓缩胶配制 | 第33页 |
| 1.4.3 10×转膜缓冲液的配制 | 第33-34页 |
| 1.4.4 10×电泳缓冲液的配制 | 第34页 |
| 1.4.5 PBST缓冲液配制 | 第34页 |
| 1.4.6 1×细胞裂解液配制 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.1 原代新生大鼠心脏成纤维细胞的分离和培养 | 第34-35页 |
| 2.2 细胞处理及加药方式 | 第35页 |
| 2.2.1 细胞分组 | 第35页 |
| 2.2.2 细胞处理 | 第35页 |
| 2.3 心脏成纤维细胞总蛋白的提取 | 第35-36页 |
| 2.4 Bradford法测蛋白浓度和样本制备步骤 | 第36页 |
| 2.5 Western blotting操作步骤 | 第36-37页 |
| 2.6 心脏成纤维细胞总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.7 qRT-PCR实验步骤 | 第38页 |
| 2.8 细胞免疫荧光实验步骤 | 第38-39页 |
| 2.9 体外诱导肌成纤维细胞增殖 | 第39页 |
| 2.10 体外诱导肌成纤维细胞迁移 | 第39-40页 |
| 2.11 数据统计方法 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-47页 |
| 3.1 去甲乌药碱抑制TGF-β1诱导的心脏成纤维激活 | 第40-42页 |
| 3.2 去甲乌药碱抑制TGF-β1诱导的心脏成纤维细胞激活不依赖其经典的β2-AR信号 | 第42-44页 |
| 3.3 去甲乌药碱经调控TGF-β/Smad信号通路抑制心脏成纤维细胞激活 | 第44-45页 |
| 3.4 去甲乌药碱不能抑制肌成纤维细胞的迁移和增殖 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-53页 |
| 4.1 CFs概述 | 第47-48页 |
| 4.3 CFs参与疾病的机制与通路 | 第48-49页 |
| 4.4 本次实验结果讨论 | 第49-51页 |
| 4.4.1 HG抑制CFs激活及激活后相关胶原基因的表达 | 第49页 |
| 4.4.2 HG抑制CFs激活的作用机制不依赖β2-AR信号 | 第49-50页 |
| 4.4.3 HG调节TGF-β/Smad信号通路抑制CFs激活 | 第50页 |
| 4.4.4 HG不能抑制肌成纤维细胞的迁移和增殖 | 第50-51页 |
| 4.5 对本章实验的进一步思考 | 第51-53页 |
| 第三章 去甲乌药碱在体外对AngⅡ诱导心肌细胞肥大的作用 | 第53-66页 |
| 前言 | 第53页 |
| 1 实验材料 | 第53-55页 |
| 1.1 实验细胞来源 | 第53页 |
| 1.2 实验试剂 | 第53-55页 |
| 1.2.1 细胞分离及培养试剂 | 第53-54页 |
| 1.2.2 q RT-PCR试剂 | 第54页 |
| 1.2.3 引物设计与合成 | 第54-55页 |
| 1.3 实验仪器 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-59页 |
| 2.1 原代新生大鼠心肌细胞的分离和培养 | 第55-56页 |
| 2.2 细胞处理及加药方式 | 第56-57页 |
| 2.2.1 细胞分组 | 第56页 |
| 2.2.2 细胞处理 | 第56-57页 |
| 2.3 心肌细胞总RNA的提取 | 第57页 |
| 2.4 q RT-PCR实验步骤 | 第57-58页 |
| 2.5 细胞免疫荧光实验步骤 | 第58页 |
| 2.6 数据统计方法 | 第58-59页 |
| 3 实验结果 | 第59-61页 |
| 3.1 去甲乌药碱在体外可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大 | 第59-60页 |
| 3.2 去甲乌药碱在体外可以抑制AngⅡ诱导的胚胎基因表达增加 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-66页 |
| 4.1 心肌肥大概述 | 第61-63页 |
| 4.2 病理性心肌细胞肥大的机制 | 第63页 |
| 4.3 本次体外实验体结果证实HG可直接作用于心肌细胞肥大 | 第63-64页 |
| 4.4 对本章实验的进一步思考 | 第64-66页 |
| 全文总结 | 第66-67页 |
| 创新点 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-103页 |
| 附录一 :文献综述 Research Progress of Traditional Chinese Medicine on Cardiac Remodeling | 第77-94页 |
| References | 第90-94页 |
| 附录二 :硕士期间已发表的论文全文 | 第94-103页 |
