| 第一部分 文献综述 | 第1-41页 |
| 第一章 胚胎干细胞的生物学特性 | 第11-28页 |
| 一 引言 | 第11页 |
| 二 胚胎干细胞的研究背景 | 第11-12页 |
| 三 胚胎干细胞的生物学特性 | 第12-14页 |
| 1 形态学特征 | 第13页 |
| 2 发育全能性 | 第13-14页 |
| 3 自我更新能力 | 第14页 |
| 4 遗传上的可操作性 | 第14页 |
| 四 不同种属的胚胎干细胞系 | 第14-17页 |
| 1 小鼠胚胎干细胞系 | 第15-16页 |
| 2 人胚胎干细胞系 | 第16-17页 |
| 3 其他种属的胚胎干细胞系 | 第17页 |
| 五 胚胎干细胞的体外分化潜能 | 第17-23页 |
| 1 外胚层分化 | 第18-19页 |
| 2 中胚层分化 | 第19-21页 |
| 3 内胚层分化 | 第21页 |
| 4 生殖细胞分化 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 胚胎干细胞分化为肝细胞的研究进展 | 第28-41页 |
| 一 引言 | 第28页 |
| 二 胚胎中肝脏早期发育的分子机制 | 第28-29页 |
| 三 拟胚体内胚层分化发育机制 | 第29-30页 |
| 四 胚胎干细胞向肝细胞的分化 | 第30-37页 |
| 1 自发分化 | 第31-32页 |
| 2 体外诱导分化 | 第32-36页 |
| 3 体内诱导分化 | 第36-37页 |
| 五 胚胎干细胞与成体干细胞在肝再生方面的比较 | 第37-38页 |
| 六 问题和展望 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第二部分 实验研究 | 第41-103页 |
| 第一章 细胞因子和拟胚体途径诱导胚胎干细胞向肝细胞的分化研究 | 第41-66页 |
| 第一节 体外分化实验模型的建立——一种拟胚体形成的新方法 | 第41-55页 |
| 一 前言 | 第41页 |
| 二 材料与方法 | 第41-46页 |
| (一) 材料与试剂 | 第41-42页 |
| (二) 实验方法 | 第42-46页 |
| 1 胚胎干细胞的培养和传代 | 第42-43页 |
| 2 拟胚体形成的新方法 | 第43-44页 |
| 3 拟胚体的显微结构观察 | 第44页 |
| 4 拟胚体的亚显微结构观察 | 第44页 |
| 5 拟胚体的分化潜能检测 | 第44-46页 |
| ·神经细胞方向分化 | 第44页 |
| ·心肌细胞方向分化 | 第44-45页 |
| ·肝细胞方向分化 | 第45-46页 |
| 三 实验结果 | 第46-48页 |
| 1 胚胎干细胞的培养 | 第46页 |
| 2 拟胚体形成的新方法 | 第46-47页 |
| 3 拟胚体显微和亚显微结构观察 | 第47页 |
| 4 拟胚体的分化潜能分析 | 第47-48页 |
| ·心肌细胞方向分化 | 第47页 |
| ·神经细胞方向分化 | 第47页 |
| ·肝脏细胞方向分化 | 第47-48页 |
| 四 讨论 | 第48-50页 |
| 附图 | 第50-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第二节 细胞因子诱导的胚胎干细胞向肝细胞的分化研究 | 第55-66页 |
| 一 前言 | 第55页 |
| 二 材料与方法 | 第55-57页 |
| 1 细胞 | 第55页 |
| 2 试剂 | 第55页 |
| 3 诱导培养液的设计 | 第55-56页 |
| 4 分化诱导方法 | 第56页 |
| 5 分化细胞的鉴定 | 第56-57页 |
| 三 实验结果 | 第57-58页 |
| 1 拟胚体的自发分化 | 第57页 |
| 2 通过细胞因子的诱导分化 | 第57-58页 |
| 四 讨论 | 第58-61页 |
| 1 实验设计的理论根据 | 第58页 |
| 2 拟胚体可以自发分化形成成熟的肝细胞 | 第58-59页 |
| 3 外源细胞因子与胞外基质协同诱导促进了拟胚体中肝细胞的分化成熟 | 第59页 |
| 4 BMP4可以显著提高肝细胞分化比例 | 第59-60页 |
| 5 aFGF与bFGF在拟胚体介导的肝细胞分化中作用相似 | 第60-61页 |
| 附图 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第二章 HDAC抑制剂诱导胚胎干细胞向肝细胞的分化研究 | 第66-103页 |
| 第一节 HDAC抑制剂诱导胚胎干细胞向肝细胞的分化 | 第66-81页 |
| 一 前言 | 第66页 |
| 二 材料与方法 | 第66-70页 |
| (一) 材料与试剂 | 第66-67页 |
| (二) 实验方法 | 第67-70页 |
| 1 分化诱导方法 | 第67页 |
| 2 细胞活性测定 | 第67-68页 |
| 3 细胞周期分析 | 第68页 |
| 4 分化细胞的鉴定 | 第68-70页 |
| ·免疫细胞化学分析 | 第68页 |
| ·基因表达分析 | 第68-70页 |
| ·电镜观察 | 第70页 |
| 三 实验结果 | 第70-72页 |
| 1 HDAC抑制剂诱导细胞分化过程中的形态学观察 | 第70-71页 |
| 2 HDAC抑制剂处理过程中细胞活性测定与浓度确定 | 第71页 |
| 3 HDAC抑制剂诱导细胞分化过程中细胞周期和凋亡变化 | 第71页 |
| 4 HDAC抑制剂处理过程中细胞超微结构变化 | 第71页 |
| 5 HDAC抑制剂处理前后细胞的免疫细胞化学分析 | 第71-72页 |
| 6 HDAC抑制剂处理后细胞的基因表达分析 | 第72页 |
| 四 讨论 | 第72-75页 |
| 附图 | 第75-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 第二节 胚胎干细胞向肝细胞分化过程中一种新型干／祖细胞的分离鉴定 | 第81-103页 |
| 一 前言 | 第81页 |
| 二 材料与方法 | 第81-86页 |
| (一) 材料与试剂 | 第81-82页 |
| (二) 诱导培养液的设计 | 第82-83页 |
| (三) 实验方法 | 第83-86页 |
| 1 分化诱导方法 | 第83页 |
| 2 ES-HPCs的分离培养 | 第83页 |
| 3 ES-HPCs的鉴定 | 第83-86页 |
| ·形态学观察 | 第83页 |
| ·免疫细胞化学分析 | 第83页 |
| ·基因表达分析 | 第83-84页 |
| ·超微结构观察 | 第84页 |
| ·细胞周期分析 | 第84页 |
| ·体外分化 | 第84-85页 |
| ·自发分化 | 第84页 |
| ·ES-HPCs向肝细胞的分化 | 第84页 |
| ·ES-HPCs向胆管上皮细胞的分化 | 第84页 |
| ·诱导分化 | 第84-85页 |
| ·ES-HPCs向肝细胞的分化 | 第84页 |
| ·ES-HPCs向胆管上皮细胞的分化 | 第84-85页 |
| ·成熟肝细胞的检测鉴定 | 第85页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第85页 |
| ·糖原合成能力检测 | 第85页 |
| ·细胞色素P450活性检测 | 第85页 |
| ·基因表达分析 | 第85页 |
| ·肝损伤功能修复实验 | 第85页 |
| ·体内组织分化潜能实验 | 第85-86页 |
| 三 实验结果 | 第86-90页 |
| 1 ES-HPCs的分化诱导与形态观察 | 第86页 |
| 2 ES来源的肝前体细胞的鉴定 | 第86-87页 |
| ·ES-HPCs的形态学特征 | 第86-87页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第87页 |
| ·基因表达分析 | 第87页 |
| 3 ES-HPCs具有肝细胞和胆管上皮细胞双分化潜能 | 第87-89页 |
| ·肝细胞方向的分化 | 第88-89页 |
| ·形态学和超微结构的变化 | 第88页 |
| ·细胞功能和基因表达的变化 | 第88页 |
| ·成熟肝细胞对CCl_4引起的小鼠肝损伤有修复作用 | 第88-89页 |
| ·胆管上皮方向的分化 | 第89页 |
| 4 体内分化潜能检测 | 第89-90页 |
| 四 讨论 | 第90-93页 |
| 1 ES-HPCs与ES细胞的性质比较 | 第90-91页 |
| 2 ES-HPCs是一类新型的干／祖细胞 | 第91-93页 |
| 附图 | 第93-101页 |
| 参考文献 | 第101-103页 |
| 创新点 | 第103-104页 |
| 附录 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 博士期间发表的文章 | 第106页 |
