| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-34页 |
| 1．1 植物抗旱性的研究现状 | 第13-24页 |
| 1．1．1 引言 | 第13页 |
| 1．1．2 植物抗旱性的研究现状 | 第13-16页 |
| 1．1．2．1 植物在干旱胁迫条件下的生理反应 | 第13-14页 |
| 1．1．2．2 抗氧化酶系与活性氧的清除 | 第14-15页 |
| 1．1．2．3 离子和有机代谢物的积累与渗透调节 | 第15-16页 |
| 1．1．3 植物抗旱基因工程的研究进展 | 第16-24页 |
| 1．1．3．1 干旱诱导基因的表达与调控 | 第17-19页 |
| 1．1．3．2 与干旱有关的基因 | 第19-22页 |
| 1．1．3．3 植物抗旱节水转基因研究 | 第22-23页 |
| 1．1．3．4 结语 | 第23-24页 |
| 1．2 甜菜碱与植物抗逆性 | 第24-25页 |
| 1．2．1 甜菜碱含量、分布及诱发因素 | 第24页 |
| 1．2．2 甜菜碱在植物逆境生理中的作用及意义 | 第24-25页 |
| 1．3 基因枪法转化植物的研究进展 | 第25-28页 |
| 1．3．1 禾本类植物基因枪法转化研究进展 | 第25-27页 |
| 1．3．2 影响基因枪转化效率的因素 | 第27-28页 |
| 1．3．2．1 微弹速度 | 第27页 |
| 1．3．2．2 射程(阻挡板与靶细胞间的距离) | 第27页 |
| 1．3．2．3 微弹的理化性质 | 第27页 |
| 1．3．2．4 DNA纯度 | 第27-28页 |
| 1．3．2．5 DNA沉淀剂 | 第28页 |
| 1．3．2．6 生物因素 | 第28页 |
| 1．3．2．7 利用定位信号提高外源基因表达产物的含量 | 第28页 |
| 1．4 草坪草离体培养及遗传转化研究进展 | 第28-34页 |
| 1．4．1 植株再生体系的建立 | 第28-30页 |
| 1．4．2 草坪草的遗传转化方法 | 第30-32页 |
| 1．4．3 再生植株、转基因植株在遗传上的稳定性 | 第32页 |
| 1．4．4 草坪草转基因研究展望 | 第32-34页 |
| 2 研究目的、意义及技术路线 | 第34-37页 |
| 2．1 研究目的、意义 | 第34-35页 |
| 2．2 实验方案及技术路线 | 第35-37页 |
| 3 草地早熟禾的组织培养条件和分化能力研究 | 第37-67页 |
| 3．1 引言 | 第37页 |
| 3．2 材料与方法 | 第37-42页 |
| 3．2．1 实验材料 | 第37-38页 |
| 3．2．2 实验方法 | 第38-39页 |
| 3．2．2．1 模拟干旱胁迫下发芽试验 | 第38页 |
| 3．2．2．2 种子培养 | 第38页 |
| 3．2．2．3 胚轴培养 | 第38-39页 |
| 3．2．2．4 幼穗培养 | 第39页 |
| 3．2．2．5 诱导和继代培养条件 | 第39页 |
| 3．2．2．6 形态观察、数据记载及分析方法 | 第39页 |
| 3．2．2．7 再生植株的移栽 | 第39页 |
| 3．2．3 培养基设计方案及配制 | 第39-42页 |
| 3．2．3．1 愈伤组织诱导及继代培养基的配制 | 第39-41页 |
| 3．2．3．2 植株分化培养基的配制 | 第41页 |
| 3．2．3．3 绿苗生根培养基的配制 | 第41-42页 |
| 3．3 结果与分析 | 第42-65页 |
| 3．3．1 干旱胁迫对草地早熟禾发芽率的影响 | 第42-43页 |
| 3．3．2 培养条件对草地早熟禾成熟胚愈伤组织诱导的影响 | 第43-56页 |
| 3．3．2．1 不同培养基对成熟胚愈伤组织诱导的影响 | 第43-45页 |
| 3．3．2．2 基因型对草地早熟禾成熟胚愈伤组织诱导质量的影响 | 第45页 |
| 3．3．2．3 不同种类的激素及浓度处理对成熟胚愈伤组织诱导率的影响 | 第45-56页 |
| 3．3．3 影响胚轴愈伤组织诱导的因素 | 第56-57页 |
| 3．3．3．1 2，4-D浓度对胚轴愈伤组织诱导率的影响 | 第56-57页 |
| 3．3．3．2 V_(BI)及生物素对胚轴愈伤组织诱导率的影响 | 第57页 |
| 3．3．4 培养基类型和幼穗大小对愈伤组织诱导和分化的影响 | 第57-58页 |
| 3．3．4．1 不同培养基对幼穗愈伤组织分化的影响 | 第57-58页 |
| 3．3．4．2 幼穗大小对培养的影响 | 第58页 |
| 3．3．5 不同外植体对愈伤组织诱导率的影响 | 第58-59页 |
| 3．3．6 培养条件对草地早熟禾愈伤组织绿苗分化能力的影响 | 第59-64页 |
| 3．3．6．1 愈伤组织的质量对分化能力的影响 | 第60页 |
| 3．3．6．2 基因型对胚性愈伤组织分化的影响 | 第60-61页 |
| 3．3．6．3 不同激素浓度对愈伤组织分化的影响 | 第61-64页 |
| 3．3．7 小植株生根快繁和移栽 | 第64-65页 |
| 3．3．7．1 不同激素浓度配比对生根快繁的影响 | 第64-65页 |
| 3．3．7．2 小植株的移栽 | 第65页 |
| 3．4 实验结果 | 第65-67页 |
| 4 草地早熟禾的遗传转化 | 第67-101页 |
| 4．1 材料和方法 | 第67-79页 |
| 4．1．1 实验材料 | 第67-68页 |
| 4．1．2 实验方法 | 第68页 |
| 4．1．3 质粒DNA的制备 | 第68-71页 |
| 4．1．4 基因枪转化 | 第71-72页 |
| 4．1．5 抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第72页 |
| 4．1．6 植物总DNA的提取 | 第72-74页 |
| 4．1．7 转基因植株的PCR扩增 | 第74页 |
| 4．1．8 Southern杂交 | 第74-77页 |
| 4．1．9 Northern杂交 | 第77-78页 |
| 4．1．10 模拟干旱胁迫下转基因植株生物学性状观察及抗旱性生理指标的鉴定 | 第78页 |
| 4．1．11 田间干旱胁迫环境下转基因植株叶绿素含量的测定 | 第78-79页 |
| 4．2 基因枪转化 | 第79-91页 |
| 4．2．1 草地早熟禾愈伤组织对抗生素的敏感性 | 第79-80页 |
| 4．2．2 影响草地早熟禾基因枪转化参数的研究 | 第80-83页 |
| 4．2．2．1 轰击压力实验 | 第80-81页 |
| 4．2．2．2 轰击次数实验 | 第81页 |
| 4．2．2．3 轰击距离实验 | 第81-82页 |
| 4．2．2．4 不同金粉及DNA用量 | 第82-83页 |
| 4．2．3 培养条件及材料对草地早熟禾转化的影响 | 第83-88页 |
| 4．2．3．1 基因型对草地早熟禾转化的影响 | 第83-84页 |
| 4．2．3．2 甘露醇浓度对草地早熟禾转化的影响 | 第84-85页 |
| 4．2．3．3 高渗培养时间对草地早熟禾转化的影响 | 第85-86页 |
| 4．2．3．4 继代时间对转化效率的影响 | 第86页 |
| 4．2．3．5 基因枪轰击后愈伤组织恢复时间和G-418浓度对抗性愈伤组织筛选的影响 | 第86-88页 |
| 4．2．4 转基因植株的获得 | 第88-91页 |
| 4．2．4．1 抗性愈伤的获得 | 第88-89页 |
| 4．2．4．2 转基因植株的分化与再生 | 第89-91页 |
| 4．3 转化植株的遗传检测 | 第91-100页 |
| 4．3．1 转基因植株的分子检测 | 第91-94页 |
| 4．3．1．1 转基因植株的PCR检测 | 第91-92页 |
| 4．3．1．2 转基因植株的斑点杂交及Southern杂交 | 第92-93页 |
| 4．3．1．3 Northern杂交 | 第93-94页 |
| 4．3．2 转基因植株的耐旱性 | 第94-100页 |
| 4．3．2．1 模拟干旱胁迫下转基因植株抗旱性生理指标的鉴定 | 第94-98页 |
| 4．3．2．2 转基因草地早熟禾植株的田间检测 | 第98-100页 |
| 4．4 实验结果 | 第100-101页 |
| 5 结论与讨论 | 第101-110页 |
| 5．1 讨论 | 第101-108页 |
| 5．1．1 草地早熟禾的组织培养的高频再生体系的建立 | 第101-104页 |
| 5．1．1．1 草地早熟禾离体再生中基因型依赖性问题 | 第101-102页 |
| 5．1．1．2 草地早熟禾离体再生中外植体的选择 | 第102-103页 |
| 5．1．1．3 草地早熟禾离体再生中激素的影响 | 第103-104页 |
| 5．1．2 草地早熟禾的遗传转化体系的建立 | 第104-108页 |
| 5．1．2．1 影响基因枪法转化效率的主要因素 | 第105-107页 |
| 5．1．2．2 转基因植株的耐旱耐盐性 | 第107-108页 |
| 5．2 结论 | 第108-110页 |
| 5．2．1 草地早熟禾组织培养的高频再生体系 | 第108-109页 |
| 5．2．2 草地早熟禾遗传转化体系 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 导师简介 | 第125-126页 |
| 个人简介 | 第126-127页 |
