产外切葡聚糖酶黑曲霉的筛选鉴定及其基因在毕赤酵母中的表达
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·纤维素酶的概述 | 第10-14页 |
| ·纤维素酶系的组成及作用 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的作用机理 | 第11页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶存在的问题及发展方向 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的异源表达 | 第14-16页 |
| ·纤维素酶异源表达的研究现状 | 第14-15页 |
| ·本研究的意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-32页 |
| ·实验材料 | 第16-21页 |
| ·菌种及载体 | 第16-17页 |
| ·试剂及酶类 | 第17页 |
| ·常用试剂的配制 | 第17-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·高产外切葡聚糖酶真菌的筛选鉴定 | 第21-22页 |
| ·外切葡聚糖酶基因cbhB的克隆 | 第22-26页 |
| ·毕赤酵母表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·毕赤酵母表达载体的转化 | 第28-30页 |
| ·重组酵母的表达 | 第30-31页 |
| ·重组外切葡聚糖酶酶学性质分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·外切葡聚糖酶高产菌株的筛选 | 第32-34页 |
| ·菌株鉴定 | 第32-33页 |
| ·酶活测定 | 第33-34页 |
| ·cbhB基因的克隆 | 第34-43页 |
| ·cbhB基因的克隆 | 第34-38页 |
| ·黑曲霉cbhB基因的序列分析 | 第38-43页 |
| ·诱导型表达载体pPICZαA-cbh的构建 | 第43-44页 |
| ·诱导型表达载体的转化、筛选、鉴定 | 第44-45页 |
| ·cbhB基因在毕赤酵母中的表达 | 第45-47页 |
| ·诱导型表达载体pPICZαA-cbh的表达 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE | 第46-47页 |
| ·重组外切葡聚糖酶的酶学性质分析 | 第47-48页 |
| ·重组外切葡聚糖酶的最适反应pH和pH稳定性 | 第47页 |
| ·重组外切葡聚糖酶的最适反应温度 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 在读期间发表的文章 | 第54页 |
