| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 第1章 F10在滋养细胞疾病及其他肿瘤组织的原位杂交检测 | 第23-43页 |
| ·实验材料与设备 | 第23-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·常用溶液的配置 | 第25-27页 |
| ·实验过程和方法 | 第27-30页 |
| ·地高辛标记的F10 RNA探针制备与检测 | 第27-30页 |
| ·原位杂交检测 F10基因的表达 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·参考文献 | 第34-43页 |
| 第2章 实时定量 PCR法分析 F10基因在正常妊娠滋养细胞与葡萄胎及其他肿瘤组织中的表达 | 第43-59页 |
| ·实验材料与设备 | 第43-45页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·标本来源 | 第44-45页 |
| ·实验过程与方法 | 第45-50页 |
| ·组织总 RNA的提取 | 第45页 |
| ·RNA纯度及完整性鉴定 | 第45页 |
| ·cDNA制备 | 第45-46页 |
| ·荧光定量 PCR引物设计 | 第46-47页 |
| ·荧光定量 PCR标准品的制备 | 第47-48页 |
| ·T-载体连接 | 第48页 |
| ·质粒 DNA转化大肠杆菌 | 第48页 |
| ·质粒 DNA小量制备 | 第48-49页 |
| ·荧光定量 PCR反应 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·RNA纯度和完整性分析 | 第50页 |
| ·F10基因在正常妊娠滋养细胞与葡萄胎、正常组织与不同肿瘤组织中表达检测 | 第50-51页 |
| ·F10在肝癌和癌旁组织中的表达差异检测 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·参考文献 | 第54-59页 |
| 第3章 F10基因沉默对绒癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第59-74页 |
| ·实验材料与设备 | 第59-60页 |
| ·主要仪器设备 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·细胞株来源 | 第60页 |
| ·实验过程与方法 | 第60-65页 |
| ·细胞培养 | 第60页 |
| ·沉默 F10基因的小分子双链 RNA(dsRNA)制备及纯化 | 第60-63页 |
| ·SiRNA定量 | 第63页 |
| ·Lipofectamine 2000介导瞬间细胞转染 | 第63-64页 |
| ·有效基因沉默的最佳dsRNA转染浓度和时间确定 | 第64页 |
| ·MTT分析 | 第64页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-66页 |
| ·siRNA的定量 | 第65页 |
| ·转染dsRNA后F10基因表达水平的检测 | 第65-66页 |
| ·F10基因沉默对KLE细胞增殖的影响 | 第66页 |
| ·F10基因沉默对绒毛膜癌KLE细胞凋亡影响 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·参考文献 | 第68-74页 |
| 全文结论 | 第74-75页 |
| 附录一 英文缩写词表 | 第75-76页 |
| 附录二 综述 | 第76-82页 |
| 成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 原创性声明及版权使用授权书 | 第84页 |
