中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-15页 |
第一章 绪论 | 第15-46页 |
1 辣根过氧化物酶(HPR)及其模拟酶 | 第15-20页 |
·HRP的催化反应机理及其模拟酶 | 第15-16页 |
·HRP模拟酶的分类 | 第16页 |
·HRP模拟酶研究现状 | 第16-18页 |
·HRP模拟酶在分析工作中的应用 | 第18-19页 |
·展望 | 第19-20页 |
2 Hb的结构与抗氧化特性 | 第20-25页 |
·Hb的构造 | 第20-24页 |
·Hb的抗氧化特性 | 第24-25页 |
3 Hb的修饰及其电化学活性 | 第25-28页 |
·修饰的Hb作为血液替代品 | 第25-27页 |
·血红素蛋白质的电子传递及电催化特性 | 第27-28页 |
4 酶反应中间体和反应机理 | 第28-35页 |
·活性氧中间体 | 第29-31页 |
·酶反应活性中间体 | 第31-33页 |
·过氧化物酶的反应中间体 | 第33-35页 |
5 过氧亚硝基阴离子 | 第35-46页 |
·生物系统中ONOO~-的产生 | 第35页 |
·ONOO~-的结构与性质 | 第35-37页 |
·ONOO~-与生物物质的作用及生物系统内的影响因素 | 第37-38页 |
·ONOO~-在生物系统中的意义 | 第38-40页 |
·ONOO~-的清除 | 第40-44页 |
·展望 | 第44-46页 |
第二章 血红蛋白催化邻苯二胺氧化反应机理 | 第46-60页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
·试剂与仪器 | 第47页 |
·产物的制备 | 第47页 |
·中间体的制备 | 第47-48页 |
·快速停流分光光度法测定Hb与H2O2反应的中间体 | 第48页 |
2 结果 | 第48-55页 |
·紫外-可见吸收光谱 | 第48-52页 |
·温度对中间体稳定性的影响 | 第52页 |
·产物、中间体及相关物质的红外光谱 | 第52-55页 |
·OPDA、产物及中间体的质谱 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-60页 |
·中间体及产物的结构 | 第55-56页 |
·MetHb的催化反应机理 | 第56-60页 |
第三章 血红蛋白结构与其催化活性之间的关系 | 第60-73页 |
1 材料和方法 | 第61-64页 |
·试剂与仪器 | 第61页 |
·Mn-Hb制备 | 第61-62页 |
·非变性SDS-PAGE检测Mn-Hb- | 第62-63页 |
·H_2O_2浓度测定 | 第63页 |
·POD活性检测 | 第63页 |
·CAT活性检测 | 第63页 |
·反应体系的荧光光谱 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-70页 |
·Mn-血红素的吸收光谱 | 第64页 |
·Mn-Hb的SDS-PAGE鉴定 | 第64-65页 |
·pH对Mn-Hb催化活性的影响 | 第65页 |
·Mn-Hb的POD活性 | 第65-66页 |
·Mn-Hb的CAT活性 | 第66-67页 |
·Hb的内部荧光性质 | 第67页 |
·不同温度下Hb的荧光光谱和酶学性质 | 第67-68页 |
·不同乙醇浓度对Hb酶学性质和荧光光谱的影响 | 第68-69页 |
·NaCl浓度对Hb稳定性和荧光光谱的影响 | 第69页 |
·高铁Hb的荧光光谱和催化活性 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
第四章 血红蛋白作为标记试剂在酶联免疫分析中的应用 | 第73-79页 |
1 材料与方法 | 第73-75页 |
·仪器和试剂 | 第74页 |
·溶液的配制 | 第74页 |
·Hb-IgG的制备 | 第74页 |
·Hb及Hb-IgG活力的测定 | 第74页 |
·免疫分析 | 第74-75页 |
2 结果与讨论 | 第75-79页 |
·Hb-IgG的制备结果 | 第75页 |
·Hb-IgG催化反应条件的优化 | 第75-76页 |
·Hb-IgG的催化活性 | 第76页 |
·测定人IgG的标准工作曲线及样品分析 | 第76-79页 |
第五章 血红蛋白/聚邻苯二胺膜电极的制各及其电催化性能的研究 | 第79-88页 |
1 材料与方法 | 第79-80页 |
·试剂与仪器 | 第79-80页 |
·POPDA及POPDA/Hb膜电极的制备 | 第80页 |
·红外光谱的测定 | 第80页 |
·Hb活性的测定方法 | 第80页 |
2 结果 | 第80-85页 |
·邻苯二胺的电聚合特性 | 第80-81页 |
·聚合物的红外光谱 | 第81页 |
·Hb在POPDA膜中固定化及其电极特性 | 第81-84页 |
·POPDA膜中固定化Hb的氧化还原特性 | 第84-85页 |
3 讨论 | 第85-88页 |
第六章 过氧亚硝基阴离子对氧合血红蛋白的氧化损伤 | 第88-96页 |
1 材料与方法 | 第89-90页 |
·ONOO~-的制备 | 第89页 |
·oxyHb的制备 | 第89页 |
·ONOO~-与oxyHb的反应 | 第89-90页 |
·ONOO~-对正丁醇抽提液中血红素浓度的影响 | 第90页 |
2 结果 | 第90-93页 |
·ONOO~-浓度的影响 | 第90-91页 |
·温浴时间的影响 | 第91页 |
·CO_2的影响 | 第91-92页 |
·pH的影响 | 第92页 |
·温度的影响 | 第92-93页 |
·ONOO~-对oxyHb正丁醇抽提液中血红素浓度的影响 | 第93页 |
3 讨论 | 第93-96页 |
第七章 过氧亚硝基阴离子及亚硝酸盐对血红蛋白催化反应的干扰 | 第96-108页 |
1 材料与方法 | 第97-98页 |
·试剂与仪器 | 第97-98页 |
·实验步骤 | 第98页 |
2 结果 | 第98-105页 |
·ONOO~-和NO_2~-对OPDA的氧化 | 第98-100页 |
·CO_2对ONOO~-氧化OPDA的影响 | 第100页 |
·ONOO~-对愈创木酚的氧化作用 | 第100-101页 |
·NO_2~-对PR的氧化的影响 | 第101-102页 |
·NO_2~-与H_2O_2和Hb的反应 | 第102-103页 |
·愈创木酚和NO_2~-与ferrylHb的反应 | 第103-105页 |
3 讨论 | 第105-108页 |
研究总结 | 第108-109页 |
研究展望 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-134页 |
博士生在读期间发表和待发表论著目录 | 第134-136页 |
致谢 | 第136-137页 |