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血红蛋白与活性氮氧化合物相互作用及其类酶催化机理的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-15页
第一章 绪论第15-46页
 1 辣根过氧化物酶(HPR)及其模拟酶第15-20页
   ·HRP的催化反应机理及其模拟酶第15-16页
   ·HRP模拟酶的分类第16页
   ·HRP模拟酶研究现状第16-18页
   ·HRP模拟酶在分析工作中的应用第18-19页
   ·展望第19-20页
 2 Hb的结构与抗氧化特性第20-25页
   ·Hb的构造第20-24页
   ·Hb的抗氧化特性第24-25页
 3 Hb的修饰及其电化学活性第25-28页
   ·修饰的Hb作为血液替代品第25-27页
   ·血红素蛋白质的电子传递及电催化特性第27-28页
 4 酶反应中间体和反应机理第28-35页
   ·活性氧中间体第29-31页
   ·酶反应活性中间体第31-33页
   ·过氧化物酶的反应中间体第33-35页
 5 过氧亚硝基阴离子第35-46页
   ·生物系统中ONOO~-的产生第35页
   ·ONOO~-的结构与性质第35-37页
   ·ONOO~-与生物物质的作用及生物系统内的影响因素第37-38页
   ·ONOO~-在生物系统中的意义第38-40页
   ·ONOO~-的清除第40-44页
   ·展望第44-46页
第二章 血红蛋白催化邻苯二胺氧化反应机理第46-60页
 1 材料与方法第47-48页
   ·试剂与仪器第47页
   ·产物的制备第47页
   ·中间体的制备第47-48页
   ·快速停流分光光度法测定Hb与H2O2反应的中间体第48页
 2 结果第48-55页
   ·紫外-可见吸收光谱第48-52页
   ·温度对中间体稳定性的影响第52页
   ·产物、中间体及相关物质的红外光谱第52-55页
   ·OPDA、产物及中间体的质谱第55页
 3 讨论第55-60页
   ·中间体及产物的结构第55-56页
   ·MetHb的催化反应机理第56-60页
第三章 血红蛋白结构与其催化活性之间的关系第60-73页
 1 材料和方法第61-64页
   ·试剂与仪器第61页
   ·Mn-Hb制备第61-62页
   ·非变性SDS-PAGE检测Mn-Hb-第62-63页
   ·H_2O_2浓度测定第63页
   ·POD活性检测第63页
   ·CAT活性检测第63页
   ·反应体系的荧光光谱第63-64页
 2 结果与分析第64-70页
   ·Mn-血红素的吸收光谱第64页
   ·Mn-Hb的SDS-PAGE鉴定第64-65页
   ·pH对Mn-Hb催化活性的影响第65页
   ·Mn-Hb的POD活性第65-66页
   ·Mn-Hb的CAT活性第66-67页
   ·Hb的内部荧光性质第67页
   ·不同温度下Hb的荧光光谱和酶学性质第67-68页
   ·不同乙醇浓度对Hb酶学性质和荧光光谱的影响第68-69页
   ·NaCl浓度对Hb稳定性和荧光光谱的影响第69页
   ·高铁Hb的荧光光谱和催化活性第69-70页
 3 讨论第70-73页
第四章 血红蛋白作为标记试剂在酶联免疫分析中的应用第73-79页
 1 材料与方法第73-75页
   ·仪器和试剂第74页
   ·溶液的配制第74页
   ·Hb-IgG的制备第74页
   ·Hb及Hb-IgG活力的测定第74页
   ·免疫分析第74-75页
 2 结果与讨论第75-79页
   ·Hb-IgG的制备结果第75页
   ·Hb-IgG催化反应条件的优化第75-76页
   ·Hb-IgG的催化活性第76页
   ·测定人IgG的标准工作曲线及样品分析第76-79页
第五章 血红蛋白/聚邻苯二胺膜电极的制各及其电催化性能的研究第79-88页
 1 材料与方法第79-80页
   ·试剂与仪器第79-80页
   ·POPDA及POPDA/Hb膜电极的制备第80页
   ·红外光谱的测定第80页
   ·Hb活性的测定方法第80页
 2 结果第80-85页
   ·邻苯二胺的电聚合特性第80-81页
   ·聚合物的红外光谱第81页
   ·Hb在POPDA膜中固定化及其电极特性第81-84页
   ·POPDA膜中固定化Hb的氧化还原特性第84-85页
 3 讨论第85-88页
第六章 过氧亚硝基阴离子对氧合血红蛋白的氧化损伤第88-96页
 1 材料与方法第89-90页
   ·ONOO~-的制备第89页
   ·oxyHb的制备第89页
   ·ONOO~-与oxyHb的反应第89-90页
   ·ONOO~-对正丁醇抽提液中血红素浓度的影响第90页
 2 结果第90-93页
   ·ONOO~-浓度的影响第90-91页
   ·温浴时间的影响第91页
   ·CO_2的影响第91-92页
   ·pH的影响第92页
   ·温度的影响第92-93页
   ·ONOO~-对oxyHb正丁醇抽提液中血红素浓度的影响第93页
 3 讨论第93-96页
第七章 过氧亚硝基阴离子及亚硝酸盐对血红蛋白催化反应的干扰第96-108页
 1 材料与方法第97-98页
   ·试剂与仪器第97-98页
   ·实验步骤第98页
 2 结果第98-105页
   ·ONOO~-和NO_2~-对OPDA的氧化第98-100页
   ·CO_2对ONOO~-氧化OPDA的影响第100页
   ·ONOO~-对愈创木酚的氧化作用第100-101页
   ·NO_2~-对PR的氧化的影响第101-102页
   ·NO_2~-与H_2O_2和Hb的反应第102-103页
   ·愈创木酚和NO_2~-与ferrylHb的反应第103-105页
 3 讨论第105-108页
研究总结第108-109页
研究展望第109-110页
参考文献第110-134页
博士生在读期间发表和待发表论著目录第134-136页
致谢第136-137页

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