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具细胞毒活性海洋微生物的分离筛选及次级代谢物的研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略语第13-15页
第一章 文献综述第15-53页
   ·海洋微生物资源的分布及其种类第16-23页
     ·海洋微生物的栖息地及其多样性第16-23页
       ·病毒第17页
       ·细菌第17-23页
   ·海洋微生物代谢产生的活性物质第23-51页
     ·影响海洋微生物生物活性物质产生的因素第28-33页
       ·温度第29页
       ·海水第29-32页
       ·培养基第32-33页
       ·混合培养第33页
     ·海洋微生物次级代谢物及其生物活性第33-51页
       ·生物碱类第34-36页
       ·环肽类第36-37页
       ·大环内酯类化合物第37-40页
       ·含硫和含卤化合物第40-42页
       ·萜类第42-44页
       ·反式十氢萘聚酮类第44-45页
       ·香豆素类和异香豆素化合物第45页
       ·醌类化合物第45-47页
       ·聚醚类化合物第47-49页
       ·其它化合物第49-51页
   ·研究目的与意义第51-53页
第二章 海洋微生物菌株的分离培养第53-70页
   ·材料和方法第53-62页
     ·材料第53-58页
       ·培养基第53-55页
       ·分离海洋微生物菌株的样品来源第55-57页
       ·仪器第57-58页
     ·方法第58-62页
       ·溶液的配制第58页
       ·样品的采集第58页
       ·样品粗处理第58-59页
       ·几丁质富集培养基制备第59页
       ·菌株分离前的预处理第59-60页
       ·菌株分离培养中抑制剂的添加第60页
       ·稀释涂布与分离第60页
       ·海洋微生物菌株的分离与纯化第60-61页
       ·菌种保藏和保藏编号第61页
       ·菌株的发酵培养第61页
       ·菌种发酵上清液的收集第61页
       ·样品分批次进行菌株分离第61-62页
   ·结果与分析第62-69页
     ·第四批样品菌株分离结果第62-64页
     ·第五批样品菌株分离结果第64-66页
     ·第6批样品菌株分离结果第66-69页
   ·小结与讨论第69-70页
第三章 抗肿瘤活性菌株的筛选分离第70-90页
 第一节 抗肿瘤药物体外快速活性筛选系统的确定第71-80页
     ·MTT法细胞毒活性测定第71-74页
       ·材料第72页
       ·方法第72-74页
     ·稻瘟霉孢子活性测定第74-77页
       ·材料第74页
       ·方法第74-77页
     ·结果与分析第77-79页
       ·MTT法筛选海洋微生物细胞毒活性菌株第77页
       ·抗稻瘟霉孢子法筛选海洋微生物活性菌株第77-79页
       ·MTT法与稻瘟霉孢子法对发酵液活性菌株筛选结果比较第79页
     ·讨论第79-80页
 第二节 海洋微生物细胞毒活性菌株的筛选第80-90页
     ·方法第81-82页
       ·初筛待测样品的制备第81页
       ·MTT法细胞毒活性菌株的筛选第81页
       ·第一和第二次复筛第81页
       ·第三次复筛第81页
       ·高活性菌株对K562、B16、Tca8113和SMMC7721等细胞系的细胞毒性的测定第81-82页
     ·结果与分析第82-88页
       ·初筛结果第82页
       ·不同样品类型对活性菌株比率的统计分析第82-84页
       ·不同预处理对活性菌株比率的统计分析第84页
       ·不同分离培养基对活性菌株比率的统计分析第84页
       ·不同微生物种类对活性菌株比率的统计分析第84-86页
       ·第一次复筛第86页
       ·第二次复筛第86页
       ·第三次复筛第86-87页
       ·高活性菌株对K562、B16、Tca8113和SMMC7721等细胞系的细胞毒性的测定第87-88页
     ·小结与讨论第88-90页
第四章 具强细胞毒活性的三株链霉菌的发酵条件及生理生化性状研究第90-106页
   ·材料和方法第90-94页
     ·仪器第90-91页
     ·菌株和肿瘤细胞系第91页
     ·培养基第91-92页
       ·斜面培养基第91页
       ·种子培养基第91-92页
       ·发酵培养基第92页
     ·方法第92-94页
       ·斜面培养第92页
       ·菌株孢子丝的插片法观察第92-93页
       ·种子培养第93页
       ·活性菌株产活性物质的遗传稳定性考察研究第93页
       ·不同发酵培养基对活性物质产生的影响实验第93页
       ·活性菌株在不同发酵时间产活性物质的实验研究第93页
       ·不同通氧量对活性菌株发酵产生活性物质的影响第93页
       ·盐度对活性菌株产生活性物质的影响实验第93-94页
       ·活性物质的乙醇和丙酮沉淀实验第94页
       ·活性物质的极性确定实验第94页
       ·活性物质的热稳定性实验第94页
       ·活性物质的酸碱稳定性第94页
       ·活性物质的常温贮藏性实验第94页
   ·结果与分析第94-104页
     ·菌株050642、060386、060524的初步鉴定第94-96页
     ·发酵培养条件的选择第96-101页
       ·斜面培养基第96页
       ·活性菌株050642、060386和060524的遗传稳定性情况第96-98页
       ·不同发酵培养基对菌株050642、060386、060524产活性物质的影响第98-99页
       ·具细胞毒活性的三株菌株在不同发酵时间的产活情况第99页
       ·发酵培养基中的盐度对活性菌株的生长和细胞毒活性物质产生的影响实验第99-100页
       ·不同通氧量与活性物质产生的关系第100-101页
     ·菌株050642、060386和060524所产生的细胞毒活性物质的理化性质第101-104页
       ·活性物质的沉淀实验第101页
       ·活性物质的极性实验第101-103页
       ·活性物质的热稳定性实验第103页
       ·活性物质的酸碱稳定性实验第103页
       ·活性物质的耐贮藏性实验第103-104页
   ·小结与讨论第104-106页
第五章 链霉菌菌株060524次级代谢产物的分离鉴定及其生物学活性研究第106-138页
 第一节 链霉菌菌株060524次级代谢产物的分离鉴定第107-121页
     ·材料和方法第107-111页
       ·仪器第107页
       ·菌株及细胞第107页
       ·种子培养基第107-108页
       ·提取与分离第108-109页
       ·结晶或单晶的培养第109-111页
     ·结果与分析第111-121页
       ·菌株060524次级代谢物各组分的化学结构鉴定第111-121页
 第二节 分离获得的次级代谢组分的生物活性第121-138页
     ·材料和方法第121-125页
       ·测试样品第121页
       ·测试肿瘤细胞株第121页
       ·测试菌株第121-122页
       ·培养基第122页
       ·试剂第122页
       ·供试样品原液的制备第122页
       ·细胞毒活性测定实验方法第122-123页
       ·细胞凋亡实验方法第123页
       ·抑菌活性的测定方法第123-124页
       ·酶抑制活性测试方法第124-125页
     ·结果与分析第125-134页
       ·细胞毒活性初筛测定结果第125-127页
       ·细胞毒活性细筛测定结果第127-129页
       ·具强细胞毒活性化合物的细胞凋亡实验结果第129-131页
       ·抗菌活性实验测定结果第131页
       ·酶抑制活性实验测定结果第131-134页
   ·小结与讨论第134-138页
第六章 链霉菌菌株060524对异黄酮转化作用的研究第138-149页
   ·材料和方法第139-142页
     ·材料第139页
     ·方法第139-142页
       ·β-葡萄糖苷酶活性测定第139-141页
       ·链霉菌菌株060524生物转化大豆异黄酮的薄层法检测第141页
       ·不同发酵时间培养液中异黄酮甙和5种异黄酮苷元的定量分析研究第141页
       ·链霉菌菌株060524对大豆黄素和染料木素的转化作用研究第141-142页
   ·结果与讨论第142-143页
     ·链霉菌菌株060524的β-葡萄糖苷酶活性第142-143页
     ·链霉菌菌株060524对大豆黄素和染料木素的转化作用第143页
     ·不同培养时间发酵上清液中异黄酮各组分的含量第143页
   ·小结与讨论第143-149页
总结与展望第149-152页
创新点第152-153页
参考文献第153-166页
致谢第166-167页
附录第167-196页
 博士在读期间已发表和待发表论文第167-168页
 化合物S1的部分谱图第168-170页
 化合物S2的部分谱图第170-171页
 化合物S3的部分谱图第171-174页
 化合物S4的部分谱图第174-178页
 化合物S5的部分谱图第178-180页
 化合物S6的部分谱图第180-182页
 化合物S7的部分谱图第182-183页
 化合物S8的部分谱图第183-185页
 化合物S9的部分谱图第185-186页
 化合物S10的部分谱图第186-187页
 化合物S11的部分谱图第187-193页
 化合物S12的部分谱图第193-195页
 化合物S13的部分谱图第195-196页

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