摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩略语 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-53页 |
·海洋微生物资源的分布及其种类 | 第16-23页 |
·海洋微生物的栖息地及其多样性 | 第16-23页 |
·病毒 | 第17页 |
·细菌 | 第17-23页 |
·海洋微生物代谢产生的活性物质 | 第23-51页 |
·影响海洋微生物生物活性物质产生的因素 | 第28-33页 |
·温度 | 第29页 |
·海水 | 第29-32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·混合培养 | 第33页 |
·海洋微生物次级代谢物及其生物活性 | 第33-51页 |
·生物碱类 | 第34-36页 |
·环肽类 | 第36-37页 |
·大环内酯类化合物 | 第37-40页 |
·含硫和含卤化合物 | 第40-42页 |
·萜类 | 第42-44页 |
·反式十氢萘聚酮类 | 第44-45页 |
·香豆素类和异香豆素化合物 | 第45页 |
·醌类化合物 | 第45-47页 |
·聚醚类化合物 | 第47-49页 |
·其它化合物 | 第49-51页 |
·研究目的与意义 | 第51-53页 |
第二章 海洋微生物菌株的分离培养 | 第53-70页 |
·材料和方法 | 第53-62页 |
·材料 | 第53-58页 |
·培养基 | 第53-55页 |
·分离海洋微生物菌株的样品来源 | 第55-57页 |
·仪器 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-62页 |
·溶液的配制 | 第58页 |
·样品的采集 | 第58页 |
·样品粗处理 | 第58-59页 |
·几丁质富集培养基制备 | 第59页 |
·菌株分离前的预处理 | 第59-60页 |
·菌株分离培养中抑制剂的添加 | 第60页 |
·稀释涂布与分离 | 第60页 |
·海洋微生物菌株的分离与纯化 | 第60-61页 |
·菌种保藏和保藏编号 | 第61页 |
·菌株的发酵培养 | 第61页 |
·菌种发酵上清液的收集 | 第61页 |
·样品分批次进行菌株分离 | 第61-62页 |
·结果与分析 | 第62-69页 |
·第四批样品菌株分离结果 | 第62-64页 |
·第五批样品菌株分离结果 | 第64-66页 |
·第6批样品菌株分离结果 | 第66-69页 |
·小结与讨论 | 第69-70页 |
第三章 抗肿瘤活性菌株的筛选分离 | 第70-90页 |
第一节 抗肿瘤药物体外快速活性筛选系统的确定 | 第71-80页 |
·MTT法细胞毒活性测定 | 第71-74页 |
·材料 | 第72页 |
·方法 | 第72-74页 |
·稻瘟霉孢子活性测定 | 第74-77页 |
·材料 | 第74页 |
·方法 | 第74-77页 |
·结果与分析 | 第77-79页 |
·MTT法筛选海洋微生物细胞毒活性菌株 | 第77页 |
·抗稻瘟霉孢子法筛选海洋微生物活性菌株 | 第77-79页 |
·MTT法与稻瘟霉孢子法对发酵液活性菌株筛选结果比较 | 第79页 |
·讨论 | 第79-80页 |
第二节 海洋微生物细胞毒活性菌株的筛选 | 第80-90页 |
·方法 | 第81-82页 |
·初筛待测样品的制备 | 第81页 |
·MTT法细胞毒活性菌株的筛选 | 第81页 |
·第一和第二次复筛 | 第81页 |
·第三次复筛 | 第81页 |
·高活性菌株对K562、B16、Tca8113和SMMC7721等细胞系的细胞毒性的测定 | 第81-82页 |
·结果与分析 | 第82-88页 |
·初筛结果 | 第82页 |
·不同样品类型对活性菌株比率的统计分析 | 第82-84页 |
·不同预处理对活性菌株比率的统计分析 | 第84页 |
·不同分离培养基对活性菌株比率的统计分析 | 第84页 |
·不同微生物种类对活性菌株比率的统计分析 | 第84-86页 |
·第一次复筛 | 第86页 |
·第二次复筛 | 第86页 |
·第三次复筛 | 第86-87页 |
·高活性菌株对K562、B16、Tca8113和SMMC7721等细胞系的细胞毒性的测定 | 第87-88页 |
·小结与讨论 | 第88-90页 |
第四章 具强细胞毒活性的三株链霉菌的发酵条件及生理生化性状研究 | 第90-106页 |
·材料和方法 | 第90-94页 |
·仪器 | 第90-91页 |
·菌株和肿瘤细胞系 | 第91页 |
·培养基 | 第91-92页 |
·斜面培养基 | 第91页 |
·种子培养基 | 第91-92页 |
·发酵培养基 | 第92页 |
·方法 | 第92-94页 |
·斜面培养 | 第92页 |
·菌株孢子丝的插片法观察 | 第92-93页 |
·种子培养 | 第93页 |
·活性菌株产活性物质的遗传稳定性考察研究 | 第93页 |
·不同发酵培养基对活性物质产生的影响实验 | 第93页 |
·活性菌株在不同发酵时间产活性物质的实验研究 | 第93页 |
·不同通氧量对活性菌株发酵产生活性物质的影响 | 第93页 |
·盐度对活性菌株产生活性物质的影响实验 | 第93-94页 |
·活性物质的乙醇和丙酮沉淀实验 | 第94页 |
·活性物质的极性确定实验 | 第94页 |
·活性物质的热稳定性实验 | 第94页 |
·活性物质的酸碱稳定性 | 第94页 |
·活性物质的常温贮藏性实验 | 第94页 |
·结果与分析 | 第94-104页 |
·菌株050642、060386、060524的初步鉴定 | 第94-96页 |
·发酵培养条件的选择 | 第96-101页 |
·斜面培养基 | 第96页 |
·活性菌株050642、060386和060524的遗传稳定性情况 | 第96-98页 |
·不同发酵培养基对菌株050642、060386、060524产活性物质的影响 | 第98-99页 |
·具细胞毒活性的三株菌株在不同发酵时间的产活情况 | 第99页 |
·发酵培养基中的盐度对活性菌株的生长和细胞毒活性物质产生的影响实验 | 第99-100页 |
·不同通氧量与活性物质产生的关系 | 第100-101页 |
·菌株050642、060386和060524所产生的细胞毒活性物质的理化性质 | 第101-104页 |
·活性物质的沉淀实验 | 第101页 |
·活性物质的极性实验 | 第101-103页 |
·活性物质的热稳定性实验 | 第103页 |
·活性物质的酸碱稳定性实验 | 第103页 |
·活性物质的耐贮藏性实验 | 第103-104页 |
·小结与讨论 | 第104-106页 |
第五章 链霉菌菌株060524次级代谢产物的分离鉴定及其生物学活性研究 | 第106-138页 |
第一节 链霉菌菌株060524次级代谢产物的分离鉴定 | 第107-121页 |
·材料和方法 | 第107-111页 |
·仪器 | 第107页 |
·菌株及细胞 | 第107页 |
·种子培养基 | 第107-108页 |
·提取与分离 | 第108-109页 |
·结晶或单晶的培养 | 第109-111页 |
·结果与分析 | 第111-121页 |
·菌株060524次级代谢物各组分的化学结构鉴定 | 第111-121页 |
第二节 分离获得的次级代谢组分的生物活性 | 第121-138页 |
·材料和方法 | 第121-125页 |
·测试样品 | 第121页 |
·测试肿瘤细胞株 | 第121页 |
·测试菌株 | 第121-122页 |
·培养基 | 第122页 |
·试剂 | 第122页 |
·供试样品原液的制备 | 第122页 |
·细胞毒活性测定实验方法 | 第122-123页 |
·细胞凋亡实验方法 | 第123页 |
·抑菌活性的测定方法 | 第123-124页 |
·酶抑制活性测试方法 | 第124-125页 |
·结果与分析 | 第125-134页 |
·细胞毒活性初筛测定结果 | 第125-127页 |
·细胞毒活性细筛测定结果 | 第127-129页 |
·具强细胞毒活性化合物的细胞凋亡实验结果 | 第129-131页 |
·抗菌活性实验测定结果 | 第131页 |
·酶抑制活性实验测定结果 | 第131-134页 |
·小结与讨论 | 第134-138页 |
第六章 链霉菌菌株060524对异黄酮转化作用的研究 | 第138-149页 |
·材料和方法 | 第139-142页 |
·材料 | 第139页 |
·方法 | 第139-142页 |
·β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第139-141页 |
·链霉菌菌株060524生物转化大豆异黄酮的薄层法检测 | 第141页 |
·不同发酵时间培养液中异黄酮甙和5种异黄酮苷元的定量分析研究 | 第141页 |
·链霉菌菌株060524对大豆黄素和染料木素的转化作用研究 | 第141-142页 |
·结果与讨论 | 第142-143页 |
·链霉菌菌株060524的β-葡萄糖苷酶活性 | 第142-143页 |
·链霉菌菌株060524对大豆黄素和染料木素的转化作用 | 第143页 |
·不同培养时间发酵上清液中异黄酮各组分的含量 | 第143页 |
·小结与讨论 | 第143-149页 |
总结与展望 | 第149-152页 |
创新点 | 第152-153页 |
参考文献 | 第153-166页 |
致谢 | 第166-167页 |
附录 | 第167-196页 |
博士在读期间已发表和待发表论文 | 第167-168页 |
化合物S1的部分谱图 | 第168-170页 |
化合物S2的部分谱图 | 第170-171页 |
化合物S3的部分谱图 | 第171-174页 |
化合物S4的部分谱图 | 第174-178页 |
化合物S5的部分谱图 | 第178-180页 |
化合物S6的部分谱图 | 第180-182页 |
化合物S7的部分谱图 | 第182-183页 |
化合物S8的部分谱图 | 第183-185页 |
化合物S9的部分谱图 | 第185-186页 |
化合物S10的部分谱图 | 第186-187页 |
化合物S11的部分谱图 | 第187-193页 |
化合物S12的部分谱图 | 第193-195页 |
化合物S13的部分谱图 | 第195-196页 |