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马传染性贫血病驴白细胞弱毒感染性分子克隆及其衍生毒的生物学和分子生物学特性分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
前言第11-12页
文献综述第12-23页
 一、 EIA的分子生物学研究进展第14-21页
  1 囊膜糖蛋白Env的变异与机体体液免疫的成熟第14-17页
   ·Env基因是高度变异的第14-15页
   ·Env蛋白的糖基化第15-16页
   ·机体体液免疫的成熟第16-17页
  2 基质蛋白Gag的CTL表位与机体的细胞免疫第17-18页
   ·Gag基因及其编码的蛋白第17-18页
   ·基质蛋白Gag的CTL表位第18页
   ·EIAV刺激机体所产生的细胞免疫第18页
  3 EIAV非编码区LTR的高度变异性与细胞因子的关系第18-21页
   ·LTR的变异性第18-19页
   ·LTR与细胞因子的相互作用第19-20页
   ·LTR与Tat的相互作用第20-21页
 二、 慢病毒疫苗研究进展与展望第21-22页
 三、 小结第22-23页
研究报告第23-80页
 实验一 EIAV克隆毒和嵌合病毒免疫马攻毒前后体内各结构蛋白抗体水平及病理组织学的研究第23-41页
  1 材料第23-25页
   ·毒株第23-24页
   ·试验动物第24页
   ·试剂第24页
   ·仪器第24-25页
  2 方法第25-26页
   ·试验分组及病料采集第25页
   ·血清抗体的检测第25页
   ·各试验马解剖学变化第25-26页
   ·各试验马各脏器病理组织学检测第26页
   ·吞铁试验第26页
  3 结果第26-41页
   ·接种及攻毒后各匹马的临床反应第26-28页
   ·攻毒前后各结构蛋白抗体的变异第28-41页
 实验二 利用REAL-TIME PCR和REAL-TIME RT-PCR对外周血白细胞EIAV前病毒及血浆中病毒RNA含量的测定第41-52页
  1 材料第41-43页
   ·毒株第41-42页
   ·试验动物第42页
   ·质粒第42页
   ·试剂第42页
   ·细胞培养用试剂第42页
   ·仪器设备第42-43页
  2 方法第43-46页
   ·试验分组及病料的采集第43页
   ·马外周血白细胞的制备第43页
   ·马血浆的处理第43页
   ·前病毒DNA的提取第43页
   ·病毒RNA的提取第43-44页
   ·Real-time PCR引物的设计第44页
   ·Real-time PCR标准曲线的建立第44页
   ·Real-time RT-PCR标准曲线的建立第44-46页
  3 结果第46-52页
   ·Real-time PCR标准曲线的建立第46页
   ·Real-time RT-PCR标准曲线的建立第46-47页
   ·病毒DNA检测结果第47-49页
   ·病毒RNA检测结果第49-52页
 实验三 EIAV嵌合病毒接种马攻毒前后马外周血白细胞中EIAV前病毒LTR及ENV序列的测定及分析第52-80页
  1 材料第52-53页
   ·毒株第52-53页
   ·试验动物第53页
   ·试剂第53页
   ·仪器第53页
  2 方法第53-54页
   ·试验分组及病料的采集第53页
   ·接种和攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒DNA的提取第53页
   ·半套式PCR扩增各试验马不同时期外周血白细胞前病毒LTR第53-54页
   ·套式PCR扩增各试验马不同时期外周血白细胞前病毒env基因第54页
   ·PCR产物的克隆测序第54页
   ·序列的分析第54页
  3 结果第54-80页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒LTR的扩增及克隆第54-55页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒env基因的扩增及克隆第55页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒LTR的序列比较分析第55-65页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒LTR序列变化规律第65-67页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒env的序列分析第67-72页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒部分ENV翻译终止情况第72-77页
   ·免疫及攻毒后7#马囊膜糖蛋白PND变异情况第77-78页
   ·免疫及攻毒后各试验马不同时期外周血白细胞前病毒ENV序列变异规律第78-80页
讨论第80-86页
结论第86-87页
参考文献第87-96页
附录第96-100页
致谢第100-101页
作者简历第101页

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