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猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
第1章 文献综述第8-35页
   ·乙型脑炎的研究进展第8-32页
     ·乙型脑炎历史回顾第8页
     ·乙型脑炎病原学第8-9页
     ·乙型脑炎的流行病学第9-14页
     ·乙型脑炎的致病机制第14页
     ·乙型脑炎的免疫学第14-15页
     ·乙型脑炎病毒感染的临床症状与病理变化第15-17页
     ·乙型脑炎的诊断与防治第17-19页
     ·乙型脑炎疫苗研究进展第19-25页
     ·乙型脑炎病毒分子生物学研究进展第25-32页
     ·展望第32页
   ·伪狂犬病病毒作为动物病毒活载体的研究进展第32-35页
第2章 研究目的和意义第35-36页
第3章 材料与方法第36-53页
   ·实验材料第36-41页
   ·实验方法第41-53页
     ·乙型脑炎病毒增殖与纯化第41页
     ·乙型脑炎病毒RNA提取第41-42页
     ·乙型脑炎病毒PrM-E基因的RT-PCR扩增第42-44页
     ·乙型脑炎病毒PrM、PrM-E、NS1基因的PCR扩增第44-45页
     ·重组转移载体的构建第45页
     ·伪狂犬病病毒基因组DNA的提取第45页
     ·重组伪狂犬病病毒株的获得第45-47页
     ·Southern印迹分析第47-48页
     ·SDS-PAGE分析和Western blot检测第48-49页
     ·微量中和试验第49-50页
     ·重组伪狂犬病病毒在鸡胚成纤维细胞上的增殖第50页
     ·ELISA试验第50页
     ·小白鼠脾细胞的制备第50页
     ·外周血单核细胞的分离第50-51页
     ·抗原特异性细胞毒性T细胞活性(CTL)的诱导及测定第51-52页
     ·统计方法第52-53页
第4章 结果与分析第53-74页
   ·乙型脑炎病毒PrM-E基因的克隆及序列分析第53-57页
     ·PrM-E基因的RT-PCR扩增结果第53页
     ·PrM-E基因的克隆、鉴定、测序及分析第53-57页
   ·表达乙型脑炎病毒主要免疫原性基因的重组伪狂犬病毒的构建第57-66页
     ·重组伪狂犬病病毒构建的技术路线第57-61页
     ·重组伪狂犬病病毒的构建第61-65页
     ·重组病毒的Western blot鉴定第65-66页
   ·重组伪狂犬病病毒在不同细胞上的增殖滴度第66页
   ·外源基因对重组伪狂犬病病毒在IBRS-2细胞上增殖滴度的影响第66-67页
   ·重组伪狂犬病病毒的遗传稳定性第67页
   ·重组伪狂犬病病毒二价基因工程疫苗的制备第67-68页
   ·重组伪狂犬病病毒的动物试验第68-74页
     ·重组伪狂犬病病毒对Balb/c小鼠的安全性试验第68页
     ·重组伪狂犬病病毒接种Balb/c小鼠的免疫试验第68-70页
     ·重组伪狂犬病病毒接种断奶仔猪的免疫试验第70-74页
第5章 讨论与结论第74-78页
   ·讨论第74-76页
     ·乙型脑炎病毒RNA基因组的提取与RT-PCR扩增第74页
     ·重组中间转移载体的构建第74页
     ·表达乙型脑炎病毒主要免疫原性基因的重组伪狂犬病病毒的构建第74-75页
     ·外源基因的插入对伪狂犬病病毒增殖和毒力的影响第75页
     ·重组伪狂犬病病毒诱导的免疫应答第75-76页
   ·结论第76-78页
参考文献第78-96页
缩略词表第96-98页
致谢第98页

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