| 致谢 | 第1-4页 |
| 扉页 | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一节 性别决定的生物学机制 | 第13-15页 |
| 1 性别决定的发育学机制 | 第13页 |
| 2 性别决定的遗传学机制 | 第13-15页 |
| 第二节 人工受精过程的性别控制 | 第15-20页 |
| 1 精子分离与鉴定的方法 | 第15-16页 |
| 2 精子分离的研究现状 | 第16-19页 |
| 3 显微受精 | 第19-20页 |
| 第三节 胚胎移植过程中的性别控制 | 第20-26页 |
| 1 非分子生物学方法 | 第20-22页 |
| 2 分子生物学方法 | 第22-26页 |
| 实验部分 | 第26-73页 |
| 实验一 连续多重PCR扩增SRY在牛性别鉴定上应用 | 第26-39页 |
| 一、 引言 | 第26页 |
| 二、 材料与方法 | 第26-31页 |
| 1 试验材料 | 第26-28页 |
| 2 主要试验方法 | 第28-31页 |
| ·牛总基因组DNA的制备 | 第28-29页 |
| ·电泳检测基因组DNA | 第29页 |
| ·细胞计数 | 第29-30页 |
| ·PCR体系的建立 | 第30-31页 |
| ·PCR体系的优化 | 第31页 |
| ·PCR体系的应用 | 第31页 |
| 三、 结果与分析 | 第31-37页 |
| 1 DNA的提取及鉴定 | 第31-32页 |
| 2 PCR的优化 | 第32-35页 |
| ·引物加入的次序时机 | 第32-33页 |
| ·Mg2+的浓度影响 | 第33-34页 |
| ·不同PCR仪的影响 | 第34-35页 |
| 3 优化后体系的应用 | 第35-36页 |
| ·不同浓度梯度的DNA模板的扩增 | 第35页 |
| ·淋巴细胞扩增 | 第35-36页 |
| ·胚胎扩增 | 第36页 |
| 4 准确率 | 第36-37页 |
| 四、 讨论与结论 | 第37-39页 |
| 实验二 PCR扩增AML对牛胚胎性别鉴定 | 第39-53页 |
| 一、 引言 | 第39页 |
| 二、 材料与方法 | 第39-41页 |
| 三、 结果与分析 | 第41-49页 |
| 1 DNA的提取及鉴定 | 第41页 |
| 2 PCR的优化 | 第41-48页 |
| ·Mg2+的浓度影响 | 第41-42页 |
| ·引物浓度的影响 | 第42-43页 |
| ·底物比例的影响 | 第43-44页 |
| ·变性剂对扩增的影响 | 第44-45页 |
| ·TD-PCR/TU-PCR | 第45页 |
| ·Booster PCR | 第45-46页 |
| ·酶浓度对扩增的影响 | 第46页 |
| ·不同循环数及扩增体积的影响 | 第46-48页 |
| 3 准确率 | 第48页 |
| 4 应用 | 第48-49页 |
| ·颗粒细胞 | 第48-49页 |
| ·胚胎 | 第49页 |
| 四、 讨论与小结 | 第49-53页 |
| 实验三 LAMP法牛胚胎性别鉴定试剂盒的应用评价研究 | 第53-67页 |
| 一、 引言 | 第53页 |
| 二、 材料与方法 | 第53-57页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-57页 |
| 三、 结果与分析 | 第57-65页 |
| 1 实验室试用结果 | 第57-62页 |
| ·准确率 | 第57-58页 |
| ·特异性鉴定结果 | 第58页 |
| ·灵敏度 | 第58-59页 |
| ·裂解胚的鉴定结果 | 第59-60页 |
| ·高浓度模板的LAMP | 第60-62页 |
| 2 现场使用结果 | 第62-65页 |
| ·批次一 | 第62页 |
| ·批次二 | 第62-63页 |
| ·批次三 | 第63-65页 |
| 四、 讨论与结论 | 第65-67页 |
| 1 讨论 | 第65-66页 |
| 2 结论 | 第66-67页 |
| 实验四 LAMP法牛胚胎性别鉴定研究初探 | 第67-73页 |
| 一、前言 | 第67页 |
| 二、 材料与方法 | 第67-70页 |
| 1 材料 | 第67-68页 |
| 2 方法 | 第68-70页 |
| 三、 结果与分析 | 第70-71页 |
| 四、 讨论与结论 | 第71-73页 |
| 1 讨论 | 第71-72页 |
| 2 小结 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 参考文献 | 第78-81页 |