| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| ·细胞色素P450 | 第9-19页 |
| ·细胞色素P450研究简史 | 第9-10页 |
| ·细胞色素P450研究进展 | 第10-14页 |
| ·真菌细胞色素P450 | 第14-19页 |
| ·SPR生物传感器 | 第19-25页 |
| ·原理 | 第19-20页 |
| ·SPR生物传感器的特点 | 第20-23页 |
| ·SPR生物传感器在生命科学中的应用 | 第23页 |
| ·对SPR生物传感器的改进 | 第23-25页 |
| 2 实验材料和方法 | 第25-37页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·生化试剂和抗菌素 | 第25页 |
| ·常用贮存液 | 第25-26页 |
| ·限制性内切酶及其它工具酶 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·常用缓冲液 | 第26-28页 |
| ·SPR生物传感器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·DNA限制性内切酶消化 | 第30页 |
| ·DNA片段的回收 | 第30-31页 |
| ·DNA片段的连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第31-32页 |
| ·蛋白质的原核表达 | 第32页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第32页 |
| ·用银盐对SDS-PAGE凝胶进行染色 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白的大量制备 | 第33-34页 |
| ·DEAE纤维素色谱柱分离纯化 | 第34-35页 |
| ·SPR生物传感器的检测 | 第35-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-47页 |
| ·重组表达质粒pRT-P450nor和pET-P450nor的构建和表达 | 第37-44页 |
| ·重组表达质粒pRT-P450nor和pET-P450nor的构建 | 第37页 |
| ·重组表达质粒pRT-P450nor和pET-P450nor的鉴定 | 第37-41页 |
| ·P450nor基因在大肠杆菌Ecoli BL21中的表达 | 第41-44页 |
| ·原核表达的细胞色素P450nor的分离纯化 | 第44-46页 |
| ·SPR谱的测量 | 第46-47页 |
| ·测量本底的SPR谱 | 第46页 |
| ·测量金膜上结合乙肝表面抗原1分钟和30分钟的SPR谱 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-54页 |
| ·目的基因的原核高效表达 | 第47-50页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第47-50页 |
| ·原核表达条件的优化 | 第50页 |
| ·外源基因表达过程中包涵体的控制 | 第50-52页 |
| ·DEAE-纤维素柱层析 | 第52页 |
| ·SPR生物传感器免疫检测法的建立及应用 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
