摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
引言 | 第10-11页 |
第一部分 文献研究 | 第11-28页 |
·柴胡总皂苷研究概述 | 第11-13页 |
·柴胡的主要化学成分 | 第11-12页 |
·迄今已知的柴胡皂苷药理作用 | 第12-13页 |
·CYPs研究概述 | 第13-17页 |
·CYP3A研究概述 | 第14页 |
·CYP2D6研究概述 | 第14-15页 |
·CYP2E1研究概述 | 第15页 |
·CYP1A2研究概述 | 第15-17页 |
·CYP2C9研究概述 | 第17页 |
·硫酸转移酶的研究概述 | 第17-25页 |
·SULTs的生理意义 | 第17-18页 |
·SULTs的组织分布 | 第18-19页 |
·SULTs的代谢底物 | 第19-20页 |
·SULTs的抑制剂和诱导剂 | 第20-22页 |
·SULTs与核受体的关系 | 第22-25页 |
·ATP依赖型药物转运体P-糖蛋白 | 第25-28页 |
第二部分 实验研究 | 第28-40页 |
·研究路线 | 第28-29页 |
·药品与试剂 | 第29页 |
·仪器 | 第29页 |
·实验动物处理 | 第29-30页 |
·P-gp的活性测定 | 第30页 |
·测定原理 | 第30页 |
·血清APAP浓度测定 | 第30页 |
·P-gp依赖的ATP酶活性的测定 | 第30-32页 |
·试剂的配制 | 第31页 |
·肠匀浆的制备 | 第31页 |
·酶促反应 | 第31页 |
·定磷反应 | 第31-32页 |
·微粒体的制备 | 第32页 |
·肝脏和小肠的分离 | 第32页 |
·肠微粒体的制备 | 第32页 |
·肝微粒体和肝胞质液的制备 | 第32页 |
·蛋白定量 | 第32-33页 |
·蛋白标准曲线的建立 | 第32-33页 |
·样品蛋白含量测定 | 第33页 |
·肝和肠微粒体中Cyp3a酶活性的测定 | 第33-34页 |
·反应原理 | 第33页 |
·甲醛标准曲线的制备 | 第33页 |
·Cyp3a酶活性的测定 | 第33-34页 |
·肝微粒体中Cyp2e1酶活性的测定 | 第34页 |
·反应原理 | 第34页 |
·对氨基酚标准曲线的制备 | 第34页 |
·Cyp2e1酶活性测定 | 第34页 |
·Cyp2d22和Cyp1a2活性测定 | 第34-35页 |
·反应原理 | 第34-35页 |
·体外孵育反应 | 第35页 |
·肝脏SULT1A1的活性测定 | 第35-36页 |
·反应原理 | 第35页 |
·标准曲线的建立 | 第35-36页 |
·小鼠肝脏SULT1A1活性测定 | 第36页 |
·实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)定量肝脏中目的基因 | 第36-39页 |
·肝组织总RNA提取 | 第36-37页 |
·RNA逆转录(Reverse Transcription)反应 | 第37页 |
·PCR反应 | 第37-39页 |
·统计学处理 | 第39-40页 |
第三部分 实验结果 | 第40-52页 |
·P-gp功能及其mRNA表达测定结果 | 第40-42页 |
·P-gp功能检测(血清中APAP浓度法) | 第40页 |
·P-gp依赖的ATP酶活性测定结果 | 第40-41页 |
·Abcb1b mRNA表达测定结果 | 第41-42页 |
·Cyp3a酶活性及其mRNA表达测定结果 | 第42-44页 |
·肝脏Cyp3a酶活性测定结果 | 第42-43页 |
·肠道Cyp3a酶活性测定结果 | 第43-44页 |
·Cyp3a11 mRNA表达测定结果 | 第44页 |
·Cyp2e1酶活性及其mRNA表达测定结果 | 第44-46页 |
·Cyp2e1酶活性测定结果 | 第44-45页 |
·Cyp2e1mRNA表达测定结果 | 第45-46页 |
·Cyp2d22酶活性及其mRNA表达测定结果 | 第46-48页 |
·专属性 | 第46页 |
·线性范围和最低检出限 | 第46页 |
·回收率 | 第46页 |
·精密度 | 第46页 |
·Cyp2d22活性测定结果 | 第46-47页 |
·Cyp1a2活性测定结果 | 第47-48页 |
·Cyp2d22 mRNA表达测定结果 | 第48页 |
·SULT1A1酶活性及其mRNA表达测定结果 | 第48-52页 |
·SULT1A1活性测定结果 | 第48-51页 |
·SULT1A1 mRNA表达测定结果 | 第51-52页 |
第四部分 讨论 | 第52-63页 |
第五部分 结论 | 第63-64页 |
第六部分 参考文献 | 第64-77页 |
附录 | 第77-80页 |
致谢 | 第80页 |