| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英语摘要 | 第10-14页 |
| 本论文缩写词表 | 第14-17页 |
| 第一章 导言 | 第17-28页 |
| 1．1 拟南芥Arabidopsis thaliana L． | 第17-19页 |
| 1．1．1 普通生物学特性 | 第17页 |
| 1．1．2 遗传学特性 | 第17-19页 |
| 1．2 茉莉素——一类新的植物激素 | 第19-25页 |
| 1．2．1 茉莉素的分布及生物合成 | 第19-21页 |
| （1） 分布 | 第19页 |
| （2） 茉莉素的立体化学和生物合成 | 第19-21页 |
| 1．2．2 茉莉素的功能 | 第21-25页 |
| （1） 促进衰老 | 第21-22页 |
| （2） 抑制生长 | 第22页 |
| （3） 促进乙烯产生和果实成熟 | 第22页 |
| （4） 促进插条生根 | 第22页 |
| （5） 诱导块茎形态建成 | 第22页 |
| （6） 影响气孔、颖花开放 | 第22页 |
| （7） 影响光合作用 | 第22-23页 |
| （8） 调控基因表达 | 第23页 |
| （9） 调控植物抗性 | 第23-25页 |
| 1．3 COI1基因 | 第25-27页 |
| 1．3．1 冠毒素 | 第25-26页 |
| 1．3．2 COI1基因的分离 | 第26页 |
| 1．3．3 COI1基因 | 第26-27页 |
| 1．4 目标 | 第27-28页 |
| 第二章 COI1互作基因的分离 | 第28-40页 |
| 2．1 材料与方法 | 第28-33页 |
| 2．1．1 材料 | 第28-30页 |
| 2．1．1．1 拟南芥酵母双杂交pB42AD cDNA文库 | 第28页 |
| 2．1．1．2 质粒 | 第28-29页 |
| 2．1．1．3 菌株 | 第29页 |
| 2．1．1．4 培养基 | 第29-30页 |
| 2．1．1．5 其它试剂 | 第30页 |
| 2．1．1．6 引物 | 第30页 |
| 2．1．2 方法 | 第30-33页 |
| 2．1．2．1 醇母转化及培养 | 第30-31页 |
| 2．1．2．2 PCR检测 | 第31页 |
| 2．1．2．3 限制性内切酶反应 | 第31页 |
| 2．1．2．4 归群 | 第31页 |
| 2．1．2．5 酵母质粒提取 | 第31页 |
| 2．1．2．6 质粒转化大肠杆菌E．coli KC8菌株 | 第31-32页 |
| 2．1．2．7 pB42AD重组质粒提取 | 第32页 |
| 2．1．2．8 测序与序列分析 | 第32-33页 |
| 2．2 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2．2．1 PCR | 第33页 |
| 2．2．2 酶切结果 | 第33-34页 |
| 2．2．3 归群 | 第34-35页 |
| 2．2．4 质粒转化大肠杆菌E．coli KC8菌株及检测 | 第35页 |
| 2．2．5 pB42AD cDNA重组质粒提取与序列分析 | 第35-38页 |
| 2．3 讨论 | 第38-40页 |
| 2．3．1 酵母双杂交分析体系 | 第38-39页 |
| 2．3．2 限制性内切酶反应及归群 | 第39页 |
| 2．3．3 E．coli KC8菌株 | 第39页 |
| 2．3．4 ASK1 cDNA | 第39-40页 |
| 第三章 ASK1等基因的功能分析 | 第40-51页 |
| 3．1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 3．1．1 酵母双杂交分析 | 第40页 |
| 3．1．2 基因功能分析 | 第40-43页 |
| （1） T-DNA筛选 | 第40-41页 |
| （2） 拟南芥的培养 | 第41页 |
| （3） ASK1等反义基因构建及拟南芥的转化 | 第41-43页 |
| （4） 转ASK1等反义基因植物表型观察 | 第43页 |
| 3．2 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3．2．1 酵母双杂交分析 | 第43页 |
| 3．2．2 T-DNA筛选 | 第43-44页 |
| 3．2．3 转基因植株筛选 | 第44-45页 |
| 3．2．4 ASK1等反义转化拟南芥植株的表型分析 | 第45-49页 |
| （1） ASK1反义转化导致雄性不育 | 第45-46页 |
| （2） MeJA对转反义基因植株的影响 | 第46-48页 |
| （3） 抗性测试结果 | 第48-49页 |
| 3．3 讨论 | 第49-51页 |
| 3．3．1 T-DNA筛选 | 第49页 |
| 3．3．2 反义RNA技术 | 第49-50页 |
| 3．3．3 ASK1与雄性不育 | 第50页 |
| 3．3．4 植物转化方法 | 第50-51页 |
| 第四章 ASK1、COI1蛋白表达与抗血清制备 | 第51-59页 |
| 4．1 材料与方法 | 第51-55页 |
| 4．1．1 材料 | 第51-52页 |
| （1） 菌株及载体 | 第51页 |
| （2） 培养基及酶试剂 | 第51页 |
| （3） 引物 | 第51-52页 |
| 4．1．2 方法 | 第52-55页 |
| 4．1．2．1 ASK1在酵母中的蛋白表达 | 第52-54页 |
| 4．1．2．2 COI1在E．coli中的表达 | 第54页 |
| 4．1．2．3 ASK1、COI1蛋白抗血清制备 | 第54-55页 |
| 4．2 结果与分析 | 第55-57页 |
| 4．2．1 GST-ASK1融合蛋白 | 第55页 |
| 4．2．2 PET COI1重组质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| 4．2．3 COI1基因在大肠杆菌中的蛋白表达与纯化 | 第56-57页 |
| 4．2．4 ASK1、COI1抗血清酶联免疫吸附试验 | 第57页 |
| 4．3 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 转反义ASK1植株的分子检测与COI1和ASK1的共免疫沉淀 | 第59-68页 |
| 5．1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 5．1．1 材料 | 第59页 |
| 5．1．2 方法 | 第59-62页 |
| （1） 拟南芥培育 | 第59页 |
| （2） 植物DNA提取 | 第59-60页 |
| （3） 植物RNA提取 | 第60页 |
| （4） 植物蛋白质提取 | 第60页 |
| （5） 转基因植株PCR检测 | 第60页 |
| （6） 转基因植株RT-PCR检测 | 第60-61页 |
| （7） Western印迹 | 第61页 |
| （8） COI1、ASK1共免疫沉淀试验 | 第61-62页 |
| 5．2 结果与分析 | 第62-66页 |
| 5．2．1 转基因植株的PCR检测 | 第62页 |
| 5．2．2 反义转化对拟南芥雄性不育株花中ASK1转录的影响 | 第62-63页 |
| 5．2．3 α-COI1、α-ASK1抗血清专一性检测 | 第63-64页 |
| 5．2．4 反义转化对拟南芥雄性不育株花中ASK1转译的影响 | 第64页 |
| 5．2．5 COI1与ASK1在植株体内形成蛋白复合体 | 第64-66页 |
| 5．3 讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 ASK1互作基因的分离 | 第68-74页 |
| 6．1 材料与方法 | 第68页 |
| 6．1．1 plexASK1重组质粒的构建 | 第68页 |
| 6．1．2 其它步骤 | 第68页 |
| 6．2 结果与分析 | 第68-72页 |
| 6．2．1 归群 | 第68-71页 |
| 6．2．2 测序与序列分析 | 第71-72页 |
| 6．3 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录1 部分ASK1互作基因核苷酸序列图 | 第84-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简历 | 第88-89页 |
| 博士在读期间主要学术成果 | 第89页 |
