一个拟植物转录因子家族的初步研究
摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 绪论 | 第14-31页 |
·植物转录因子研究进展 | 第14-22页 |
·转录因子的概念 | 第14页 |
·植物转录因子的结构 | 第14-16页 |
·植物转录因子的分类 | 第16-17页 |
·植物转录因子的功能 | 第17-20页 |
·植物转录因子研究方法 | 第20-22页 |
·生物信息学在基因组学和蛋白组学上的应用研究进展 | 第22-29页 |
·生物信息学概况 | 第22-23页 |
·生物信息学在基因组学研究中应用 | 第23-25页 |
·生物信息学在蛋白组学研究中应用 | 第25-29页 |
·本研究的意义及主要内容 | 第29-31页 |
·本研究的意义 | 第29页 |
·本研究的主要内容 | 第29-31页 |
2 材料与方法 | 第31-43页 |
·生物信息学分析方法 | 第31-32页 |
·在数据库中搜索基因相关信息 | 第31页 |
·序列分析 | 第31页 |
·基因表达谱分析 | 第31-32页 |
·编码蛋白二级结构的预测 | 第32页 |
·材料、载体、菌株、工具酶 | 第32页 |
·主要试剂及溶液的配制 | 第32-35页 |
·质粒抽提相关溶液 | 第32页 |
·植物基因组DNA提取相关溶液 | 第32-33页 |
·SDS-PAGE相关溶液 | 第33页 |
·蛋白纯化相关溶液 | 第33-34页 |
·质粒大量抽提所需试剂配制 | 第34页 |
·培养基及其他试剂 | 第34-35页 |
·主要实验方法 | 第35-43页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第35页 |
·引物设计 | 第35页 |
·PCR反应 | 第35-36页 |
·DNA凝胶回收 | 第36页 |
·表达载体的构建 | 第36-37页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·DNA片段转化感受态细胞 | 第38页 |
·质粒的小量提取 | 第38页 |
·目的基因的诱导表达 | 第38-39页 |
·表达产物的纯化 | 第39-40页 |
·质粒大量提取 | 第40-41页 |
·基因枪转化 | 第41-42页 |
·制片观察 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-73页 |
·生物信息学分析 | 第43-51页 |
·新植物转录因子家族相关信息 | 第43-46页 |
·序列分析 | 第46-48页 |
·基因表达谱 | 第48-49页 |
·编码蛋白二级结构的预测 | 第49-51页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第51-63页 |
·引物设计 | 第51-52页 |
·PCR扩增基因 | 第52-53页 |
·pGEX-4T-2原核表达载体的构建 | 第53-55页 |
·目的基因的诱导表达 | 第55-63页 |
·目的基因的真核细胞亚定位研究 | 第63-73页 |
·引物设计 | 第63-64页 |
·搭桥用片段的克隆 | 第64-65页 |
·搭桥PCR获得嵌合基因 | 第65-67页 |
·克隆载体pMD18-T的构建 | 第67-68页 |
·载体pBPF的构建 | 第68-71页 |
·亚细胞定位研究 | 第71-73页 |
4 分析与讨论 | 第73-79页 |
·生物信息学分析 | 第73-74页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第74-76页 |
·表达载体的构建 | 第74页 |
·提高原核表达蛋白的可溶性 | 第74-75页 |
·原核表达条件的优化 | 第75-76页 |
·目的基因的真核细胞亚定位研究 | 第76-78页 |
·搭桥PCR | 第76页 |
·目的基因的亚细胞定位 | 第76-78页 |
·后续研究 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87页 |