| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-29页 |
| 一、PRRS病毒病原学 | 第10-12页 |
| 二、PRRS病原特征 | 第12-19页 |
| ·PRRSV的理化特性 | 第12-13页 |
| ·发病机制及病理变化 | 第13-14页 |
| ·PRRSV的基因组结构和主要结构蛋白 | 第14-17页 |
| ·E蛋白 | 第15-16页 |
| ·M蛋白 | 第16页 |
| ·N蛋白 | 第16-17页 |
| ·PRRSV遗传性变异与基因型 | 第17-19页 |
| 三、国内外流行状况 | 第19-20页 |
| 四、GP3概述 | 第20-21页 |
| 五、PRRS疫苗研究进展 | 第21-25页 |
| ·减毒活疫苗 | 第21-22页 |
| ·灭活苗 | 第22-23页 |
| ·亚单位疫苗 | 第23页 |
| ·基因工程重组疫苗 | 第23-25页 |
| ·基因疫苗 | 第23-24页 |
| ·DNA疫苗 | 第24页 |
| ·活载体疫苗 | 第24-25页 |
| 六、PRRS病毒的防制技术 | 第25-28页 |
| ·一般措施 | 第25-26页 |
| ·疫苗接种 | 第26-27页 |
| ·使用PRRSV疫苗要注意的问题 | 第27页 |
| ·净化和扑灭措施 | 第27-28页 |
| 七、本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 材料与方法 | 第29-40页 |
| 一、材料 | 第29-34页 |
| ·PRRS病料 | 第29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·试剂及配制 | 第29-31页 |
| ·分子生物学试剂 | 第29-30页 |
| ·制备感受态细胞用试剂的配制 | 第30页 |
| ·培养基的配制 | 第30页 |
| ·质粒提取试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·分析所用的PRRSV分离株核苷酸序列 | 第32-34页 |
| 二、方法 | 第34-40页 |
| ·实验方案 | 第34-35页 |
| ·病料阳性鉴定 | 第35页 |
| ·PRRS病毒RNA的提取 | 第35页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第35-36页 |
| ·反转录(RT) | 第35-36页 |
| ·PCR | 第36页 |
| ·电泳 | 第36页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第36-37页 |
| ·制胶 | 第36页 |
| ·电泳 | 第36-37页 |
| ·凝胶块中DNA的回收 | 第37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·基因克隆 | 第38-39页 |
| ·目的基因的连接 | 第38页 |
| ·转化 | 第38页 |
| ·抽提质粒 | 第38-39页 |
| ·重组质粒酶切及PCR鉴定 | 第39页 |
| ·基因测序 | 第39页 |
| ·测序结果的处理与分析 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-57页 |
| 1.病料的采集 | 第40-41页 |
| 2.ORF3基因的扩增 | 第41-42页 |
| 3.重组质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
| 4.重组质粒PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 5.核苷酸序列测定结果 | 第43-53页 |
| 6.ORF3基因核苷酸序列和其编码氨基酸序列的同源性分析 | 第53-55页 |
| 7.遗传进化树分析 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-61页 |
| 1.PRRSV的传播途径分析 | 第57-58页 |
| 2.PRRSV ORF3基因遗传变异分析 | 第58页 |
| 3.氨基酸的变异 | 第58-59页 |
| 4.抗原表位的变异 | 第59-60页 |
| 5.糖基化位点变异 | 第60页 |
| 6.进化树与流行病学分析 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第72-73页 |
| 附录:英文缩写对照表 | 第73页 |