摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
英文缩写词表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 奶牛乳房炎的危害 | 第12页 |
2 奶牛乳房炎类型和临床症状 | 第12页 |
3 奶牛乳房炎的病因 | 第12-13页 |
4 奶牛乳房炎的防治 | 第13-16页 |
·创造良好的饲养环境及挤奶卫生 | 第13-14页 |
·奶牛乳房炎的药物治疗 | 第14页 |
·乳房炎疫苗研究 | 第14-16页 |
参考文献 | 第16-20页 |
第二章 实验研究 | 第20-67页 |
实验一 无乳链球菌和乳房链球菌的分离鉴定 | 第20-25页 |
1 材料与方法 | 第20-21页 |
·材料 | 第20页 |
·方法 | 第20-21页 |
2 结果 | 第21-23页 |
·初步的分离鉴定 | 第21-22页 |
·VITEK32型全自动细菌鉴定仪鉴定 | 第22-23页 |
3 讨论 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-25页 |
实验二 停乳链球菌MIG基因的克隆和原核表达 | 第25-38页 |
1 材料和方法 | 第25-32页 |
·实验材料 | 第25页 |
·停乳链球菌基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
·引物设计与基因片段的PCR扩增 | 第26页 |
·目的基因的克隆 | 第26-28页 |
·原核表达载体的构建和测序 | 第28-29页 |
·重组质粒pET-32a-MIG转入大肠杆菌表达菌 | 第29-30页 |
·SDS—聚丙酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
·Western blot实验 | 第31-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·目的基因PCR扩增 | 第32页 |
·重组质粒鉴定 | 第32-33页 |
·测序结果 | 第33页 |
·重组质粒在BL21(DE3)中表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第33页 |
·Western blot检测 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-38页 |
实验三 无乳链球菌SIP基因的克隆和原核表达 | 第38-50页 |
1 材料和方法 | 第38-45页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·无乳链球菌基因组DNA的提取 | 第39页 |
·引物设计与基因片段的PCR扩增 | 第39-40页 |
·目的基因的克隆 | 第40-41页 |
·原核表达载体的构建和测序 | 第41-42页 |
·熏组质粒pET-32a-MIG转入大肠杆菌表达菌 | 第42-43页 |
·SDS—聚丙酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
·Western blot实验 | 第44-45页 |
2 结果 | 第45-47页 |
·目的基因PCR扩增 | 第45页 |
·重组质粒鉴定 | 第45-46页 |
·测序结果 | 第46页 |
·重组质粒在BL21(DE3)中表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第46页 |
·Western blot检测 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
实验四 无乳链球菌/停乳链球菌/乳房链球菌GAPC基因韵克隆和原核表达 | 第50-67页 |
1 材料和方法 | 第50-57页 |
·实验材料 | 第50页 |
·无乳链球菌/停乳链球菌/乳房链球菌基因组DNA的提取 | 第50-51页 |
·引物设计与基因片段的PCR扩增 | 第51页 |
·目的基因的克隆 | 第51-53页 |
·原核表达载体的构建和测序 | 第53-54页 |
·重组质粒pET-32a-MIG转入大肠杆菌表达菌 | 第54页 |
·SDS—聚丙酰胺凝胶电泳 | 第54-55页 |
·Western blot实验 | 第55-57页 |
2 结果 | 第57-63页 |
·目的基因PCR扩增 | 第57页 |
·重组质粒鉴定 | 第57-59页 |
·测序结果 | 第59-60页 |
·无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌GAPC测序结果比对 | 第60页 |
·重组质粒在BL21(DE3)中表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第60-61页 |
·Western blot检测 | 第61-63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录 | 第69-98页 |
作者简介 | 第98-99页 |
导师评阅表 | 第99页 |