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ERAF17基因在黄瓜雌花分化中的作用

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
引言第8-13页
   ·植物性别决定机制第8页
   ·黄瓜性别决定机制的研究进展第8-9页
     ·黄瓜性别的发育第8页
     ·黄瓜性别决定基因第8页
     ·激素和环境对黄瓜性别的影响第8页
     ·乙烯的生理作用第8页
     ·乙烯对植物性别的作用第8-9页
   ·被子植物中MADS-box基因家族的结构和功能第9页
     ·MADS-box基因的结构第9页
     ·MADS-box的名称第9页
     ·植物花发育的ABC模型第9页
   ·黄瓜性别决定基因 ERAF17 的发现和分离第9-10页
   ·RNA沉默技术在植物基因功能研究上的应用第10页
   ·植物转化在植物基因功能研究上的应用第10页
   ·黄瓜转化技术第10-11页
   ·原核表达技术的发展和应用第11-13页
材料与方法第13-24页
   ·ERAF17 基因cDNA全序列第13页
   ·转化用pMBW30 载体图谱第13-14页
   ·黄瓜品种第14页
   ·提取RNA钓取ERAF17 目的基因第14-16页
     ·RNA提取的处理第14页
     ·RNA提取步骤(trizol法)第14-15页
     ·RT-PCR反应体系第15页
     ·RT-PCR反应程序第15-16页
   ·过表达和沉默载体的构建第16-19页
     ·过表达载体的构建第16-18页
     ·发卡结构沉默载体的构建第18-19页
   ·黄瓜的组织培养和转化第19-20页
     ·农杆菌的准备第19页
     ·黄瓜的再生和转化过程第19-20页
   ·转基因植株的检测第20-21页
     ·表达植株DNA水平鉴定第20-21页
     ·转化植株的PCR检测第21页
     ·转化植株的RNA水平鉴定第21页
   ·原核表达和抗体制备第21-24页
     ·蛋白表达第21页
     ·免疫小鼠第21-22页
     ·ELISA第22页
     ·Wstern Blot 步骤第22-24页
结果第24-30页
   ·ERAF17 的基因钓取和构建载体的鉴定第24-25页
   ·黄瓜转化过程和结果第25页
   ·转化植株在DNA水平上的鉴定第25-26页
   ·转化植株在RNA水平的鉴定第26-27页
   ·转化植株的表型变化第27-28页
   ·ERAF17 蛋白原核表达及多克隆抗体制备第28-30页
讨论第30-32页
   ·黄瓜遗传转化过程分析第30页
   ·利用过表达策略分析ERAF17 基因的功能第30页
   ·利用基因沉默策略分析ERAF17 基因的功能第30-31页
   ·ERAF17 蛋白的原核表达和抗体制备第31页
   ·总结和展望第31-32页
结论第32-33页
参考文献第33-36页
致谢第36页

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