ERAF17基因在黄瓜雌花分化中的作用
中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
引言 | 第8-13页 |
·植物性别决定机制 | 第8页 |
·黄瓜性别决定机制的研究进展 | 第8-9页 |
·黄瓜性别的发育 | 第8页 |
·黄瓜性别决定基因 | 第8页 |
·激素和环境对黄瓜性别的影响 | 第8页 |
·乙烯的生理作用 | 第8页 |
·乙烯对植物性别的作用 | 第8-9页 |
·被子植物中MADS-box基因家族的结构和功能 | 第9页 |
·MADS-box基因的结构 | 第9页 |
·MADS-box的名称 | 第9页 |
·植物花发育的ABC模型 | 第9页 |
·黄瓜性别决定基因 ERAF17 的发现和分离 | 第9-10页 |
·RNA沉默技术在植物基因功能研究上的应用 | 第10页 |
·植物转化在植物基因功能研究上的应用 | 第10页 |
·黄瓜转化技术 | 第10-11页 |
·原核表达技术的发展和应用 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-24页 |
·ERAF17 基因cDNA全序列 | 第13页 |
·转化用pMBW30 载体图谱 | 第13-14页 |
·黄瓜品种 | 第14页 |
·提取RNA钓取ERAF17 目的基因 | 第14-16页 |
·RNA提取的处理 | 第14页 |
·RNA提取步骤(trizol法) | 第14-15页 |
·RT-PCR反应体系 | 第15页 |
·RT-PCR反应程序 | 第15-16页 |
·过表达和沉默载体的构建 | 第16-19页 |
·过表达载体的构建 | 第16-18页 |
·发卡结构沉默载体的构建 | 第18-19页 |
·黄瓜的组织培养和转化 | 第19-20页 |
·农杆菌的准备 | 第19页 |
·黄瓜的再生和转化过程 | 第19-20页 |
·转基因植株的检测 | 第20-21页 |
·表达植株DNA水平鉴定 | 第20-21页 |
·转化植株的PCR检测 | 第21页 |
·转化植株的RNA水平鉴定 | 第21页 |
·原核表达和抗体制备 | 第21-24页 |
·蛋白表达 | 第21页 |
·免疫小鼠 | 第21-22页 |
·ELISA | 第22页 |
·Wstern Blot 步骤 | 第22-24页 |
结果 | 第24-30页 |
·ERAF17 的基因钓取和构建载体的鉴定 | 第24-25页 |
·黄瓜转化过程和结果 | 第25页 |
·转化植株在DNA水平上的鉴定 | 第25-26页 |
·转化植株在RNA水平的鉴定 | 第26-27页 |
·转化植株的表型变化 | 第27-28页 |
·ERAF17 蛋白原核表达及多克隆抗体制备 | 第28-30页 |
讨论 | 第30-32页 |
·黄瓜遗传转化过程分析 | 第30页 |
·利用过表达策略分析ERAF17 基因的功能 | 第30页 |
·利用基因沉默策略分析ERAF17 基因的功能 | 第30-31页 |
·ERAF17 蛋白的原核表达和抗体制备 | 第31页 |
·总结和展望 | 第31-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
致谢 | 第36页 |