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玉米C型细胞质雄性不育系及其保持系花药SSH文库构建

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1. 文献综述第10-27页
   ·植物雄性不育研究第10-21页
     ·雄性不育的概念和意义第10-11页
     ·雄性不育的分类第11页
     ·玉米细胞质雄性不育第11-19页
       ·玉米细胞质雄性不育的分类第11-12页
       ·玉米细胞质雄性不育细胞学研究第12-15页
         ·T型细胞质雄性不育的细胞学第12页
         ·S型细胞质雄性不育的细胞学第12-13页
         ·C型细胞质雄性不育的细胞学第13-15页
       ·玉米细胞质雄性不育的分子生物学研究第15-19页
       ·玉米CMS-C核基因的遗传第19页
     ·细胞质雄性不育败育机理的相关研究第19-20页
     ·花粉发育相关基因的克隆及其表达第20-21页
   ·抑制消减杂交(SSH)技术第21-25页
     ·抑制消减杂交(SSH)技术发展史第21-22页
     ·SSH技术原理第22-24页
     ·SSH的优缺点第24-25页
     ·SSH与基因表达谱第25页
   ·研究目的与意义第25-27页
2. 材料与方法第27-38页
   ·实验材料第27页
   ·实验方法第27-38页
     ·花药总RNA的提取及mRNA的分离第27-29页
       ·总RNA的提取第27页
       ·mRNA的分离第27-29页
     ·SSH文库的构建第29-37页
       ·cDNA第一链的合成第29页
       ·cDNA第二链的合成第29-30页
       ·Ras Ⅰ消化第30-31页
       ·第一次杂交第31页
       ·第二次杂交第31-32页
       ·第一次PCR扩增第32-33页
       ·第二次PCR扩增第33页
       ·PCR产物的回收第33-34页
       ·感受态细胞制备第34页
       ·差减文库的构建第34-35页
       ·文库插入片段的检测第35页
       ·SSH文库的筛选第35-37页
         ·探针标记第35-36页
         ·文库高密度点阵膜的制备第36页
         ·杂交第36-37页
     ·克隆产物测序及序列比对第37-38页
3. 结果与分析第38-46页
   ·花药总RNA的提取及检测第38-39页
   ·mRNA的纯化及检测第39页
   ·抑制消减杂交结果及分析第39-40页
   ·抑制消减杂交文库的构建第40页
   ·文库插入片段的检测第40-41页
   ·斑点印迹杂交筛选第41-42页
   ·阳性克隆测序第42-44页
   ·部分序列分析第44-46页
     ·C2-G2片段核酸序列及同源性分析第44-45页
     ·N3-E1片段核酸序列及同源性分析第45-46页
4. 讨论第46-50页
   ·关于花药发育与RNA含量关系第46页
   ·文库构建中的影响因素分析第46页
   ·关于斑点印迹杂交筛选法的应用第46-48页
   ·CMS-C不育相关基因分析第48-49页
     ·信号转导与细胞质雄性不育第48页
     ·细胞凋亡与细胞质雄性不育第48-49页
     ·物质代谢与细胞质雄性不育第49页
   ·拟进一步开展的工作第49-50页
5. 参考文献第50-56页
致谢第56页

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