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海洋弧菌QY103褐藻胶裂解酶的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
一 文献综述第16-44页
 1 褐藻胶第16-36页
   ·褐藻胶的来源第16页
   ·褐藻胶的结构第16-18页
   ·褐藻胶的应用第18-20页
     ·褐藻胶在食品行业中的应用第18页
     ·褐藻胶在医药行业中的应用第18-19页
     ·褐藻胶在农业中的应用第19页
     ·褐藻胶在工业中的应用第19页
     ·褐藻胶在其他方面的应用第19-20页
   ·褐藻胶寡糖的应用第20-22页
     ·褐藻胶寡糖在医药行业中的应用第20-22页
     ·褐藻胶寡糖在食品行业中的应用第22页
     ·褐藻胶寡糖在农业中的应用第22页
   ·细菌褐藻胶的生物合成第22-30页
     ·细菌中褐藻胶生物合成的机制第22-28页
     ·细菌中褐藻胶生物合成的调控第28-30页
   ·褐藻胶在P. aeruginosa 中的生物学功能第30-36页
     ·细菌生物膜的定义第31-32页
     ·细菌生物膜的形成第32-33页
     ·褐藻胶在 P. aeruginosa 中的生物学功能第33-36页
 2 褐藻胶裂解酶第36-44页
   ·褐藻胶裂解酶的来源第36-37页
   ·褐藻胶裂解酶的作用机制第37-38页
   ·褐藻胶裂解酶的分类第38-39页
   ·褐藻胶裂解酶的性质第39-40页
   ·褐藻胶裂解酶的生物学功能第40-41页
     ·褐藻胶裂解酶在不产生褐藻胶的生物中的作用第40页
     ·褐藻胶裂解酶在产生褐藻胶的细菌中的作用第40-41页
   ·褐藻胶裂解酶的应用第41-44页
     ·用于制备褐藻胶寡糖第41-42页
     ·用于防治 P. aeruginosa 感染第42页
     ·用于制备褐藻原生质体第42-43页
     ·用于分析褐藻胶的结构和制备结构特异的褐藻胶第43-44页
二 海洋弧菌 QY103 的筛选与鉴定第44-55页
 1 材料与方法第44-48页
   ·菌株与培养基第44-45页
     ·分离培养基第45页
     ·Zobell 2216E 培养基第45页
     ·TCBS 培养基第45页
     ·Luria-Bertani(LB)培养基第45页
   ·试剂第45页
   ·仪器第45页
   ·褐藻胶裂解酶产生菌株的筛选第45-46页
     ·富集培养第45-46页
     ·初筛第46页
     ·复筛第46页
   ·乙酰化褐藻胶的制备第46页
   ·褐藻胶裂解酶活性测定方法第46-47页
   ·形态观察与生理生化实验第47页
   ·16S rDNA 的克隆与菌株分子系统学鉴定第47-48页
     ·基因组 DNA 的提取第47页
     ·16S rRNA 基因的克隆与序列测定第47-48页
     ·数据分析第48页
 2 结果第48-52页
   ·筛选结果第48页
   ·形态特征第48-49页
   ·生长条件第49页
   ·生理生化特征第49-50页
   ·16S rRNA 基因序列分析和分子系统学鉴定第50-52页
 3 讨论第52-54页
 4 小结第54-55页
三 褐藻胶裂解酶产生菌 Vibrio sp. QY103 的发酵条件优化第55-67页
 1 材料与方法第55-56页
   ·菌株与培养基第55页
   ·试剂第55页
   ·仪器第55页
   ·粗酶的制备第55-56页
   ·褐藻胶裂解酶活性测定方法第56页
 2 结果第56-64页
   ·碳源对产酶的影响第56-57页
   ·氮源对产酶的影响第57-59页
   ·无机盐对产酶的影响第59-61页
     ·NaCl 浓度对产酶的影响第59页
     ·Mg~(2+)浓度对产酶的影响第59-60页
     ·Fe~(2+)浓度对产酶的影响第60-61页
   ·初始pH 对产酶的影响第61页
   ·接种量对产酶的影响第61-62页
   ·培养温度对产酶的影响第62-63页
   ·转速对产酶的影响第63页
   ·优化前后产酶的比较第63-64页
 3 讨论第64-66页
 4 小结第66-67页
四 Vibrio sp. QY103 褐藻胶裂解酶 AlyVII 的分离纯化与性质研究第67-82页
 1 材料与方法第67-72页
   ·菌株与培养基第67页
     ·发酵培养基第67页
     ·Luria-Bertani(LB)培养基第67页
   ·试剂第67-68页
   ·仪器第68页
   ·粗酶的制备第68页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的分离纯化第68-69页
     ·硫酸铵分级沉淀第68-69页
     ·离子交换层析第69页
     ·凝胶过滤层析第69页
   ·褐藻胶裂解酶活性测定方法第69页
   ·蛋白质含量测定方法第69页
   ·SDS-PAGE第69-70页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的性质分析第70-71页
     ·温度对酶AlyVII 的影响第70页
     ·pH 对酶AlyVII 的影响第70页
     ·金属离子、EDTA、SDS 对酶AlyVII 的影响第70页
     ·酶AlyVII 的底物特异性第70-71页
   ·乙酰化褐藻胶的制备第71页
   ·糖醛酸含量的咔唑(Carbazole)法测定第71页
   ·褐藻胶乙酰化程度的测定第71-72页
 2 结果第72-79页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的分离纯化第72-75页
     ·硫酸铵分级沉淀第72页
     ·离子交换层析第72-73页
     ·凝胶过滤层析第73-75页
     ·SDS-PAGE第75页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的性质分析第75-79页
     ·温度对酶AlyVII 的影响第75-76页
     ·pH 对酶AlyVII 的影响第76-78页
     ·金属离子、EDTA、SDS 对酶AlyVII 的影响第78-79页
     ·酶AlyVII 的底物特异性第79页
 3 讨论第79-80页
 4 小结第80-82页
五 褐藻胶裂解酶 AlyVII 抗铜绿假单胞菌生物膜作用的研究第82-99页
 1 材料与方法第82-89页
   ·菌株与培养基第82-83页
     ·发酵培养基第83页
     ·Luria-Bertani(LB)培养基第83页
   ·试剂第83页
   ·仪器第83-84页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的制备第84页
   ·褐藻胶裂解酶活性测定方法第84页
   ·蛋白质含量测定方法第84页
   ·铜绿假单胞菌生物膜静态模型――96 孔板模型第84-85页
   ·铜绿假单胞菌生物膜动态模型――Flow cell 模型第85-87页
     ·质粒pMRP9-1 的提取第85-86页
     ·菌株P. aeruginosa CS1-pMRP9-1 的构建第86-87页
     ·Flow cell 实验第87页
   ·抗生素的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度的测定第87-88页
   ·抗生素的最低生物膜消除浓度的测定第88-89页
   ·褐藻胶裂解酶 AlyVII 对铜绿假单胞菌生长的影响第89页
 2 结果第89-96页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 的制备第89页
   ·菌株 P. aeruginosa CS1-pMRP9-1 的构建第89-90页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 对生物膜形成的抑制作用第90-92页
     ·96 孔板模型第90-91页
     ·Flow cell 模型第91-92页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 对已形成的生物膜的清除作用第92-94页
     ·96 孔板模型第92-93页
     ·Flow cell 模型第93-94页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 对抗生素杀灭生物膜内细菌的增强作用第94-95页
   ·褐藻胶裂解酶AlyVII 对铜绿假单胞菌生长的影响第95-96页
 3 讨论第96-98页
 4 小结第98-99页
总结与展望第99-101页
参考文献第101-123页
致谢第123-124页
个人简历第124-126页

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