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谷氨酸棒杆菌分枝菌酸的提取、纯化及结构分析

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 引言第7-15页
   ·谷氨酸棒杆菌细胞壁结构第7-8页
   ·细胞壁对氨基酸分泌的影响第8页
     ·细胞膜与氨基酸分泌第8页
     ·分枝菌酸与氨基酸分泌第8页
     ·细胞壁对细胞物理行为的重要性第8页
   ·分枝菌酸的结构及合成过程第8-12页
     ·分枝菌酸的结构第9-10页
     ·分枝菌酸的合成过程第10-12页
   ·分枝菌酸的分离纯化方法和结构分析方法第12-13页
     ·薄层层析色谱(TLC)的原理与应用第12页
     ·ESI/Q-TOF 质谱仪的原理与应用第12-13页
   ·立题背景与意义第13页
   ·课题研究内容和研究目标第13-15页
第二章 实验材料与方法第15-22页
   ·实验材料第15-17页
     ·菌株及引物第15页
     ·培养基及用途第15页
     ·主要仪器第15页
     ·主要试剂第15-17页
   ·分子生物学基础实验操作第17-18页
     ·基因组的提取第17页
     ·50 μl PCR 反应体系第17页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳第17-18页
     ·PCR 产物的纯化回收第18页
   ·谷氨酸棒杆菌中分枝菌酸的提取第18-19页
     ·谷氨酸棒杆菌中总分枝菌酸的提取第18-19页
     ·谷氨酸棒杆菌中游离态分枝菌酸和结合态分枝菌酸的提取方法第19页
   ·分枝菌酸薄层层析检测条件优化第19-20页
     ·展层剂的选择第19页
     ·上样量的选择第19-20页
     ·展层次数的选择第20页
     ·显色剂的选择第20页
   ·分枝菌酸ESI/MS 检测第20页
   ·分枝菌酸与脂肪酸的DEAE 分离第20页
   ·考察不同温度下分枝菌酸的结构变化第20-21页
   ·考察添加异烟肼对分枝菌酸的影响第21页
   ·分枝菌酸合成的关键基因pks, pccB, fadD32 测序第21页
   ·考察不同培养时间下分枝菌酸的结构变化第21-22页
第三章 结果与讨论第22-42页
   ·分枝菌酸的薄层层析检测第22-25页
     ·展层剂的确定第22-23页
     ·上样量的确定第23页
     ·展层次数的确定第23-24页
     ·显色剂的确定第24-25页
     ·五种菌株的TLC 检测结果第25页
   ·五种菌株分枝菌酸的ESI/MS 分析第25-31页
     ·纯化的分枝菌酸ESI/MS 结果第25-29页
     ·分枝菌酸的ESI/MS/MS 检测分析第29-31页
   ·游离态分枝菌酸与结合态分枝菌酸的分析结果第31-33页
   ·不同因素对分枝菌酸结构的影响第33-40页
     ·不同温度下分枝菌酸的结构变化第33-35页
     ·不同培养时间的分枝菌酸结构变化第35-36页
     ·添加INH 时分枝菌酸的结构变化第36-40页
   ·分枝菌酸与脂肪酸的DEAE 分离第40-42页
第四章 结论和展望第42-44页
   ·结论第42页
   ·展望第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-51页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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