摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 引言 | 第7-15页 |
·谷氨酸棒杆菌细胞壁结构 | 第7-8页 |
·细胞壁对氨基酸分泌的影响 | 第8页 |
·细胞膜与氨基酸分泌 | 第8页 |
·分枝菌酸与氨基酸分泌 | 第8页 |
·细胞壁对细胞物理行为的重要性 | 第8页 |
·分枝菌酸的结构及合成过程 | 第8-12页 |
·分枝菌酸的结构 | 第9-10页 |
·分枝菌酸的合成过程 | 第10-12页 |
·分枝菌酸的分离纯化方法和结构分析方法 | 第12-13页 |
·薄层层析色谱(TLC)的原理与应用 | 第12页 |
·ESI/Q-TOF 质谱仪的原理与应用 | 第12-13页 |
·立题背景与意义 | 第13页 |
·课题研究内容和研究目标 | 第13-15页 |
第二章 实验材料与方法 | 第15-22页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·菌株及引物 | 第15页 |
·培养基及用途 | 第15页 |
·主要仪器 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-17页 |
·分子生物学基础实验操作 | 第17-18页 |
·基因组的提取 | 第17页 |
·50 μl PCR 反应体系 | 第17页 |
·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第17-18页 |
·PCR 产物的纯化回收 | 第18页 |
·谷氨酸棒杆菌中分枝菌酸的提取 | 第18-19页 |
·谷氨酸棒杆菌中总分枝菌酸的提取 | 第18-19页 |
·谷氨酸棒杆菌中游离态分枝菌酸和结合态分枝菌酸的提取方法 | 第19页 |
·分枝菌酸薄层层析检测条件优化 | 第19-20页 |
·展层剂的选择 | 第19页 |
·上样量的选择 | 第19-20页 |
·展层次数的选择 | 第20页 |
·显色剂的选择 | 第20页 |
·分枝菌酸ESI/MS 检测 | 第20页 |
·分枝菌酸与脂肪酸的DEAE 分离 | 第20页 |
·考察不同温度下分枝菌酸的结构变化 | 第20-21页 |
·考察添加异烟肼对分枝菌酸的影响 | 第21页 |
·分枝菌酸合成的关键基因pks, pccB, fadD32 测序 | 第21页 |
·考察不同培养时间下分枝菌酸的结构变化 | 第21-22页 |
第三章 结果与讨论 | 第22-42页 |
·分枝菌酸的薄层层析检测 | 第22-25页 |
·展层剂的确定 | 第22-23页 |
·上样量的确定 | 第23页 |
·展层次数的确定 | 第23-24页 |
·显色剂的确定 | 第24-25页 |
·五种菌株的TLC 检测结果 | 第25页 |
·五种菌株分枝菌酸的ESI/MS 分析 | 第25-31页 |
·纯化的分枝菌酸ESI/MS 结果 | 第25-29页 |
·分枝菌酸的ESI/MS/MS 检测分析 | 第29-31页 |
·游离态分枝菌酸与结合态分枝菌酸的分析结果 | 第31-33页 |
·不同因素对分枝菌酸结构的影响 | 第33-40页 |
·不同温度下分枝菌酸的结构变化 | 第33-35页 |
·不同培养时间的分枝菌酸结构变化 | 第35-36页 |
·添加INH 时分枝菌酸的结构变化 | 第36-40页 |
·分枝菌酸与脂肪酸的DEAE 分离 | 第40-42页 |
第四章 结论和展望 | 第42-44页 |
·结论 | 第42页 |
·展望 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |