抗水貂肠炎细小病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 水貂肠炎细小病毒概述 | 第13-25页 |
| ·病原学研究 | 第13-14页 |
| ·MEV的分类地位 | 第13页 |
| ·MEV的形态学特征与理化特性 | 第13-14页 |
| ·MEV的培养特性 | 第14页 |
| ·MEV的分子生物学特征 | 第14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·临床症状 | 第15页 |
| ·病理变化 | 第15-16页 |
| ·MEV的细胞受体 | 第16页 |
| ·诊断 | 第16-20页 |
| ·电镜与免疫电镜检查 | 第16-17页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第17页 |
| ·动物接种试验 | 第17页 |
| ·血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验 | 第17页 |
| ·琼脂扩散试验(AGP) | 第17-18页 |
| ·荧光抗体染色技术 | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第18页 |
| ·微量中和试验(SN) | 第18页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第18-19页 |
| ·对流免疫电泳(CIEP) | 第19页 |
| ·核酸杂交检测技术 | 第19页 |
| ·基因组的限制性内切酶图谱 | 第19-20页 |
| ·其他检测方法 | 第20页 |
| ·免疫预防 | 第20-24页 |
| ·常规疫苗 | 第20-22页 |
| ·新型疫苗 | 第22-24页 |
| ·本研究的背景与目的 | 第24-25页 |
| 第二章 单克隆抗体在MEV上的应用 | 第25-29页 |
| ·单克隆抗体概述 | 第25-26页 |
| ·用于MEV抗原结构分析 | 第26页 |
| ·用于MEV抗原的检测 | 第26-27页 |
| ·用于MEV抗原变异的研究 | 第27-28页 |
| ·用于MEV抗原的分类 | 第28-29页 |
| 第三章 水貂肠炎细小病毒单克隆抗体的制备 | 第29-48页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·种毒与抗原 | 第29页 |
| ·动物与细胞系 | 第29-30页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-39页 |
| ·免疫原的制备及纯化 | 第30-31页 |
| ·动物免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第31-32页 |
| ·血清效价的测定 | 第32页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第32-36页 |
| ·单克隆抗体的纯化(辛酸-硫酸铵沉淀法) | 第36页 |
| ·McAb鉴定 | 第36-39页 |
| ·结果 | 第39-47页 |
| ·抗原的纯化 | 第39页 |
| ·病毒抗原血凝效价测定 | 第39页 |
| ·ELISA筛选方法的建立 | 第39-40页 |
| ·动物免疫水平效价的检测 | 第40页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第40-41页 |
| ·McAb鉴定 | 第41-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第48-57页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·病毒与实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第49页 |
| ·抗血清的制备及纯化 | 第49页 |
| ·标准抗原的制备 | 第49页 |
| ·夹心ELISA试验步骤 | 第49页 |
| ·夹心ELISA方法的建立(多抗-抗原-单抗) | 第49-50页 |
| ·夹心ELISA方法的建立(单抗-抗原-多抗) | 第50页 |
| ·夹心ELISA检测条件的优化 | 第50-51页 |
| ·ELISA的判定标准 | 第51页 |
| ·夹心ELISA方法性能评价 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-55页 |
| ·F5 McAb、抗血清及标准抗原的制备 | 第51-52页 |
| ·夹心ELISA方法的建立(多抗-抗原-单抗) | 第52页 |
| ·夹心ELISA方法的建立(单抗-抗原-多抗) | 第52页 |
| ·夹心ELISA检测条件的优化 | 第52-54页 |
| ·ELlSA的判定标准 | 第54页 |
| ·夹心ELISA方法性能评价 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
