| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-17页 |
| 1. 猪细小病毒与细胞相互作用的研究进展 | 第12-15页 |
| 2. 抑制性消减杂交技术原理及应用 | 第15-16页 |
| ·抑制性消减杂交技术原理 | 第15页 |
| ·SSH技术的应用 | 第15-16页 |
| 3. 本实验的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 ST细胞感染 PPV后差异转录基因文库的构建和分析 | 第17-31页 |
| 1. 材料 | 第17页 |
| ·细胞和病毒 | 第17页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-22页 |
| ·PPV病毒在ST细胞上的扩增培养和一步生长曲线的确定 | 第17-18页 |
| ·ST健康细胞和感染PPV细胞总RNA的提取 | 第18页 |
| ·抑制性消减杂交过程 | 第18-21页 |
| ·差异转录基因的克隆 | 第21页 |
| ·消减文库的构建和阳性重组质粒的鉴定 | 第21页 |
| ·斑点杂交技术对消减效率检测和分析 | 第21-22页 |
| ·差异转录基因测序及序列分析 | 第22页 |
| 3. 结果 | 第22-28页 |
| ·PPV BQ株的扩增培养和一步生长曲线的确定 | 第22页 |
| ·mRNA收获时间的确定和收获浓度 | 第22-23页 |
| ·消减文库的构建 | 第23-26页 |
| ·消减杂交效率检测结果 | 第26-27页 |
| ·序列测定和 BLAST分析 | 第27-28页 |
| 4. 讨论 | 第28-31页 |
| 第三章 ST细胞感染PPV后差异转录基因的定量分析 | 第31-43页 |
| 1. 材料 | 第31页 |
| ·细胞、病毒和重组质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| 2. 方法 | 第31-33页 |
| ·引物的设计与合成 | 第31-32页 |
| ·标准阳性模板的制备 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR方法的构建和条件优化 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR方法标准曲线的建立 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR方法敏感性实验 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR方法特异性实验 | 第32-33页 |
| ·实时荧光定量PCR方法重复性实验 | 第33页 |
| ·实时荧光定量PCR方法对差异基因在细胞生长周期中的检测 | 第33页 |
| 3. 结果 | 第33-40页 |
| ·实时荧光定量PCR方法的构建和反应条件的优化 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量PCR方法标准曲线的建立 | 第34-36页 |
| ·实时荧光定量PCR方法敏感性试验结果 | 第36页 |
| ·实时荧光定量PCR方法特异性实验结果 | 第36-37页 |
| ·实时荧光定量PCR方法重复性实验结果 | 第37-38页 |
| ·差异基因在细胞生长周期中的定量检测结果 | 第38-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-43页 |
| 第四章 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
