| 摘要 | 第1-8页 |
| Summary | 第8-23页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 第一部分 文献综述 牛卵母细胞体外成熟对胚胎发育的影响和作用 | 第24-38页 |
| 1 卵母细胞体外成熟的机理 | 第24-27页 |
| ·卵母细胞的发育 | 第24-25页 |
| ·卵母细胞成熟的分子机制 | 第25-27页 |
| 2 卵母细胞的获取和分级 | 第27-28页 |
| ·超数排卵采集 | 第27页 |
| ·活体卵巢上采集 | 第27页 |
| ·屠宰卵巢上采集 | 第27-28页 |
| ·卵母细胞的分级 | 第28页 |
| 3 卵母细胞成熟的特征 | 第28-30页 |
| ·GVBD | 第29页 |
| ·染色体凝集 | 第29页 |
| ·纺锤体形成 | 第29页 |
| ·极体排出 | 第29页 |
| ·透明带软化 | 第29页 |
| ·卵丘细胞扩展 | 第29-30页 |
| 4 卵母细胞成熟的判断 | 第30页 |
| 5 卵母细胞体外成熟的影响因素 | 第30-34页 |
| ·动物年龄 | 第30-31页 |
| ·卵巢所处阶段 | 第31页 |
| ·获取卵母细胞的卵泡大小 | 第31页 |
| ·卵巢的保存温度与运输 | 第31-32页 |
| ·成熟培养条件 | 第32页 |
| ·其他因素的影响 | 第32-34页 |
| 6 卵母细胞体外成熟在发育过程中的作用 | 第34-36页 |
| 7 卵母细胞体外成熟存在问题和展望 | 第36页 |
| ·存在问题 | 第36页 |
| ·展望 | 第36页 |
| 8 本课题研究的目的意义 | 第36-38页 |
| 第二部分 实验部分 | 第38-80页 |
| 第一章 牛卵母细胞经亮甲酚蓝选择后发育能力的研究 | 第38-53页 |
| ·试验材料 | 第39-42页 |
| ·主要仪器及器具 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40-42页 |
| ·试验方法与设计 | 第42-44页 |
| ·卵巢的采集 | 第42页 |
| ·卵母细胞的采集 | 第42页 |
| ·亮甲酚蓝染色 | 第42页 |
| ·卵母细胞的成熟培养 | 第42页 |
| ·卵母细胞的成熟鉴定 | 第42页 |
| ·卵母细胞中谷胱甘肽的检测 | 第42-43页 |
| ·卵母细胞体外受精 | 第43页 |
| ·囊胚的细胞计数 | 第43页 |
| ·卵母细胞凋亡的检测 | 第43-44页 |
| ·试验设计 | 第44页 |
| ·数据分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·不同浓度BCB 染色对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第44-47页 |
| ·卵母细胞成熟前后谷胱甘肽的浓度 | 第47页 |
| ·BCB 染色对牛卵母细胞体外受精的影响 | 第47-49页 |
| ·BCB 染色对牛卵母细胞IVM-IVF 凋亡（率）的影响 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第二章 EGF、β-ME 及 HTAU 对牛卵母细胞IVM-IVF效果的影响 | 第53-70页 |
| ·试验材料 | 第53-54页 |
| ·主要仪器及器具 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·试剂的配制 | 第53-54页 |
| ·试验方法与设计 | 第54-58页 |
| ·卵巢的采集 | 第54页 |
| ·卵母细胞的采集 | 第54页 |
| ·卵母细胞的成熟培养 | 第54页 |
| ·卵母细胞的成熟鉴定 | 第54页 |
| ·成熟卵母细胞的孤雌激活及培养 | 第54页 |
| ·卵母细胞的FDA 染色 | 第54-55页 |
| ·囊胚细胞染色计数 | 第55-56页 |
| ·试验设计 | 第56-58页 |
| ·统计分析 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-66页 |
| ·不同化学激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第58-60页 |
| ·不同浓度的EGF 对牛卵母细胞体外成熟及激活后卵裂的影响 | 第60-61页 |
| ·不同浓度的β-ME 对牛卵母细胞体外成熟及激活后卵裂的影响 | 第61-62页 |
| ·50 ng/mL EGF 、100 μmol/L β-ME 组合对牛卵母细胞体外成熟及激活后卵裂的影响 | 第62页 |
| ·不同浓度EGF 对早期胚胎体外发育的影响 | 第62-63页 |
| ·不同浓度β-巯基乙醇对早期胚胎体外发育的影响 | 第63-64页 |
| ·不同浓度HTAU对不同浓度β-ME成熟液处理的牛早期胚胎体外发育影响 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·不同化学激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第66-67页 |
| ·EGF 对牛卵母细胞体外成熟及激活后卵裂的影响 | 第67-68页 |
| ·β-巯基乙醇对牛卵母细胞体外成熟及激活后卵裂的影响 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第三章 BCB 染色对牛核移植胚胎发育的影响 | 第70-80页 |
| ·试验材料 | 第70-71页 |
| ·主要仪器及器具 | 第70-71页 |
| ·主要试剂 | 第71页 |
| ·试剂的配制 | 第71页 |
| ·试验方法与设计 | 第71-73页 |
| ·卵巢和卵母细胞的采集 | 第71页 |
| ·亮甲酚蓝染色 | 第71页 |
| ·卵母细胞的成熟培养 | 第71-72页 |
| ·供体细胞（牛冻存成纤维细胞）的制备 | 第72页 |
| ·核移植 | 第72页 |
| ·核移植胚的激活及培养 | 第72页 |
| ·囊胚细胞染色计数 | 第72页 |
| ·胚胎的FDA 染色 | 第72-73页 |
| ·试验设计 | 第73页 |
| ·统计分析 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-77页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟、核移植及重构胚发育 | 第73-75页 |
| ·BCB 染色及优化体系对牛核移植胚胎的影响 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 作者简介 | 第90-91页 |
| 导师简介 | 第91页 |
