| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 妊娠结合糖蛋白 | 第11-13页 |
| ·PAG 的发现 | 第11页 |
| ·PAG 的分子结构和作用机制 | 第11-12页 |
| ·PAG 的研究现状 | 第12-13页 |
| 2. 半定量PCR | 第13页 |
| 3. MRNA 差异显示技术的原理与方法 | 第13-17页 |
| ·mRNA 差异显示技术的原理与优点 | 第13-14页 |
| ·mRNA 差异显示技术的不足 | 第14-15页 |
| ·mRNA 差异显示技术的改进和发展 | 第15-17页 |
| 4. 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 实验部分 部分一：PAG MRNA 在奶牛血液中的表达 | 第18-26页 |
| 1 材料与方法 | 第18-20页 |
| ·主要仪器及设备 | 第18页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·实验动物 | 第18-19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·主要试剂与溶液配制 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·常规溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-21页 |
| ·血液总RNA 的抽提 | 第20页 |
| ·RT-PCR | 第20-21页 |
| ·反转录 | 第20页 |
| ·PCR 反应体系 | 第20-21页 |
| ·PCR 反应程序 | 第21页 |
| ·RT-PCR 扩增产物的电泳 | 第21页 |
| ·半定量分析 | 第21页 |
| ·统计分析 | 第21页 |
| 3. 结果与分析 | 第21-25页 |
| 4 讨论 | 第25页 |
| 5 结论 | 第25-26页 |
| 部分二：奶牛妊娠早期血液相关基因差异表达的研究 | 第26-45页 |
| 1 材料与方法 | 第26-30页 |
| ·主要仪器及设备 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·主要试剂与溶液配制 | 第27-30页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·常规溶液配制 | 第27-29页 |
| ·差异片段的连接、转化与克隆的主要试剂 | 第29页 |
| ·质粒DNA 的提取、鉴定的主要试剂 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-35页 |
| ·血液总RNA 的抽提 | 第30页 |
| ·RT-PCR | 第30页 |
| ·反转录 | 第30页 |
| ·PCR 反应体系 | 第30页 |
| ·PCR 反应程序 | 第30页 |
| ·8%聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·灌胶 | 第30-31页 |
| ·电泳 | 第31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶银染 | 第31页 |
| ·差异片段的回收及二次PCR | 第31-33页 |
| ·差异片段的回收（Biospin 聚丙烯酰胺凝胶DNA 回收试剂盒） | 第31-32页 |
| ·二次PCR | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶中回收经验证的差异片段 | 第32-33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·感受态细胞的制备（CACL2 法） | 第33-34页 |
| ·转化（CACL2 法） | 第34页 |
| ·重组质粒的保种和质粒DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的保种 | 第34页 |
| ·质粒的提取 | 第34-35页 |
| ·菌体PCR 鉴定 | 第35页 |
| ·差异表达片段的序列分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-41页 |
| ·差异显示PCR 的结果 | 第35-37页 |
| ·二次PCR 产物的克隆转化与鉴定 | 第37-38页 |
| ·妊娠奶牛差异条带分析 | 第38页 |
| ·相似功能的基因片段克隆序列比对结果分析 | 第38-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-44页 |
| ·妊娠牛血液相关基因的表达 | 第41页 |
| ·TGFβ-2 基因的表达 | 第41-42页 |
| ·CSF-2 基因的表达 | 第42页 |
| ·IGF-1 基因的表达 | 第42-44页 |
| 5. 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录：差异表达片段的测序结果及序列对比结果 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第54页 |