| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 水稻促分裂原活化蛋白激酶(MITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE,MAPK) | 第10-16页 |
| ·MAPK级链的基本组成 | 第10-12页 |
| ·水稻MAPK级链组分 | 第12-14页 |
| ·BWMK1的功能 | 第14-16页 |
| 2 植物磷酸盐转运蛋白 | 第16-19页 |
| ·水稻Pht1家族磷酸盐转运蛋白 | 第17-19页 |
| 3 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 水稻BWMK1互作基因的分离 | 第21-28页 |
| 1 材料与方法 | 第21-25页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·用pDBLeu质粒构建"诱饵"表达载体 | 第21页 |
| ·用pPC86质粒构建cDNA文库 | 第21-22页 |
| ·MaV203酵母感受态制备及少量转化 | 第22-23页 |
| ·自激活检测与3AT浓度测定 | 第23页 |
| ·互作蛋白cDNA文库筛选 | 第23-24页 |
| ·X-gal活性检测 | 第24-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-28页 |
| ·靶自激活检测 | 第25页 |
| ·测序及BLAST分析 | 第25-26页 |
| ·OsPT8生物信息学分析 | 第26-28页 |
| ·OsPT8基因表达水平 | 第26-27页 |
| ·OsPT8与其他水稻磷酸盐转运蛋白系统关系 | 第27-28页 |
| 第三章 水稻BWMK1互作基因RNA干扰和超表达载体构建 | 第28-38页 |
| 1 材料与方法 | 第28-34页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·菌种及质粒: | 第28页 |
| ·生化试剂: | 第28页 |
| ·培养基: | 第28-29页 |
| ·质粒提取液: | 第29页 |
| ·方法 | 第29-34页 |
| ·RNAi载体构建流程 | 第29-30页 |
| ·超表达载体构建流程 | 第30-31页 |
| ·目的片段的克隆 | 第31-34页 |
| ·目的片段的测序 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·目的片段PCR产物回收与克隆 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-37页 |
| ·RNAi重组质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·Y2H12-2超表达重组质粒的酶切和PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·OsPT8超表达重组质粒的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 水稻BWMK1互作基因的转化及鉴定 | 第38-48页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·供试水稻品种 | 第38页 |
| ·质粒与菌种 | 第38页 |
| ·生化试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·GUS活性测定: | 第39页 |
| ·水稻总DNA的提取 | 第39页 |
| ·水稻总RNA的提取(Trizol法) | 第39-40页 |
| ·PCR扩增反应引物的设计 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第40-42页 |
| ·转基因水稻的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·转基因水稻的RT-PCR检测 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第44-45页 |
| ·GUS染色 | 第45页 |
| ·PCR检测 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR检测 | 第46-48页 |
| 第五章 水稻BWMK1互作基因Y2H12-2和OSPT8的功能分析 | 第48-58页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·供试水稻品和病菌生理小种 | 第48页 |
| ·仪器和试剂 | 第48页 |
| ·培养基: | 第48-49页 |
| ·方法: | 第49-51页 |
| ·潮霉素筛选 | 第49页 |
| ·转基因后代苗期稻瘟病抗性鉴定 | 第49-50页 |
| ·转基因后代白叶枯接种鉴定 | 第50-51页 |
| ·低磷处理 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-56页 |
| ·类病斑 | 第51页 |
| ·潮霉素筛选 | 第51-52页 |
| ·稻瘟病接种 | 第52-53页 |
| ·白叶枯接种 | 第53-55页 |
| ·低磷处理 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录A:缩写词 | 第63-66页 |
| 附录B:Y2H12-2全长序列 | 第66-69页 |
| 附录C:OSPT8全长序列 | 第69-71页 |
| 附录D:载体图 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
