| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 非洲锥虫病的概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 病原学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 生活史 | 第14-15页 |
| 1.1.3 流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.4 临床特征 | 第16页 |
| 1.1.5 预防与治疗 | 第16-17页 |
| 1.2 布氏锥虫的免疫逃避 | 第17-20页 |
| 1.2.1 锥虫的抗原变异与免疫逃避 | 第17-19页 |
| 1.2.2 宿主的天然免疫与病原生物的DNase | 第19-20页 |
| 1.3 脱氧核糖核酸酶 | 第20-21页 |
| 1.4 展望 | 第21-22页 |
| 第二章 布氏锥虫TatD-like DNase基因的原核表达、蛋白质纯化及多克隆抗体制备 | 第22-36页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 质粒、菌种和实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 原核表达载体的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.2 重组蛋白质的表达与纯化 | 第27-29页 |
| 2.2.3 特异性抗血清的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.4 间接ELISA检测血清效价 | 第30页 |
| 2.2.5 多克隆抗体的纯化 | 第30-31页 |
| 2.3 结果 | 第31-34页 |
| 2.3.1 TatD-like DNase基因重组质粒的双酶切鉴定 | 第31页 |
| 2.3.2 TatD-like DNase重组蛋白质的表达与纯化 | 第31-32页 |
| 2.3.3 免疫血清的获得及特异性IgG的纯化 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 TatD-like DNase蛋白质在布氏锥虫中的表达、定位及水解活性分析 | 第36-52页 |
| 3.1 材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 虫株和实验动物 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第37-38页 |
| 3.2 方法 | 第38-44页 |
| 3.2.1 TatD-like DNase基因转录水平分析 | 第38-41页 |
| 3.2.2 全虫蛋白质中TatD-like DNase的 Western-blot鉴定 | 第41页 |
| 3.2.3 间接免疫荧光定位TbTatD在布氏锥虫中的位置 | 第41-42页 |
| 3.2.4 布氏锥虫TatD-like DNase的水解活性分析 | 第42-44页 |
| 3.2.4.1 DNA的提取 | 第42页 |
| 3.2.4.2 TbTatD体外水解DNA实验 | 第42-43页 |
| 3.2.4.3 中性粒细胞的提取及细胞外捕网刺激 | 第43页 |
| 3.2.4.4 TbTatD体外水解中性粒细胞外捕网实验 | 第43-44页 |
| 3.3 结果 | 第44-49页 |
| 3.3.1 qPCR检测TatD-like DNase基因转录水平结果 | 第44页 |
| 3.3.2 TbTatD在虫体中的表达及定位 | 第44-46页 |
| 3.3.3 DNA提取结果 | 第46页 |
| 3.3.4 TbTatD体外功能受浓度,温度和金属离子影响的分析 | 第46-48页 |
| 3.3.5 TbTatD体外降解中性粒细胞胞外陷阱功能的验证 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第59-60页 |
