摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 鸭肝炎病毒研究进展 | 第9-13页 |
·病原研究 | 第9-10页 |
·病原形态学特性 | 第9页 |
·病毒增殖 | 第9-10页 |
·病毒的提取与纯化 | 第10页 |
·DHV-Ⅰ基因组基本结构 | 第10-12页 |
·DHV-Ⅰ基因组非编码区 | 第10-11页 |
·DHV-1 的基因组编码区 | 第11-12页 |
·DHV-Ⅰ的流行病学 | 第12页 |
·结语 | 第12-13页 |
第二章 小RNA 病毒内部核糖体进入位点的结构与功能研究进展 | 第13-23页 |
·内部核糖体进入位点(internal ribosome-entry site,IRES)的发现 | 第13-14页 |
·IRES 的分类 | 第14页 |
·小RNA 病毒基因组非编码区 | 第14-15页 |
·小RNA 病毒的翻译起始 | 第15-17页 |
·小RNA 病毒蛋白质的翻译 | 第17-18页 |
·病毒基因组3′端的协调作用 | 第18-19页 |
·IRES 结构与功能的关系 | 第19-21页 |
·IRES 5′端结构与功能的关系 | 第19页 |
·IRES 中部区域结构与功能的关系 | 第19-20页 |
·IRES 3′端结构与功能的关系 | 第20-21页 |
·IRES 的应用 | 第21页 |
·RNA 适体 | 第21页 |
·病毒载体的构建 | 第21页 |
·基因治疗 | 第21页 |
·结语 | 第21-23页 |
第三章 I 型鸭病毒性肝炎病毒5′UTR 内部翻译起始功能研究 | 第23-34页 |
·材料与方法 | 第23-29页 |
·材料 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-29页 |
·结果 | 第29-32页 |
·目的片段的PCR 扩增结果 | 第29页 |
·重组质粒的鉴定结果 | 第29-31页 |
·重组质粒pIRES-RED-DHV5′UTR-eGFP及pIRES-RED-eGFP转染BHK-21细胞结果 | 第31页 |
·Western Blot 检测 eGFP 结果 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第四章 DHV-1 内部核糖体进入位点的结构与功能研究 | 第34-51页 |
·材料与方法 | 第34-42页 |
·质粒与工程菌 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·使用的主要仪器 | 第34页 |
·引物设计与合成 | 第34-35页 |
·DHV5′UTR RNA 二级结构的预测 | 第35-42页 |
·结果 | 第42-49页 |
·DHV5′UTR RNA 二级结构的预测 | 第42页 |
·重组质粒pIRES-RED-△DHV5′UTR360 -eGFP 的构建 | 第42-43页 |
·重组质粒pIRES-RED- △DHV5′UTR360 -eGFP 突变体的测序结果 | 第43页 |
·突变体pIRES-stem1 及pIRES-stem2 的恢复突变测序结果 | 第43页 |
·重组质粒及突变体的体内翻译 | 第43-45页 |
·真核表达载体pGEM-CAT-△DHV5′UTR360 -LUC 的构建 | 第45-46页 |
·真核表达载体pGEM-CAT- Ⅲe-LUC 、pGEM-CAT-stem1-LUC、pGEM-CAT-stem2-LUC 、pGEM-CAT-stem1HF-LUC 、p GEM-CAT-stem 2HF-LUC 的构建 | 第46-47页 |
·重组质粒体外翻译的检测结果 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |