| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 第一章 单纯疱疹病毒疫苗的研究进展 | 第10-15页 |
| ·HSV 灭活疫苗和精制亚单位疫苗 | 第10-11页 |
| ·HSV 重组糖蛋白疫苗 | 第11-12页 |
| ·HSV 减毒活疫苗 | 第12-13页 |
| ·HSV DNA 疫苗 | 第13-14页 |
| ·结束语 | 第14-15页 |
| 第二章 昆虫杆状病毒表达系统概述 | 第15-19页 |
| ·杆状病毒的生物学特性 | 第15页 |
| ·杆状病毒表达系统的特点 | 第15-16页 |
| ·Bac-to-Bac 表达系统简介 | 第16-17页 |
| ·结束语 | 第17-19页 |
| 试验研究 | 第19-55页 |
| 第三章 单纯疱疹病毒（HSV）的培养、收获和病毒滴度的测定 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·病毒、细胞 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第19页 |
| ·常用试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-21页 |
| ·Vero 细胞的复苏及培养 | 第20页 |
| ·HSV-2 333 株在Vero 细胞中的培养与收获 | 第20页 |
| ·HSV-2 病毒半数组织感染量(TCID50)的测定 | 第20-21页 |
| ·结果 | 第21-22页 |
| ·HSV-2 333 株感染Vero 细胞的结果 | 第21页 |
| ·HSV-2 333 株TCID50 的测定结果 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22页 |
| ·小结 | 第22-23页 |
| 第四章 HSV-2 DNA 的提取、目的基因的扩增及重组穿梭质粒的构建 | 第23-34页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·病毒、菌种、细胞、实验动物 | 第23页 |
| ·质粒和引物 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第24页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第24-25页 |
| ·常用试剂的配制 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·HSV-2 333 株DNA 的提取 | 第25页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR）扩增HSV-2 gD 基因片段 | 第25-26页 |
| ·目的片段的回收 | 第26页 |
| ·目的片段与供体质粒pFastBacHTA 的连接 | 第26-27页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)和连接产物的转化 | 第27页 |
| ·重组供体质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组穿梭质粒Bacmid-gD 的构建、鉴定与提取 | 第28-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·HSV-2 DNA 提取物含量 | 第30页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因及扩增产物的胶回收 | 第30-31页 |
| ·重组供体质粒pFastBacHTA-gD 的鉴定结果 | 第31页 |
| ·重组杆粒的PCR 鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·重组杆粒OD 值测量结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第五章 重组穿梭质粒转染昆虫细胞和重组杆状病毒的鉴定以及表达用毒种库的建立 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·细胞 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·昆虫细胞培养 | 第34-35页 |
| ·重组杆粒转染昆虫细胞 | 第35页 |
| ·第1代(P1)病毒的分离 | 第35-36页 |
| ·P1 病毒的传代培养 | 第36页 |
| ·P3 病毒滴度的空斑测定和P3 病毒空斑纯化 | 第36-37页 |
| ·P4 病毒的鉴定 | 第37页 |
| ·表达用病毒毒种的建立及保存 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·P3 病毒感染昆虫细胞72h 时细胞CPE 情况 | 第37-38页 |
| ·P3 病毒的空斑测定 | 第38-39页 |
| ·P4 病毒的鉴定结果 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第六章 目的蛋白的表达、鉴定、纯化及免疫保护性评价 | 第41-55页 |
| ·材料 | 第41-44页 |
| ·细胞、动物 | 第41页 |
| ·常用试剂及耗材 | 第41页 |
| ·主要设备仪器 | 第41-42页 |
| ·常用试剂的配制 | 第42-44页 |
| ·方法 | 第44-49页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第45-46页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第46-48页 |
| ·抗原-佐剂制备及免疫程序 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·SDS-PAGE | 第49-51页 |
| ·Western blot 试验结果 | 第51页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第51页 |
| ·ELISA 检测血清IgG 结果 | 第51-52页 |
| ·中和试验结果 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 英文缩略词 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
