摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·A 型流感病毒大记事 | 第13-17页 |
·流感病毒聚合酶的功能 | 第17-20页 |
·引言 | 第17页 |
·病毒复制和转录相关的病毒蛋白 | 第17-18页 |
·病毒转录和复制 | 第18-20页 |
·流感病毒反向遗传操作技术的发展 | 第20-25页 |
·引言 | 第20页 |
·病毒的生命循环 | 第20页 |
·流感病毒拯救的里程碑 | 第20-23页 |
·反向遗传在流感病毒上的应用 | 第23-25页 |
第二章 H5N1 亚型禽流感病毒对家鸭的致病力实验 | 第25-29页 |
·材料方法 | 第25-26页 |
·实验所用的病毒分离株 | 第25页 |
·病毒分离株的纯化和扩增 | 第25-26页 |
·鸡胚半数感染量测定(EID50) | 第26页 |
·实验动物 | 第26页 |
·家鸭感染实验 | 第26页 |
·结果与讨论 | 第26-29页 |
·攻毒后家鸭表现的临床症状和对家鸭的致死率 | 第26-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 研究 H5N1 亚型禽流感病毒对家鸭的致病力分子机制的模式病毒的筛选 | 第29-38页 |
·材料和方法 | 第29-31页 |
·实验用的毒株(同第二章) | 第29页 |
·模式毒株选择的依据 | 第29页 |
·实验毒株的基因组相似性分析 | 第29页 |
·模式毒株对家鸭致病力实验及半数致死量的测定(DLD50) | 第29页 |
·模式毒株对小鼠的致病力实验及半数致死量的测定(MLD50) | 第29-30页 |
·模式毒株感染家鸭脑组织病理变化 | 第30页 |
·模式毒株精确序列测定 | 第30页 |
·模式病毒编码蛋白序列差异分析 | 第30-31页 |
·结果和讨论 | 第31-37页 |
·13 株病毒基因组相似性比较结果 | 第31-34页 |
·对家鸭致病实验和半数致死量的测定结果 | 第34-35页 |
·GS/H865 和DK/H849 对小鼠的致病力结果 | 第35-36页 |
·GS/H865 和DK/H849 精确序列的测定 | 第36页 |
·GS/H865 和DK/H849 编码蛋白序列差异分析 | 第36-37页 |
·感染GS/H865 和DK/H849 家鸭脑组织的病理变化 | 第37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第四章 H5N1 亚型禽流感病毒对家鸭致病力分子基础的研究 | 第38-53页 |
·材料和方法 | 第38-41页 |
·模式病毒 | 第38页 |
·实验动物 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·PBD 双向转录载体 | 第38页 |
·引物 | 第38-39页 |
·病毒RNA 提取、反转录与PCR | 第39-40页 |
·重组质粒的构建 | 第40页 |
·PA 基因的定点突变 | 第40页 |
·病毒的拯救和鉴定 | 第40-41页 |
·获救病毒对家鸭的致病力实验 | 第41页 |
·PA 蛋白224P 和383D 在自然界的分布 | 第41页 |
·获救的部分毒株对小鼠的致病力实验 | 第41页 |
·结果 | 第41-51页 |
·重组PBD 质粒克隆鉴定结果 | 第41-42页 |
·获救病毒的鉴定结果 | 第42页 |
·获救病毒对家鸭的致病力实验结果 | 第42-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第五章 探索 PA 蛋白224和383位氨基酸改变影响 H5N1亚型禽流感病毒致病力的分子机制 | 第53-67页 |
·材料和方法 | 第53-58页 |
·PA 224 和383 位氨基酸突变蛋白对聚合酶活性影响检测 | 第53-55页 |
·WesternBlot 检测PA 和其突变蛋白稳定性实验 | 第55页 |
·PA 224 和383 位氨基酸突变对核定位研究 | 第55页 |
·利用酵母双杂交技术研究PA 蛋白和DKCLE 蛋白的相互作用 | 第55-58页 |
·结果 | 第58-65页 |
·224 和383 位氨基酸的突变对流感聚合酶活性的影响 | 第58-59页 |
·WesternBlot 检测PA 和其突变蛋白稳定性实验结果 | 第59-60页 |
·PA 224 和383 位氨基酸突变对核定位研究结果 | 第60-64页 |
·酵母双杂交比较49-PA 和65-PA 与DK-CLE 蛋白的相互作用 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第六章 全文结论 | 第67-68页 |
·分析13 株H5N1 对家鸭致病性 | 第67页 |
·H5N1 亚型禽流感对家鸭致病力的分子基础 | 第67页 |
·PA 蛋白224 和383 位氨基酸影响病毒对家鸭致病力机制的探索 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录 | 第75-86页 |
附录1 家鸭CLE 基因序列 | 第75页 |
附录2 A/Goose/HB/65 全基因序列 | 第75-80页 |
附录3 A/Duck/HB/49 全基因序列 | 第80-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
作者简历 | 第87页 |