| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 缩略语 | 第13-20页 |
| 第1章 引言 | 第20-29页 |
| ·有毒中药简介 | 第20页 |
| ·药物代谢与药物的活性和毒性 | 第20-21页 |
| ·有毒中药代谢的研究对象及研究内容 | 第21页 |
| ·有毒中药或中药有毒成分代谢的国内外研究进展 | 第21-24页 |
| ·雷公藤内酯 | 第21-22页 |
| ·马兜铃酸 | 第22页 |
| ·乌头类生物碱 | 第22-23页 |
| ·其他生物碱 | 第23页 |
| ·银杏酸 | 第23-24页 |
| ·狼毒的研究概况 | 第24-28页 |
| ·狼毒及其临床应用 | 第24页 |
| ·狼毒作为生物农药 | 第24-25页 |
| ·狼毒的化学成分与药理活性 | 第25-27页 |
| ·狼毒的质量控制 | 第27-28页 |
| ·研究目的与方案 | 第28-29页 |
| 第2章 狼毒乙素和新狼毒素A的分离与制备 | 第29-39页 |
| ·实验仪器与材料 | 第29-30页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·试剂与材料 | 第30页 |
| ·实验方法及结果 | 第30-38页 |
| ·狼毒乙素的制备 | 第30-33页 |
| ·制备工艺 | 第30-31页 |
| ·HPLC分析方法 | 第31页 |
| ·半制备液相色谱纯化方法 | 第31页 |
| ·狼毒乙素结构的质谱鉴定 | 第31-32页 |
| ·狼毒乙素结构的氢谱(~1HNMR,DMSO-d6)鉴定 | 第32-33页 |
| ·新狼毒素A的制备 | 第33-38页 |
| ·制备工艺 | 第33-34页 |
| ·HPLC分析方法 | 第34-35页 |
| ·新狼毒素A的纯化方法 | 第35页 |
| ·新狼毒素A结构的质谱鉴定 | 第35-36页 |
| ·新狼毒素A的氢谱~1HNMR、碳谱~(13)CNMR(DMSO-d6)鉴定 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 新狼毒素A在MDCK和MDCK-MDR1细胞上的转运研究 | 第39-54页 |
| ·实验仪器与材料 | 第39-41页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·试剂与药品 | 第40页 |
| ·实验相关试药和试液配制 | 第40-41页 |
| ·DMEM完全培养基 | 第40页 |
| ·HBSS缓冲液 | 第40-41页 |
| ·0.25%胰酶0.02% EDTA消化液 | 第41页 |
| ·MTT试液 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-47页 |
| ·细胞培养 | 第41-43页 |
| ·细胞培养实验条件的准备 | 第41页 |
| ·细胞常规维持培养 | 第41页 |
| ·细胞的复苏 | 第41-42页 |
| ·细胞传代 | 第42页 |
| ·细胞的冻存 | 第42-43页 |
| ·在透性支持物上接种细胞 | 第43页 |
| ·细胞单层完整性评价 | 第43-44页 |
| ·被动扩散标志物荧光黄(LY)跨膜通量的测定 | 第43页 |
| ·单层细胞跨膜电阻值的测定 | 第43-44页 |
| ·MTT法评价新狼毒素A对MDCK和MDCK-MDR1细胞的细胞毒性 | 第44页 |
| ·新狼毒素A HPLC分析方法 | 第44-45页 |
| ·新狼毒素A在MDCK和MDCK-MDR1细胞单层中的转运 | 第45-47页 |
| ·转运试验前准备工作 | 第45页 |
| ·转运试验 | 第45页 |
| ·P-gp抑制剂维拉帕米对新狼毒素A转运的影响 | 第45页 |
| ·罗丹明123在MDCK和MDCK-MDR1细胞中的转运 | 第45-46页 |
| ·新狼毒素A对R123在MDCK和MDCK-MDR1细胞中转运的影响 | 第46页 |
| ·转运系体中罗丹明123的含量测定方法 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-52页 |
| ·新狼毒素A对MDCK和MDCK-MDR1细胞的细胞毒性 | 第47-48页 |
| ·HPLC测定转运系统中新狼毒素A的分析方法学验证 | 第48-49页 |
| ·专属性 | 第48-49页 |
| ·线性范围及检测下限与定量下限 | 第49页 |
| ·准确度与精密度试验 | 第49页 |
| ·新狼毒素A在MDCK和MDCK-MDR1细胞中的转运 | 第49-50页 |
| ·新狼毒素A对MDCK和MDCK-MDR1细胞中罗丹明123转运的影响 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第4章 狼毒乙素和新狼毒素A在大鼠肝微粒体和大鼠原代肝细胞中的代谢研究 | 第54-83页 |
| ·实验仪器与材料 | 第54-57页 |
| ·仪器 | 第54-55页 |
| ·试剂与药品 | 第55页 |
| ·常用试剂配置 | 第55-57页 |
| ·试验方法 | 第57-62页 |
| ·SD大鼠肝微粒体制备 | 第57页 |
| ·Lowry法测定肝微粒体蛋白浓度 | 第57-58页 |
| ·微粒体代谢 | 第58-60页 |
| ·孵育方法 | 第58-59页 |
| ·β-葡萄糖醛酸水解酶水解反应 | 第59页 |
| ·大鼠肝脏一相与二相代谢酶诱导方法 | 第59页 |
| ·酶动力学参数测定 | 第59页 |
| ·抑制实验 | 第59-60页 |
| ·狼毒乙素葡萄糖醛酸苷的分离与结构分析 | 第60页 |
| ·大鼠原代肝细胞代谢 | 第60-61页 |
| ·大鼠原代肝细胞的分离 | 第60-61页 |
| ·大鼠原代肝细胞常规培养 | 第61页 |
| ·MTT方法检测细胞毒性 | 第61页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A在大鼠原代肝细胞中的体外孵育实验 | 第61页 |
| ·HPLC条件 | 第61-62页 |
| ·狼毒乙素及其代谢物的HPLC分析方法 | 第61-62页 |
| ·新狼毒素A及其代谢物的HPLC分析方法 | 第62页 |
| ·UPLC-MS分析方法 | 第62页 |
| ·狼毒乙素代谢物的UPLC-MS分析方法 | 第62页 |
| ·新狼毒素A代谢物的UPLC-MS分析方法 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-81页 |
| ·狼毒乙素的代谢分析 | 第62-75页 |
| ·鼠肝微粒体一相代谢分析 | 第63-67页 |
| ·微粒体二相代谢分析 | 第67-75页 |
| ·大鼠原代肝细胞代谢分析 | 第75页 |
| ·新狼毒素A的代谢分析 | 第75-81页 |
| ·微粒体一相代谢分析 | 第75-76页 |
| ·微粒体二相代谢分析 | 第76-81页 |
| ·大鼠原代肝细胞代谢分析 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82-83页 |
| 第5章 狼毒乙素和新狼毒素A在大鼠体内的代谢、排泄和药物动力学研究 | 第83-100页 |
| ·实验仪器与材料 | 第83-85页 |
| ·仪器 | 第83页 |
| ·实验材料 | 第83-85页 |
| ·药品和试剂 | 第83-84页 |
| ·实验动物 | 第84-85页 |
| ·实验方法 | 第85-88页 |
| ·狼毒乙素、新狼毒素A体内代谢物分析 | 第85-86页 |
| ·大鼠血浆获取方法 | 第85页 |
| ·大鼠胆汁,尿液,粪便获取方法 | 第85页 |
| ·生物样品的预处理 | 第85-86页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A大鼠给药后质量平衡分析 | 第86页 |
| ·狼毒乙素、新狼毒素A在大鼠体内的药物动力学研究 | 第86-87页 |
| ·新狼毒素A大鼠体内药物动力学预实验 | 第86页 |
| ·狼毒乙素大鼠体内药物动力学研究 | 第86-87页 |
| ·大鼠体内新狼毒素A及代谢物的UPLC-MS分析 | 第87页 |
| ·大鼠体内狼毒乙素及代谢物的UPLC-MS定性分析 | 第87页 |
| ·血浆中狼毒乙素葡萄糖醛酸苷定量测定的UPLC-MS方法 | 第87-88页 |
| ·实验结果 | 第88-95页 |
| ·狼毒乙素在大鼠体内的代谢、排泄和药物动力学 | 第88-93页 |
| ·体内代谢物分析 | 第88-89页 |
| ·药物动力学分析 | 第89-93页 |
| ·新狼毒素A大鼠体内代谢和排泄实验 | 第93-95页 |
| ·体内代谢物分析 | 第93-95页 |
| ·质量平衡分析 | 第95页 |
| ·药物动力学分析 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-98页 |
| ·结论 | 第98-100页 |
| 第6章 狼毒乙素和新狼毒素A在人肝微粒体、HepG2细胞和人重组酶中的代谢研究 | 第100-126页 |
| ·实验仪器与材料 | 第100-102页 |
| ·仪器 | 第100-101页 |
| ·试剂与药品 | 第101页 |
| ·常用试剂的配制 | 第101-102页 |
| ·实验方法 | 第102-105页 |
| ·人肝微粒体制备 | 第102页 |
| ·咪达唑仑及其代谢物的HPLC分析方法 | 第102页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A及代谢物的HPLC-UV和UPLC-MS分析同第4章 | 第102页 |
| ·HepG2细胞代谢 | 第102-103页 |
| ·HepG2细胞常规培养 | 第102页 |
| ·MTT方法评价狼毒乙素和新狼毒素A对HepG2细胞的细胞毒性 | 第102-103页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A在HepG2细胞中的体外孵育实验 | 第103页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A在微粒体中的体外孵育实验 | 第103页 |
| ·Sf9细胞的培养 | 第103-104页 |
| ·CYP3A4重组酶代谢 | 第104页 |
| ·CYP3A4重组酶 | 第104页 |
| ·CYP3A4重组酶活性测定 | 第104页 |
| ·狼毒乙素在人CYP3A4重组酶中的体外孵育实验 | 第104页 |
| ·UGTs代谢 | 第104-105页 |
| ·UGTs的制备 | 第104-105页 |
| ·狼毒乙素和新狼毒素A在UGTs中的体外孵育实验 | 第105页 |
| ·结果 | 第105-123页 |
| ·狼毒乙素的代谢分析 | 第105-114页 |
| ·人肝微粒体一相代谢分析 | 第105-107页 |
| ·人重组CYP3A4酶代谢分析 | 第107-108页 |
| ·人肝微粒体二相代谢分析 | 第108-112页 |
| ·重组UGTs代谢狼毒乙素 | 第112-114页 |
| ·HepG2细胞代谢分析 | 第114页 |
| ·新狼毒素A的代谢分析 | 第114-123页 |
| ·微粒体一相代谢分析 | 第114-115页 |
| ·微粒体二相代谢分析 | 第115-121页 |
| ·重组UGTs代谢分析 | 第121-122页 |
| ·HepG2细胞代谢分析 | 第122-123页 |
| ·讨论 | 第123-124页 |
| ·本章小结 | 第124-126页 |
| 主要创新性 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-137页 |
| 作者简介 | 第137页 |
