中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
引言 | 第9-13页 |
1 IL-1RI的结构 | 第9页 |
2 IL-1RI的表达 | 第9-10页 |
3 IL-1RI信号转导过程 | 第10-11页 |
4 IL-1RI与疾病的关系 | 第11-12页 |
5 IL-1RI的研究意义 | 第12-13页 |
第一部分 人IL-1R Ⅰ胞外区基因克隆及其PPICZAA-SIL1R Ⅰ表达载体的构建 | 第13-24页 |
1 实验材料 | 第13-14页 |
·菌株、质粒细胞、实验试剂 | 第13-14页 |
·主要的仪器设备 | 第14页 |
2 实验方法 | 第14-19页 |
·制备人白细胞RNA | 第14-15页 |
·RT-PCR扩增cDNA | 第15页 |
·PCR扩增IL-1R Ⅰ胞外区DNA序列 | 第15-16页 |
·构建pPICZ α A-sILlR Ⅰ重组质粒 | 第16-19页 |
·DNA序列的测定 | 第19页 |
3 实验结果 | 第19-22页 |
·Trizol法提取白细胞总RNA | 第19-20页 |
·IL-1R Ⅰ编码区胞外片段经PCR扩增结果 | 第20页 |
·质粒pPICZ α A电泳结果 | 第20-21页 |
·pPICZ a A-sIL1R Ⅰ表达载体的构建 | 第21-22页 |
4 讨论 | 第22-24页 |
第二部分 PPICZ A A-SIL1R Ⅰ在毕赤酵母的表达 | 第24-33页 |
1 实验材料 | 第24页 |
·菌株、实验试剂 | 第24页 |
·主要实验仪器 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-28页 |
·重组质粒pPICZ α A-sIL1R Ⅰ的大量提取(QIAquick质粒提取Kit) | 第24-25页 |
·线性化重组质粒 | 第25页 |
·线性化的重组质粒电转化入酵母菌 | 第25-26页 |
·PCR鉴定转化子 | 第26页 |
·转化子表型的筛选 | 第26-27页 |
·表达菌株的诱导表达 | 第27页 |
·GS115裂解 | 第27页 |
·表达产物的Western-Blot分析 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-30页 |
·转化子PCR鉴定 | 第28-29页 |
·转化子表型(Mut~+或Mut~s)筛选的PCR鉴定 | 第29页 |
·表达产物IL-1R Ⅰ胞外区蛋白的western-blot结果 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-33页 |
结语 | 第33-34页 |
综述 | 第34-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-54页 |
在校期间发表论文 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |