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水稻类整合素蛋白的免疫定位及其编码基因的克隆与表达

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·引言第10页
   ·整合素蛋白第10-13页
     ·整合素的结构与功能第11-12页
     ·整合素的活化机制第12-13页
   ·植物类整合素蛋白的研究进展第13-17页
     ·植物类整合素蛋白的检测第14页
     ·植物类整合素蛋白的定位功能第14页
     ·植物类整合素蛋白的功能第14-16页
     ·植物类整合素蛋白的研究展望第16-17页
   ·结语第17-18页
第二章 水稻悬浮细胞培养系统的建立第18-22页
   ·引言第18页
   ·材料与方法第18-19页
     ·第18-19页
       ·材料第18页
       ·培养基第18-19页
     ·试验方法第19页
       ·愈伤组织诱导第19页
       ·悬浮细胞系的建立第19页
   ·结果与分析第19-20页
     ·水稻愈伤组织的诱导第19-20页
     ·水稻悬浮细胞系的建立第20页
   ·讨论第20-22页
第三章 水稻类整合素蛋白(OsILP)的检测第22-26页
   ·引言第22页
   ·材料与方法第22-23页
     ·实验材料第22-23页
     ·间接免疫荧光定位第23页
   ·结果分析第23-26页
     ·水稻根尖细胞中类整合素蛋白的间接免疫荧光定位第23-24页
     ·水稻愈伤和悬浮培养细胞中类整合素蛋白的间接免疫荧光定位第24-26页
第四章 水稻编码类整合素蛋白基因(OsILP)的克隆与表达第26-37页
   ·引言第26-27页
     ·材料与方法第27-31页
     ·材料第27-28页
       ·植物材料第27页
       ·菌株第27页
       ·试剂(盒)第27页
       ·培养基第27页
       ·主要仪器第27-28页
     ·方法第28-31页
       ·水稻基因 Os03g0199100 的 TOPO 克隆第28-29页
         ·水稻总RNA 的提取第28页
         ·第一链 cDNA 的合成第28页
         ·OsILP 基因序列的PCR 扩增第28页
         ·PCR 产物的回收第28页
         ·目的片段与克隆载体的连接第28-29页
         ·重组质粒的转化第29页
         ·阳性克隆的PCR 鉴定第29页
         ·测序第29页
       ·转OsILP-GFP 融合基因的双元载体的构建第29页
         ·重组质粒与表达载体质粒的小量提取第29页
         ·转OsILP-GFP 融合基因的双元载体的构建第29页
       ·OsILP-GFP 融合基因的原生质体瞬时表达第29-30页
         ·水稻日本晴悬浮细胞原生质体的分离第29-30页
         ·OsILP-GFP 融合基因的原生质体瞬时表达第30页
       ·转OsILP-GFP 融合基因的根癌农杆菌的转化第30页
         ·根癌农杆菌阳性克隆的目的基因序列的PCR 鉴定第30页
         ·根癌农杆菌阳性克隆的GFP 基因序列的PCR 鉴定第30页
       ·根癌农杆菌介导法培育转基因水稻悬浮细胞第30-31页
         ·转OsILP-GFP 基因水稻悬浮细胞系的培育第30-31页
         ·转OsILP-GFP 基因水稻悬浮细胞的PCR 鉴定第31页
         ·转OsILP-GFP 基因水稻悬浮细胞的GFP 表达的定位第31页
   ·结果分析第31-36页
     ·水稻总RNA 的提取第31-32页
     ·水稻第一链 cDNA 的合成第32页
     ·OsILP 基因TOPO 克隆的PCR 扩增第32-33页
     ·重组质粒转化后阳性克隆的PCR 鉴定第33页
     ·转OsILP-GFP 融合基因的双元载体阳性克隆的PCR 鉴定第33-34页
     ·转OsILP-GFP 融合基因的原生质体的瞬时表达第34页
     ·转OsILP-GFP 基因的农杆菌阳性克隆的PCR 鉴定第34-35页
     ·转 OsILP-GFP 基因水稻悬浮细胞目的片段与 GFP 的 PCR 鉴定第35页
     ·转OsILP-GFP 融合基因水稻悬浮细胞GFP 表达的细胞学定位第35-36页
   ·讨论第36-37页
第五章 总结与讨论第37-39页
参考文献第39-43页
附录第43-44页
致谢第44页

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