摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-22页 |
·蛭弧菌的简介 | 第12-14页 |
·蛭弧菌的分类 | 第12页 |
·蛭弧菌的生物学特性 | 第12-13页 |
·蛭弧菌基因组的研究 | 第13-14页 |
·蛭弧菌研究进展 | 第14-18页 |
·蛭弧菌生长条件与发酵条件的研究 | 第14页 |
·蛭弧菌用于农业生产的研究 | 第14-17页 |
·蛭弧菌用于水产养殖致病菌的清除 | 第14-15页 |
·蛭弧菌用于水质改善的研究 | 第15页 |
·蛭弧菌用于改善水产养殖动物免疫力的研究 | 第15-16页 |
·蛭弧菌用于防治兽禽疾病的研究 | 第16-17页 |
·现代分子生物学方法用于蛭弧菌研究的进展 | 第17-18页 |
·实时荧光定量PCR (Real-time PCR) | 第17页 |
·变性温度梯度凝胶电泳(DGGE) | 第17-18页 |
·DNA 扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA) | 第18页 |
·蛭弧菌的基因研究方法 | 第18页 |
·荧光原位杂交(FISH) | 第18-19页 |
·流式细胞仪检测技术 | 第19-21页 |
·立题依据和意义 | 第21-22页 |
第二章 蛭弧菌的分离、纯化及鉴定 | 第22-34页 |
·引言 | 第22页 |
·材料与仪器 | 第22-24页 |
·实验材料 | 第22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·培养基 | 第23页 |
·溶液 | 第23-24页 |
·仪器和设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·宿主菌的培养 | 第24-25页 |
·样品预处理 | 第25页 |
·蛭弧菌的分离 | 第25页 |
·蛭弧菌的纯化 | 第25-26页 |
·蛭弧菌的电镜观测鉴定 | 第26页 |
·蛭弧菌悬浮液的制备 | 第26页 |
·透射电子显微镜观测样品的制备 | 第26页 |
·蛭弧菌的分子生物学鉴定 | 第26-27页 |
·基因组提取 | 第26-27页 |
·PCR 引物 | 第27页 |
·PCR 反应体系 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-32页 |
·蛭弧菌分离、纯化结果与分析 | 第27-29页 |
·蛭弧菌透射电镜观察结果与分析 | 第29-30页 |
·蛭弧菌 16s rDNA 鉴定结果与分析 | 第30-32页 |
·本章小结 | 第32-34页 |
第三章 宿主荧光原位杂交条件优化 | 第34-45页 |
·引言 | 第34页 |
·材料和与仪器 | 第34-37页 |
·材料 | 第34-35页 |
·试剂 | 第35页 |
·培养基 | 第35-36页 |
·溶液 | 第36页 |
·仪器和设备 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-40页 |
·玻片处理 | 第37页 |
·蛭弧菌对SD6 的裂解情况 | 第37页 |
·SD6 的培养与固定 | 第37-38页 |
·PI 染色 | 第38页 |
·透化对杂交的影响 | 第38-39页 |
·Triton X-100 透化对SD6 杂交的影响 | 第38页 |
·蛋白酶K 处理对SD6 杂交的影响 | 第38-39页 |
·探针浓度对SD6 杂交的影响 | 第39页 |
·杂交时间浓度对SD6 杂交的影响 | 第39页 |
·杂交温度浓度对SD6 杂交的影响 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-44页 |
·蛭弧菌对SD6 的裂解情况 | 第40页 |
·玻片处理 | 第40-41页 |
·PI 染色结果 | 第41-42页 |
·Triton X-100 透化结果 | 第42页 |
·蛋白酶 K 透化结果 | 第42-43页 |
·探针浓度对SD6 杂交的影响 | 第43页 |
·杂交温度对SD6 杂交的影响 | 第43-44页 |
·杂交时间对SD6 杂交的影响 | 第44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第四章 蛭弧菌荧光原位杂交条件优化 | 第45-54页 |
·引言 | 第45页 |
·材料和与仪器 | 第45-47页 |
·材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45-46页 |
·培养基 | 第46页 |
·溶液 | 第46-47页 |
·仪器和设备 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·离心对蛭弧菌和宿主分离情况的影响 | 第47页 |
·蛭弧菌培养与固定 | 第47-48页 |
·蛭弧菌PI 染色 | 第48页 |
·Triton X-100 透化对杂交的影响 | 第48页 |
·探针浓度对蛭弧菌杂交的影响 | 第48-49页 |
·杂交时间浓度对蛭弧菌杂交的影响 | 第49页 |
·杂交温度浓度对蛭弧菌杂交的影响 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-52页 |
·离心速度对蛭弧菌和宿主分离情况的影响 | 第49-50页 |
·PI 染色 | 第50页 |
·透化对杂交的影响 | 第50-51页 |
·探针浓度对蛭弧菌杂交的影响 | 第51-52页 |
·杂交时间对蛭弧菌杂交的影响 | 第52页 |
·杂交温度对蛭弧菌杂交的影响 | 第52页 |
·本章小结 | 第52-54页 |
第五章 流式细胞仪测定裂解速率 | 第54-68页 |
·引言 | 第54页 |
·材料和与仪器 | 第54-56页 |
·材料 | 第54页 |
·试剂 | 第54-55页 |
·培养基 | 第55页 |
·溶液 | 第55-56页 |
·仪器与设备 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-59页 |
·SD6 的培养与固定 | 第56页 |
·混合菌体培养与固定 | 第56-57页 |
·混合样品的杂交 | 第57页 |
·二元体系流式细胞仪测定 | 第57-58页 |
·蛭弧菌裂解SD6 速率的检测 | 第58-59页 |
·二元体系培养及取样方法 | 第58页 |
·流式细胞仪测定方法 | 第58-59页 |
·AO 染色—FCM 法检测宿主与蛭弧菌 | 第59页 |
·甲醛处理菌体死亡率的研究 | 第59页 |
·灭活与存活混合菌体的流式细胞仪检测 | 第59页 |
·结果与分析 | 第59-67页 |
·宿主的培养与固定 | 第59页 |
·蛭弧菌的培养与固定 | 第59页 |
·混合菌体的杂交 | 第59-63页 |
·蛭弧菌裂解SD6 速率的检测 | 第63-65页 |
·2%甲醛对蛭弧菌和宿主的致死性 | 第65页 |
·AO 染色法检测宿主-蛭弧菌二元体系 | 第65-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
结论与展望 | 第68-70页 |
结论 | 第68-69页 |
创新点 | 第69页 |
展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-74页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |