八仙花和艳果金丝桃再生与遗传转化体系研究
| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 缩写词 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| ·木本观赏植物再生与遗传转化体系概述 | 第16-17页 |
| ·八仙花组织培养及遗传转化体系研究进展 | 第17-21页 |
| ·概况 | 第17页 |
| ·离体快繁研究进展 | 第17-18页 |
| ·植株再生研究进展 | 第18-20页 |
| ·遗传转化研究进展 | 第20页 |
| ·八仙花病害与分离 | 第20-21页 |
| ·金丝桃属组织培养及遗传转化研究进展 | 第21-24页 |
| ·概况 | 第21-22页 |
| ·快繁体系研究进展 | 第22页 |
| ·再生体系研究进展 | 第22-23页 |
| ·遗传转化研究进展 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 八仙花再生体系建立 | 第26-58页 |
| 1 材料与方法 | 第26-32页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·培养基与培养条件 | 第26页 |
| ·八仙花无菌苗体系建立 | 第26-27页 |
| ·八仙花直接再生体系建立 | 第27-30页 |
| ·直接再生芽遗传变异检测 | 第30-31页 |
| ·数据统计 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-54页 |
| ·八仙花无菌苗体系建立 | 第32-33页 |
| ·八仙花无菌苗增殖 | 第33-35页 |
| ·八仙花再生体系建立 | 第35-54页 |
| ·外植体类型对基因型Hyd1再生的影响 | 第35-36页 |
| ·叶龄、叶片切取及接种方式对再生的影响 | 第36-38页 |
| ·植物生长调节剂配比对直接再生的影响 | 第38-43页 |
| ·基本培养基类型对叶片直接再生的影响 | 第43-44页 |
| ·暗培养对叶片直接再生的影响 | 第44-45页 |
| ·头孢霉素对叶片直接再生的影响 | 第45-46页 |
| ·不同基因型叶片直接再生 | 第46-49页 |
| ·丛生芽的生根诱导 | 第49-51页 |
| ·再生苗遗传变异检测 | 第51-54页 |
| 3 小结与讨论 | 第54-58页 |
| ·无菌苗体系建立及快繁 | 第54页 |
| ·外植体类型、幼嫩程度和接种方式对再生的影响 | 第54-55页 |
| ·植物生长调节剂对再生的影响 | 第55页 |
| ·不同基本培养基对再生的影响 | 第55页 |
| ·暗培养对再生的影响 | 第55-56页 |
| ·基因型对再生的影响 | 第56页 |
| ·组培苗生根过程中气生根的问题 | 第56页 |
| ·再生苗的体细胞变异 | 第56-58页 |
| 第三章 八仙花遗传转化体系研究 | 第58-74页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·受体材料 | 第58页 |
| ·质粒和农杆菌 | 第58-59页 |
| ·菌株培养及工作菌液制备 | 第59页 |
| ·根癌农杆菌介导八仙花叶盘遗传转化方法 | 第59-60页 |
| ·头孢霉素对抑菌效果影响 | 第60页 |
| ·卡那霉素(Km)对叶片再生的影响 | 第60页 |
| ·卡那霉素(Km)对再生苗生根的影响 | 第60页 |
| ·预培养时间对基因型Hyd1遗传转化的影响 | 第60页 |
| ·侵染时间对基因型Hyd1遗传转化的影响 | 第60-61页 |
| ·共培养时间对基因型Hyd1遗传转化的影响 | 第61页 |
| ·菌液浓度对基因型Hyd1遗传转化的影响 | 第61页 |
| ·GUS基因组的组织化学法检测 | 第61页 |
| ·抗性愈伤和抗性苗获得 | 第61-62页 |
| ·培养条件 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-72页 |
| ·头孢霉素对抑菌效果的影响 | 第62-63页 |
| ·Km对叶片再生的影响 | 第63-64页 |
| ·卡那霉素(Km)对再生苗生根的影响 | 第64-66页 |
| ·转化条件对外植体瞬时表达的影响 | 第66-69页 |
| ·抗性愈伤和抗性苗获得 | 第69-72页 |
| 3 小结与讨论 | 第72-74页 |
| 第四章 金丝桃再生体系建立 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第74-76页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·培养基与培养条件 | 第74页 |
| ·直接再生体系的建立 | 第74-75页 |
| ·数据统计 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-82页 |
| ·艳果金丝桃无菌苗增殖 | 第76-77页 |
| ·基因型再生的影响 | 第77-78页 |
| ·防褐化处理对再生的影响 | 第78-79页 |
| ·TDZ/NAA对基因型Hyp3再生的影响 | 第79-80页 |
| ·再生芽生根与生根苗的移栽 | 第80-82页 |
| 3 小结与讨论 | 第82-84页 |
| 第五章 金丝桃遗传转化体系的初步研究 | 第84-93页 |
| 1 材料与方法 | 第84-87页 |
| ·试验材料 | 第84页 |
| ·根癌农杆菌菌株及质粒 | 第84-85页 |
| ·主要培养基及主要试剂的配制 | 第85页 |
| ·根癌农杆菌的活化和工程菌液的制备 | 第85页 |
| ·基因型Hyp3叶片对卡那霉素的敏感性 | 第85页 |
| ·农杆菌菌株及菌液浓度的选择 | 第85-86页 |
| ·预培养和侵染时间的影响 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-92页 |
| ·基因型Hyp3叶片对卡那霉素的敏感性 | 第87-88页 |
| ·不同农杆菌菌株及菌液浓度对遗传转化的影响 | 第88-89页 |
| ·预培养和侵染时间的影响 | 第89-92页 |
| 3 小结与讨论 | 第92-93页 |
| 第六章 八仙花叶斑病的分离与鉴定 | 第93-99页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·材料 | 第93页 |
| ·病原菌分离 | 第93页 |
| ·致病性检测 | 第93页 |
| ·病原菌DNA提取 | 第93-94页 |
| ·病原菌的ITS分析 | 第94-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-97页 |
| ·八仙花叶斑病症状观察 | 第95-96页 |
| ·病原菌的形态特征 | 第96页 |
| ·病原菌致病性检测 | 第96-97页 |
| ·病原菌rDNA-ITS分析 | 第97页 |
| 3 小结与讨论 | 第97-99页 |
| 第七章 结论与讨论 | 第99-101页 |
| 1. 八仙花和艳果金丝桃再生体系的比较 | 第99-100页 |
| 2. 八仙花和艳果金丝桃遗传转化体系的比较 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 攻博期间发表论文及国家专利申请 | 第113-114页 |
| 攻博期间留学和参与国际合作项目经历 | 第114-115页 |
| 附录 | 第115-120页 |
| 附录Ⅰ ISSR通用引物表 | 第115-117页 |
| 附录Ⅱ 八仙花叶斑病ITS序列 | 第117-118页 |
| 附录Ⅲ 八仙花 | 第118-119页 |
| 附录Ⅳ 金丝桃 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
